(開封市醫(yī)學(xué)科學(xué)研究所，河南開封 475000)

母嬰傳播是乙型肝炎病毒傳播的重要方式，也是乙肝流行的主要因素［1］。通常認(rèn)為乙型肝炎是血源性傳播疾病，母乳喂養(yǎng)是否增加HBV母嬰傳播風(fēng)險(xiǎn)，至今尚存爭(zhēng)議。2009年10月～2011年8月，我們對(duì)249例產(chǎn)婦血清和乳汁免疫學(xué)標(biāo)志物(HBVM)和HBV-DNA進(jìn)行了聯(lián)合檢測(cè)，現(xiàn)分析結(jié)果，旨在為阻斷HBV母嬰傳播提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 249例HBV攜帶者產(chǎn)婦來(lái)自2009年10月～2011年8月開封市區(qū)及其5縣各級(jí)醫(yī)院婦產(chǎn)科住院分娩者，產(chǎn)婦年齡16～41歲。

1.2 相關(guān)指標(biāo)檢測(cè) 孕婦分別于產(chǎn)前取靜脈全血3 mL分離血清;產(chǎn)后3～5天用無(wú)菌鹽水清洗乳頭收集乳汁5 mL;乳汁標(biāo)本處理參照文獻(xiàn)［2］、血清標(biāo)本處理參照試劑說(shuō)明書。①HBV-M:采用ELISA法，試劑購(gòu)自上?？迫A生物工程有限公司。乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗體(抗-HBs)、e抗原(HBeAg)、乙肝前 S1抗原(Pre-S1Ag)P/N≥2.1 為陽(yáng)性，e抗體(抗-HBe)和乙肝核心抗體(抗-HBc)P/N≤2.1為陽(yáng)性(P為檢測(cè)標(biāo)本OD值，N為陰性對(duì)照OD值);②HBV-DNA檢測(cè):采用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(FQ-PCR法)。≥5.0×102IU/mL為陽(yáng)性。試劑盒購(gòu)自中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用 SPSS18.0版系統(tǒng)軟件處理。陽(yáng)性率及關(guān)聯(lián)性分析采用χ2檢驗(yàn)，P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HBV-M 249例產(chǎn)婦血清HBV-M有3種陽(yáng)性模式，在乳汁中又分別存在不同的HBV-M陽(yáng)性模式。結(jié)果見表1。

表1 249例產(chǎn)婦血清與乳汁HBV-M陽(yáng)性模式

2.2 血清與乳汁Pre-S1Ag的關(guān)系 血清、乳汁中Pre-S1Ag陽(yáng)性分別為106例(占42.57%)、3例(占2.04%)，關(guān)聯(lián)性分析表明二者關(guān)系不密切(χ2=4.10，關(guān)聯(lián)系數(shù)P=0.127)。結(jié)果見表2。

表2 249例產(chǎn)婦血清與乳汁Pre-S1Ag的關(guān)系

2.3 血清與乳汁HBV-DNA的關(guān)系 249例產(chǎn)婦乳汁HBV-DNA陽(yáng)性率與血清HBV-DNA載量大致呈正相關(guān)，不同血清HBV-DNA載量間乳汁HBV-DNA陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=113.48，P＜0.01)。結(jié)果見表3。

3 討論

表3 249例產(chǎn)婦乳汁HBV-DNA陽(yáng)性率與血清HBV-DNA載量的關(guān)系

HBV母嬰傳播主要有三種途徑，即宮內(nèi)感染(HBV通過(guò)胎盤感染胎兒)、產(chǎn)時(shí)感染(分娩時(shí)胎兒接觸母親血液和羊水而感染)、產(chǎn)后感染(通過(guò)母嬰密切接觸和哺乳而感染)［3］。近年來(lái)大量文獻(xiàn)報(bào)道母乳有傳播病毒的可能［3～5］。姚葉珊等［3］認(rèn)為，母親為HBV攜帶者的嬰兒出生時(shí)乙肝病毒標(biāo)志物陰性者，母乳喂養(yǎng)3個(gè)月后，母親為大三陽(yáng)的嬰兒有28%發(fā)生HBV感染，母親為小三陽(yáng)的嬰兒有7.8%發(fā)生HBV感染。因此，探討HBV攜帶產(chǎn)婦血清與乳汁HBV標(biāo)志物的關(guān)系，可能對(duì)預(yù)防和阻斷HBV母嬰傳播有一定價(jià)值。

本研究結(jié)果顯示，常見的三種血清HBV-M陽(yáng)性模式在乳汁中分別有不同的表達(dá)形式，提示同一產(chǎn)婦個(gè)體，其血清與乳汁中HBV標(biāo)志物可能存在不同的表達(dá)模式。本組249例血清HBsAg陽(yáng)性的產(chǎn)婦，乳汁HBsAg陽(yáng)性者229例(91.97%)，提示血清HBsAg陽(yáng)性的產(chǎn)婦，乳汁HBsAg陽(yáng)性的可能性很大，乳汁中HBV可能主要來(lái)源于血清。但155例血清①④⑤陽(yáng)性產(chǎn)婦中有134例乳汁以①⑤陽(yáng)性模式表達(dá)，且抗-HBe未見表達(dá);3例血清①④⑤陽(yáng)性和1例血清①⑤陽(yáng)性的產(chǎn)婦，乳汁HBeAg為陽(yáng)性，提示乳汁中HBV不僅來(lái)源于外周血清，還可能有其它來(lái)源途徑;亦表明乳汁是HBV排泄的重要途徑之一。

Pre-S1Ag是HBsAg外殼蛋白成分之一，近年來(lái)被認(rèn)為是優(yōu)于HBeAg的免疫學(xué)血清標(biāo)志物［6］。表2顯示，249例產(chǎn)婦血清 Pre-S1Ag陽(yáng)性 106例(42.57%)，高于 HBeAg 陽(yáng)性率(32.53%)。但乳汁標(biāo)本Pre-S1Ag陽(yáng)性僅3例(2.04%)，遠(yuǎn)低于文獻(xiàn)［6］報(bào)道的34.5%，其中原因有待探討。對(duì)249例產(chǎn)婦血清與乳汁Pre-S1Ag檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)二者關(guān)系不密切。提示臨床開展血清Pre-S1Ag檢測(cè)對(duì)評(píng)價(jià)HBV的傳染性可能有一定價(jià)值，但乳汁Pre-S1Ag檢測(cè)的臨床意義不大。

HBV-DNA是判斷HBV復(fù)制及傳染性最為客觀的直接指標(biāo)。表3結(jié)果顯示，249例產(chǎn)婦乳汁HBVDNA陽(yáng)性率與血清HBV-DNA載量水平有關(guān)，血清HBV-DNA載量越高，乳汁HBV-DNA陽(yáng)性的可能性越大，且不同血清HBV-DNA載量者其乳汁HBVDNA陽(yáng)性率差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)新生兒而言，產(chǎn)婦血清和乳汁HBV-DNA載量越高，宮內(nèi)被感染的可能性就越大，母乳喂養(yǎng)被感染的可能性也越大。有文獻(xiàn)認(rèn)為產(chǎn)婦血清HBV-DNA分泌到乳汁中可能具有界面濃度(106copies/mL)［2］，但本組104 例血清HBV-DNA載量為104～5.0×102IU/mL的產(chǎn)婦乳汁標(biāo)本中有32例HBV-DNA陽(yáng)性，且在71例血清HBV-DNA載量＜5.0×102IU/mL的產(chǎn)婦乳汁中檢出3例HBV-DNA陽(yáng)性，表明血清HBV-DNA載量較低或陰性的產(chǎn)婦，乳汁仍有分泌HBV-DNA的可能性。

2010年版慢性乙型肝炎防治指南［7］認(rèn)為，新生兒在出生12 h內(nèi)注射抗乙肝免疫球蛋白和乙型肝炎疫苗后可接受HBsAg陽(yáng)性母親的哺乳。但有研究認(rèn)為，目前應(yīng)用抗乙肝免疫球蛋白和乙型肝炎疫苗均僅針對(duì)未變異的HBV，且使用效果與患者本身的基因敏感性有關(guān)［4］。鑒于孕期注射抗乙肝免疫球蛋白和乙型肝炎疫苗并不能完全有效阻斷HBV母嬰傳播，故聯(lián)合檢測(cè)和綜合分析孕期血清與產(chǎn)后乳汁HBV感染狀況可能對(duì)有效干預(yù)和阻斷母嬰傳播有一定價(jià)值。本文納入樣本較少，欲充分顯現(xiàn)乳汁HBV標(biāo)志物檢測(cè)對(duì)于指導(dǎo)母乳喂養(yǎng)及阻斷母嬰傳播的臨床價(jià)值，還需母乳喂養(yǎng)和人工喂養(yǎng)的嬰兒感染率比較研究的大樣本數(shù)據(jù)支持。

［1］王小蘭，胡美霞，周世瓊.熒光定量PCR檢測(cè)臍血HBV-DNA與母嬰傳播的臨床研究［J］.中國(guó)婦幼保健，2007，22(12):1684-1685.

［2］彭其才，許成芳，藤奔琦.產(chǎn)婦血清HBVDNA含量對(duì)乳汁和新生兒血清HBVDNA濃度的影響［J］.中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版)，2010，31(5):729-731.

［3］姚葉珊，鄺炎波.乙肝病毒母嬰垂直傳播分析［J］.現(xiàn)代醫(yī)院，2006，6(3):58-59.

［4］張合民，王雪霞.接受免疫治療HBV攜帶產(chǎn)婦的新生兒HBV感染情況分析［J］.山東醫(yī)藥，2008，48(30):86.

［5］張永亮.慢性乙型肝炎產(chǎn)婦血液、初乳、滿月乳HBV載量分析［J］.國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2009，30(12):1220-1221.

［6］陳銘，艾彪，何瀚，等.乙型肝炎產(chǎn)婦血清與乳汁HBV標(biāo)志物檢測(cè)意義［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2010，7(6):517-518.

［7］中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)，中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì).慢性乙型肝炎防治指(2010 年版)［J］.臨床肝膽病雜志，2011，27(1):1-16.