張國梅 (鄭州市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科，河南 鄭州 450007)

卵巢上皮性腫瘤是女性常見的生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之一，死亡率在女性惡性腫瘤中最高。其發(fā)生發(fā)展是個復(fù)雜的過程，多種蛋白和相關(guān)因子在其中起重要作用。生存素(survivin)是凋亡蛋白抑制因子家族成員之一，與多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程有密切關(guān)系〔1〕。有研究發(fā)現(xiàn)，同源性磷酸酶張力蛋白(PTEN)是一個多種腫瘤及癌前病變中容易發(fā)生突變或缺失的抑癌基因，與腫瘤密切相關(guān)〔2〕。本文旨在探討PTEN和survivin在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)水平及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2007年1月至2010年1月我院手術(shù)切除的卵巢上皮性腫瘤110例，其中良性腫瘤38例，惡性腫瘤72例，另收集癌旁正常卵巢組織20例作為對照組?；颊吣挲g34～62〔平均(57.4±89.71)〕歲。手術(shù)切除的卵巢上皮性惡性腫瘤標(biāo)本全部經(jīng)病理醫(yī)生確診，根據(jù)國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO，2000年)制定的標(biāo)準(zhǔn)進行病理分期:Ⅰ期10例、Ⅱ15例、Ⅲ期21例、Ⅳ期26例;根據(jù)WHO分類標(biāo)準(zhǔn)進行組織學(xué)分型:漿液型42例，黏液型20例，透明細(xì)胞癌4例，子宮內(nèi)膜樣癌6例;病理分級:高分化18例，中分化26例，低分化28例。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移30例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移42例。所有患者臨床資料保存完整，術(shù)前未經(jīng)放、化療治療。

1.2 方法 石蠟包埋組織切片采用SABC免疫組化法(武漢博士德)進行PTEN和survivin檢測(Abcam)，其中空白對照采用磷酸鹽緩沖液(PBS)置換一抗，陽性對照采用已知陽性標(biāo)本。PTEN以胞質(zhì)或胞核出現(xiàn)棕色顆粒為陽性;survivin以胞質(zhì)或胞膜出現(xiàn)棕色顆粒為陽性。在高倍鏡下(×200)每張切片隨機選取5個視野，計數(shù)視野中陽性細(xì)胞數(shù)和腫瘤細(xì)胞的總細(xì)胞數(shù)，陽性細(xì)胞數(shù)占總細(xì)胞數(shù)比例＜1%為陰性，1% ～10%為弱陽性，11%～50%為中度陽性，＞50%為強陽性，其中弱陽性、中度陽性和強陽性視為陽性表達(dá)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗。相關(guān)性用配對資料的關(guān)聯(lián)分析，用Pearson列聯(lián)系數(shù)表示。

2 結(jié)果

2.1 PTEN和survivin蛋白在正常卵巢、良性腫瘤及惡性腫瘤的表達(dá)比較 PTEN在正常卵巢、良性腫瘤及惡性腫瘤組織的陽性表達(dá)分別為 20例(100%)、35例(92.1%)、28例(38.9%)，PTEN在惡性腫瘤組織的陽性表達(dá)明顯低于正常卵巢和良性腫瘤組織(P＜0.01)，在正常卵巢和良性腫瘤組織的表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。survivin在正常卵巢、良性腫瘤及惡性腫瘤組織的陽性表達(dá)分別為0、1例(2.6%)、48例(66.7%)，survivin在惡性腫瘤的陽性表達(dá)明顯高于正常卵巢和良性腫瘤組織(P＜0.01)，在正常卵巢和良性腫瘤組織的表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。

2.2 卵巢上皮性惡性腫瘤不同臨床病理特征與PTEN和survivin蛋白表達(dá)的關(guān)系 PTEN在卵巢上皮性惡性腫瘤的陽性表達(dá)率與FIGO分期、病理分級正相關(guān)(P＜0.05，P＜0.01)，與組織分型以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)(P＞0.05)。survivin在卵巢上皮性惡性腫瘤的陽性表達(dá)率與FIGO分期、病理分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移正相關(guān)(P＜0.05，P＜0.01)，與組織分型無關(guān)(P＞0.05)。見表1。

表1 卵巢上皮性惡性腫瘤不同臨床病理特征與PTEN和survivin蛋白表達(dá)的關(guān)系〔n(%)〕

2.3 PTEN和survivin蛋白在惡性腫瘤表達(dá)的相關(guān)性 在惡性腫瘤組織中，PTEN和survivin雙陽性表達(dá)10例，雙陰性表達(dá)10例，僅PTEN陽性18例，僅survivin陽性34例，PTEN和survivin蛋白在惡性腫瘤表達(dá)負(fù)相關(guān)(r=－0.415 6，P=0.000 4)。

3 討論

PTEN基因是抑癌基因，由多功能磷酸酶編碼，作為磷酸酶在胞質(zhì)信號傳遞中起著復(fù)雜和重要的作用，在多種腫瘤及癌前病變中容易發(fā)生突變或缺失，主要參與細(xì)胞生長調(diào)節(jié)，具有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡以及抑制腫瘤細(xì)胞生長、侵襲轉(zhuǎn)移等功能〔3〕。有研究發(fā)現(xiàn)，PTEN蛋白低表達(dá)參與前列腺癌、子宮內(nèi)膜癌等多種惡性腫瘤的演進過程〔4〕。本研究發(fā)現(xiàn)，PTEN蛋白在卵巢上皮性惡性腫瘤中陽性表達(dá)水平明顯低于良性卵巢腫瘤和正常卵巢組織，PTEN在卵巢上皮性惡性腫瘤的陽性表達(dá)率與FIGO分期、病理分級正相關(guān)，提示PTEN失活在卵巢癌極為常見，在控制卵巢癌發(fā)生發(fā)展過程負(fù)性調(diào)控中起一定作用。因此，它可能與卵巢癌的演進有密切關(guān)系。

研究發(fā)現(xiàn)，survivin基因是作用最強的凋亡抑制基因，在正常成熟的器官、組織、細(xì)胞中測不到survivin的表達(dá)，選擇性表達(dá)于常見的惡性腫瘤和胚胎組織中，如乳腺癌、結(jié)腸癌、肺癌、前列腺癌、卵巢癌、黑色素瘤、白血病、腎癌、淋巴瘤等，與腫瘤的惡性程度、侵襲性、預(yù)后及腫瘤的耐藥作用有關(guān)。其生物學(xué)功能主要包括參與細(xì)胞周期的調(diào)控、抑制細(xì)胞凋亡和參與血管形成，參與腫瘤發(fā)生和發(fā)展的作用機制。本文發(fā)現(xiàn)，survivin在正常卵巢組織和卵巢良性上皮性腫瘤組織中基本無表達(dá)，在惡性上皮性腫瘤組織陽性表達(dá)率明顯升高，而且survivin在卵巢上皮性惡性腫瘤的陽性表達(dá)率與FIGO分期、病理分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移正相關(guān)，提示survivin基因可能通過抑制卵巢癌細(xì)胞凋亡而對卵巢癌的發(fā)生發(fā)展、轉(zhuǎn)移起重要作用〔5〕。

通過相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，PTEN和survivin蛋白在惡性腫瘤的表達(dá)負(fù)相關(guān)，可能因為是PTEN基因失活，失去磷酸酶的作用，使得survivin蛋白維持34位點蘇氨酸的磷酸化，從而抑制細(xì)胞凋亡，促進卵巢癌的發(fā)生〔6〕。提示survivin基因的表達(dá)與PTEN基因的失活在卵巢癌的發(fā)生中有協(xié)同作用。同時，在卵巢癌中出現(xiàn)PTEN陽性和survivin陽性共表達(dá)現(xiàn)象，提示在卵巢癌的發(fā)生過程中可能有其他分子生物學(xué)機制參與，有待進一步研究。因此，聯(lián)合檢測PTEN和survivin蛋白表達(dá)對于評價卵巢癌的惡性程度、轉(zhuǎn)移和預(yù)后具有重要臨床價值。

1 耿海燕，邵淑麗.Survivin和p53蛋白在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)、相關(guān)性及意義〔J〕.中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2010;4(3):8-9.

2 Ang S，Chen H，Hirota K，et al.Disruption of oxygen homeostasis underlies congenital Chuvash polythemia〔J〕.Nat Geney，2002;32(4):614-21.

3 李鎖嚴(yán)，楊薇薇，溫秋婷，等.上皮性卵巢癌中PTEN和HIF-1的表達(dá)及其相關(guān)性〔J〕.臨床與實驗病理學(xué)雜志，2009;25(4):361-3.

4 Waite KA，Eng C.Proteain PTEN:form and function〔J〕.AmJ Hum Genet，2002;70(4):829-44.

5 Sui L，Dong Y，Ohno M，et al.Survivin expression and its correlation with cell proliferation and prognosis in epithelial ovarian tumors〔J〕.Int J Oncol，2002;21(2):315-20.

6 朱巧英，沈宇飛，胡建銘，等.卵巢上皮性腫瘤中PTEN和survivin的表達(dá)及意義〔J〕.實用醫(yī)學(xué)雜志，2009;25(18):3009-10.