楊懷志，單悌超，黃桂華

(山東大學(xué) 藥學(xué)院，山東 濟南 250012)

奧沙西羅(Oxaceprol)，化學(xué)名為N-乙酰基-L-羥基脯氨酸，用于治療骨關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，緩解疼痛和四肢僵直，是一種已確定用于關(guān)節(jié)病治療且無較大副作用的非典型的炎癥抑制劑。該藥能抑制白血球滲入急性炎癥位點，主要是通過抑制白血球粘連和遷移發(fā)揮作用，對滑液微循環(huán)也有效［1］。

奧沙西羅有效血藥濃度較高(日給藥量600 mg)，清除半衰期較短［2］(肌肉注射為 44.9 min，口服給藥為2～2.5 h)，為減少給藥頻率，提高用藥順應(yīng)性，我們已制備了12 h釋藥的奧沙西羅骨架緩釋片并進行了質(zhì)量考察和釋藥機理分析［3］，但該制劑載藥量有限。為提高載藥量和制劑質(zhì)量穩(wěn)定性，我們設(shè)計制備了奧沙西羅薄膜控釋片。本研究采用粉末直接壓片制備奧沙西羅載藥片芯，滾動包衣法包衣，考察了處方、工藝因素對控釋片釋藥行為的影響，優(yōu)化處方，并分析釋藥機制。

1 材料

奧沙西羅，武漢阿米諾氨基酸公司;奧沙西羅對照品(含量為99.8%)，山東大學(xué)藥學(xué)院藥物化學(xué)研究所;聚乙二醇6000(PEG6000)，北京益利精細(xì)化學(xué)品有限公司;檸檬酸三乙酯(TEC)，安徽蚌埠豐原醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司;乙基纖維素(EC-10cP、EC-45cP)，上?？房蛋虏牧嫌邢薰?微晶纖維素(MCC)、滑石粉，山東聊城阿華制藥有限公司;其他試劑均為市售分析純。

UV-2102PCS紫外分光光度計，上海尤尼柯儀器有限公司;B200-A型包衣機，陜西寶雞凱諾技術(shù)開發(fā)有限公司;D800-LS智能溶出儀，天大天發(fā)科技有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 含量測定

采用紫外分光光度法測定奧沙西羅含量［3］，測定波長為210 nm。標(biāo)準(zhǔn)曲線方程:A=0.027 6 C+0.046 8，r=0.999 3，其中 A 為吸光度值，C 為濃度。奧沙西羅濃度在5～30 μg/mL范圍內(nèi)線性良好。

2.2 釋放度測定

參照文獻［3］方法測定釋放度。分別于0.5，1，2，4，6，8，10，12 h 取樣，按外標(biāo)法計算溶出介質(zhì)中的奧沙西羅含量，以累積釋放百分率(Q%)為考察指標(biāo)，按公式:f2=50log{［1+1/n∑(Rt－ Tt)2］－0.5×100}，其中n為時間點個數(shù)，Rt、Tt分別為不同批次藥品在時間t的釋放度值，計算釋藥曲線的相似因子f2分析兩曲線的相似性［4］。一般情況下，f2值越大，表明兩曲線相似性越好，當(dāng)f2＞50時，表明兩曲線相似性較好，當(dāng)f2＜50時，表明兩曲線之間具有顯著性差異。

2.3 奧沙西羅薄膜包衣控釋片的制備

2.3.1 載藥片芯 將奧沙西羅和EC-45cP分別過80目篩，按處方量稱取奧沙西羅和EC-45cP，等量遞加法混合均勻，加入1%滑石粉混勻，直接壓片即得。2.3.2 包衣控釋片 將適量奧沙西羅邊攪拌邊加入到95%乙醇中，待溶解后，加入處方量的EC-10cP和PEG6000，繼續(xù)攪拌2 h得包衣液(固體含量為6.0%)。取片芯稱重后在包衣鍋內(nèi)預(yù)熱5 min，以滾動包衣法包衣結(jié)束后于40℃塑化2 h，稱重并計算包衣增重［5］。

2.4 處方因素對藥物釋放行為的影響

根據(jù)預(yù)試驗結(jié)果，初步選定骨架材料用量、包衣層厚度和致孔劑用量等處方參數(shù)，改變處方單一因素，按2.3.1 項下方法制備片芯，按2.3.2 項下方法包衣，以片劑外觀及體外釋放度為評價指標(biāo)，考察處方因素對制劑質(zhì)量的影響。

2.4.1 骨架材料用量的影響 以EC-45cP與藥物以不同比例(30∶10，30∶15，30∶20)混合，結(jié)果見圖 1。各曲線間 f2值分別為 70.2，49.2，48.2，其中有 f2值小于50，表明骨架材料用量對制劑的釋藥行為有影響。骨架材料用量越大，所形成的水不溶性骨架孔隙越小，從而使水分滲入和藥物溶出路徑變長，釋藥速率減慢。

圖1 不同骨架材料用量對藥物釋放的影響(n=6)Fig.1 Release profiles of drugs with different amounts of matrix materials(n=6)

2.4.2 包衣層厚度的影響 控制包衣增重分別為5.29%，8.13%，10.46% 和 17.33%，結(jié)果見圖 2。隨著包衣層厚度的增加，藥物釋放明顯減慢。各曲線間 f2值分別為 61.0，51.2，39.2，55.4，48.6，68.9，其中有f2值小于50，表明包衣層厚度是控制藥物釋放的一個重要因素。在致孔劑用量一定的情況下，隨著包衣層厚度增加，致孔劑溶解后所形成小孔的長度和彎曲性均增加，藥物經(jīng)包衣薄膜自片芯釋放所經(jīng)路徑延長，阻力增大，藥物釋放減慢。而包衣厚度過小無法達(dá)到控釋效果，故選擇包衣增重 8.0%。

圖2 不同包衣增重對藥物釋放的影響(n=6)Fig.2 Release profiles of drugs with different coating levels(n=6)

2.4.3 致孔劑用量的影響 其他因素不變，僅改變包衣液中奧沙西羅與 EC-10cP的比例(分別為45∶55，50∶50 及 55∶45)，結(jié)果見圖 3。隨致孔劑用量的增加，藥物釋放明顯增快。各曲線間f2值分別為74.1，36.3，35.7，其中有 f2值小于 50，表明致孔劑用量是控制藥物釋放的一個重要因素。在包衣厚度一定的情況下，致孔劑用量越大，其溶解后所形成的小孔就越多，小孔直徑和彎曲性均變小，藥物經(jīng)包衣薄膜自片芯釋放所經(jīng)路徑縮短，阻力減小，使藥物釋放加快。

圖3 不同致孔劑用量對藥物釋放的影響(n=6)Fig.3 Release profiles of drugs with different amount of poringagent(n=6)

2.4.4 增塑劑用量的影響 其他因素不變，僅改變包衣液中增塑劑PEG6000的用量(分別為包衣層固體質(zhì)量的10%，15%，20%)，結(jié)果見圖4。隨增塑劑用量的增加，藥物釋放有所加快。各曲線間f2值分別為66.3，39.2，43.7，其中有 f2值小于 50，表明增塑劑的用量對藥物釋放有影響。本文所選用的增塑劑具有水溶性，制劑遇水后除致孔劑溶解致孔外，增塑劑也溶解產(chǎn)生致孔效應(yīng)，因而對制劑中藥物的釋放也產(chǎn)生較顯著的影響。

圖4 不同增塑劑用量對藥物釋放的影響(n=6)Fig.4 Release profiles of drugs with different amount of plasticizer(n=6)

2.5 工藝因素對藥物釋放行為的影響

根據(jù)預(yù)實驗以及處方單因素考察結(jié)果，初步得出包衣控釋片優(yōu)選處方，以此處方制備包衣片，改變制片和包衣工藝參數(shù)，考察工藝因素對制劑質(zhì)量的影響。

2.5.1 片芯壓力的影響 分別以三種壓力(4，7，11 kg/mm2)壓制載藥片芯，制備包衣控釋片，考察發(fā)現(xiàn)較大和較小的壓力下制劑體外釋放度均較快。各曲線間 f2值分別為 72.4，46.4，44.4。壓力較大時片芯壓縮致密，吸水膨脹較明顯，甚至可出現(xiàn)脹破衣膜;而壓力較小則使藥物易于溶出。綜合考慮片芯質(zhì)量和制備工藝條件，將片芯壓力定為6～7 kg/mm2，可獲得用于包衣的良好片芯。

2.5.2 包衣溫度的影響 不同送風(fēng)溫度(35，40，45，50℃)下進行包衣制備包衣片，實驗發(fā)現(xiàn)溫度較高時由于包衣液迅速被吹干，容易形成絮狀物而使增重困難;溫度較低則由于溶劑揮發(fā)過慢而容易發(fā)生粘連，片芯則可能吸收溶劑而出現(xiàn)崩解破碎，影響制劑質(zhì)量。根據(jù)實驗結(jié)果，將送風(fēng)溫度定為40～45℃，制得的包衣片外形美觀，質(zhì)量較好。

2.5.3 霧化壓力的影響 選擇不同霧化壓力(0.10，0.15，0.20 mPa)進行試驗。霧化壓力過小，包衣液霧化不完全，霧滴的粒徑增大，使形成的衣膜連續(xù)性差，易發(fā)生粘連和崩片現(xiàn)象;霧化壓力過大，雖然能提高霧化效率，但過細(xì)的霧滴會使液滴鋪展不夠，產(chǎn)生噴霧干燥，影響包衣質(zhì)量和包衣率，包衣膜不易形成。研究發(fā)現(xiàn)，選擇霧化壓力為 0.15 mPa，可獲得較好包衣效果。

2.5.4 噴霧速率的影響 在不同噴霧速率下包衣，噴霧速率較低，包衣液霧化完全，霧滴粒徑小，衣膜致密，使水分進入衣膜的速率減小，時滯延長，并使生產(chǎn)時間延長;噴霧速率較高，霧滴粒徑增大，衣膜的連續(xù)性差，粗糙程度增加，并出現(xiàn)崩片現(xiàn)象。根據(jù)實驗將噴霧速率選為3.0 mL/min，可獲得良好效果。

2.6 正交試驗優(yōu)化處方和工藝［6］

根據(jù)預(yù)實驗和單因素實驗考察結(jié)果，選擇對實驗結(jié)果影響較大的片芯骨架材料用量(A)、致孔劑用量(B)、增塑劑用量(C)、包衣厚度(D)作為考察因素，每個因素選定三個水平，采用L9(34)正交表安排實驗，結(jié)果見表1。

根據(jù)預(yù)先設(shè)計模型，結(jié)合《中國藥典》2010年版二部附錄ⅩⅨD緩釋、控釋和遲釋制劑指導(dǎo)原則，擬選擇2 h(Q2h=16.7%)、6 h(Q6h=50.0%)、10 h(Q10h=83.3%)三個時間點的體外累積釋放度作為考察指標(biāo)，按公式:Score=［(Q2h－16.7)2+(Q6h－50.0)2+(Q10h－83.3)2］/3，加權(quán)評分法進行方差分析，評分越低，因素的水平數(shù)越佳。

由表1可見，各因素對釋放的影響程度為B＞C＞D＞A，處方的最優(yōu)水平組合為A2B2C3D2，即片芯骨架材料用量150 mg、奧沙西羅與EC-10cP的比例為50∶50、PEG6000用量20%、包衣增重8%。

2.7 處方工藝穩(wěn)定性與釋藥機理分析

按照優(yōu)選方案制備三批奧沙西羅包衣控釋片，進行制劑質(zhì)量和釋放度考察，評價處方工藝重現(xiàn)性。并進行釋藥模型擬合和釋藥機理分析。

2.7.1 處方工藝穩(wěn)定性 三批奧沙西羅包衣控釋片的體外釋藥曲線見圖5。由圖5可見，三批樣品的釋放度均符合要求。各曲線間f2值分別為51.2，61.0，68.9，三個 f2值均大于50，證明三批樣品之間無顯著性差異，表明處方合理，工藝穩(wěn)定。

表1 正交實驗結(jié)果分析(n=6)Tab.1 The results of orthogonal design(n=6)

圖5 三批樣品的體外釋藥曲線(n=6)Fig.5 The release behavior of oxaceprol tablets in three batches(n=6)

2.7.2 釋藥模型擬合 選擇常用的零級動力學(xué)方程、一級動力學(xué)方程、Higuchi方程和Ritger-Peppas方程對三批樣品的體外釋放進行數(shù)學(xué)擬合［7］，結(jié)果見表2。奧沙西羅包衣控釋片體外釋藥模型符合零級動力學(xué)方程。

Ritger-Peppas方程是描述藥物從膜控型給藥系統(tǒng)中釋放的方程，對于圓柱形給藥系統(tǒng)，t指數(shù)n的意義是:n＜0.45表示該藥物的釋放以Fick擴散機理為主，n＞0.89表示藥物釋放主要受骨架溶蝕機理控制，0.45＜n＜0.89表示藥物釋放為藥物擴散與骨架溶蝕協(xié)同作用［8］。由表2可知，三批樣品的n 值分別為0.789 1，0.846 3，0.884 0，均在 0.45 和0.89之間，表明藥物釋放為藥物擴散與骨架溶蝕協(xié)同作用。

3 討論

實驗發(fā)現(xiàn)奧沙西羅直接制片時藥物黏性較大，流動性差。添加常用填充劑進行濕法制粒，由于載藥量較大，滴加潤濕劑后發(fā)黏，難以制粒。加入流動性較好的MCC或EC-45cP直接壓片可獲得良好的片芯，但MCC溶脹系數(shù)大，吸水膨脹導(dǎo)致包衣膜破裂。故本研究采用粉末直接壓片法，既克服了上述難題，又簡便易操作。

奧沙西羅包衣控釋片釋藥速率主要受片芯骨架材料用量、致孔劑用量、增塑劑用量、包衣厚度等因素的影響，骨架材料種類、成膜材料黏度、增塑劑種類以及制備工藝對其也有一定影響，其中以致孔劑用量和包衣膜厚度影響最為顯著。釋藥機制為藥物擴散與骨架溶蝕協(xié)同作用，體外釋藥模型符合零級動力學(xué)方程，按優(yōu)化處方可制得12 h釋藥的薄膜控釋片。

表2 三批奧沙西羅包衣控釋片釋藥曲線模擬方程(n=6)Tab.2 Results of different equations and coefficient(n=6)

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