管德輝，王曉民，蘇 宇，王科亮，徐萬(wàn)海

腎細(xì)胞癌是腎實(shí)質(zhì)最常見(jiàn)的惡性腫瘤，占腎臟惡性腫瘤的80% ～90%，占成人全身惡性腫瘤的2% ～3%，發(fā)病率位居泌尿生殖系腫瘤的第2 位，每年以2%的速度增加［1］。RCC 是一種免疫原性很強(qiáng)的腫瘤，其發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及預(yù)后與機(jī)體的免疫功能變化密切相關(guān)。RCC 患者多表現(xiàn)為細(xì)胞免疫功能低下，經(jīng)過(guò)治療后患者的免疫功能又有不同程度的恢復(fù)。因此，監(jiān)測(cè)患者的細(xì)胞免疫功能，對(duì)RCC的診斷、療效分析、預(yù)后判斷有著重要的臨床意義。T 淋巴細(xì)胞亞群在細(xì)胞免疫中起到極其重要的作用，外周血T 淋巴細(xì)胞亞群的水平是反映機(jī)體細(xì)胞免疫功能的重要指標(biāo)之一，在腫瘤的免疫監(jiān)測(cè)中起著舉足輕重的作用。筆者對(duì)我院2006－12 至2009－01 間39 例RCC 患者手術(shù)前后外周血T 細(xì)胞亞群進(jìn)行檢測(cè)，并與同期健康對(duì)照組相比較，以了解RCC 患者的免疫功能變化，為臨床診斷、治療及判斷預(yù)后提供科學(xué)依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 男27 例，女12 例，年齡36 ～80 歲，平均56 歲。左側(cè)18 例，右側(cè)21 例，病程3 d ～2.4 年。均行腎癌根治術(shù)。病理類型:透明細(xì)胞癌32 例，嫌色細(xì)胞癌2 例，混合細(xì)胞癌5 例。所有患者治療前血常規(guī)、肝功、腎功均正常，無(wú)急、慢性炎性反應(yīng)，無(wú)自身免疫性疾病，不伴有其他原發(fā)惡性腫瘤，無(wú)營(yíng)養(yǎng)不良和惡病質(zhì)。健康對(duì)照組40 例來(lái)自我院同期健康體檢正常者，其中男28 例，女12 例，年齡35 ～78歲，平均54 歲。

1.2 方法 RCC 患者術(shù)前及術(shù)后2 周采集外周血2 ml，以肝素抗凝，24 h 內(nèi)送檢，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)被檢者外周血T 淋巴細(xì)胞亞群。所用儀器為美國(guó)BD 公司的FACSCali－bur 流式細(xì)胞儀，單克隆抗體為美國(guó)BD 公司的BD Tritest 產(chǎn)品。同期取體檢健康的成人外周血，同法檢測(cè)T 淋巴細(xì)胞亞群，與之對(duì)照。

2 結(jié)果

RCC 患者與健康對(duì)照組外周血淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，RCC 組與健康對(duì)照組外周血淋巴細(xì)胞亞群比較，RCC 患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較健康者降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05)，CD8+略有升高，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。RCC 患者行腎癌根治術(shù)后外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+升高，與治療前相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05);CD8+降低，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 RCC 患者與健康對(duì)照組外周血淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果(±s;%)

表1 RCC 患者與健康對(duì)照組外周血淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果(±s;%)

注:與對(duì)照組比較，①P ＜0.05;與治療前比較，②P ＜0.05

組別nCD3 +CD4 +CD8 +CD4 + /CD8+健康對(duì)照組4069.81 ±7.7239.80 ±4.9524.74 ±4.141.64 ±0.28 RCC 組治療前3954.91 ±7.37①29.58 ±4.67①25.12 ±4.081.19 ±0.17①治療后3961.46 ±5.76②34.66 ±4.26②24.35 ±3.151.52 ±0.16②

3 討論

機(jī)體免疫功能與腫瘤發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系。免疫功能低下或受到抑制時(shí)，免疫細(xì)胞不能有效識(shí)別、排斥和殺滅腫瘤細(xì)胞，腫瘤的發(fā)病率就增高;而腫瘤進(jìn)行性生長(zhǎng)時(shí)，患者免疫功能就受到抑制。經(jīng)過(guò)有效的治療后，機(jī)體的免疫功能可不同程度地恢復(fù)［2，3］。

RCC 早期臨床表現(xiàn)具有隱蔽性、多變性和非特異性，出現(xiàn)典型的臨床癥狀時(shí)往往已有廣泛進(jìn)展，甚至有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。其主要治療手段是根治性切除術(shù)，但對(duì)于晚期轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌，手術(shù)治療效果欠佳。RCC 對(duì)放療、化療均不敏感，但卻是一種免疫原性極強(qiáng)的腫瘤，免疫治療是晚期及轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌患者術(shù)后主要的輔助治療手段，細(xì)胞因子［4］、靶向治療［5］、腫瘤疫苗［6］、單克隆抗體［7］、過(guò)繼細(xì)胞免疫治療［8］和基因治療［9］等相繼進(jìn)入實(shí)驗(yàn)研究和臨床試驗(yàn)階段，生物免疫治療方法逐漸成為晚期腎細(xì)胞癌治療的重要手段。通過(guò)糾正腫瘤患者的免疫缺陷，激活特異性抗腫瘤免疫反應(yīng)，達(dá)到消滅腫瘤細(xì)胞或抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的目的。治療過(guò)程中，需要有一個(gè)客觀、準(zhǔn)確的指標(biāo)，反映機(jī)體免疫功能的變化，來(lái)檢測(cè)各種治療方法的療效。

機(jī)體抗腫瘤免疫以細(xì)胞免疫為主，主要是T 淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的特異性細(xì)胞免疫。CD(cluster of differentiation)為人白細(xì)胞分化抗原，T 淋巴細(xì)胞按其表面標(biāo)志和功能不同分為CD4+輔助亞群和CD8+抑制亞群，CD4+為輔助性T 細(xì)胞，能促進(jìn)效應(yīng)細(xì)胞抗腫瘤作用，CD8+為抑制性T 細(xì)胞，抑制機(jī)體的免疫應(yīng)答，而CD3+為成熟T 細(xì)胞［10］。T 淋巴細(xì)胞亞群在細(xì)胞免疫中起主導(dǎo)作用，在正常情況下，CD4+/CD8+比值處于相對(duì)平衡狀態(tài)，基本恒定在1.5 ～2.0 之間，免疫功能穩(wěn)定，維持體內(nèi)環(huán)境的平衡?；颊呒?xì)胞免疫的狀態(tài)直接反映機(jī)體的抗腫瘤免疫機(jī)能，也常作為判斷腫瘤患者預(yù)后的一種重要指標(biāo)。因此，檢測(cè)患者外周血T 細(xì)胞亞群的變化可作為反映機(jī)體抗腫瘤免疫能力的一個(gè)指標(biāo)，而免疫治療后CD3+、CD4+、CD8+的水平和患者長(zhǎng)期生存關(guān)系密切。腫瘤患者血清中存在抑制淋巴細(xì)胞分化增值的可溶性免疫抑制因子，包括腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的PGE2和免疫抑制酸性蛋白(IAP)等，導(dǎo)致淋巴細(xì)胞表面CD3+、CD4+抗原表達(dá)明顯減少，CD8+增高。CD4+細(xì)胞的減少及CD8+細(xì)胞的增多造成患者CD4+/CD8+比例明顯失調(diào)。文獻(xiàn)［11，12］報(bào)道腫瘤患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比例顯著低于健康對(duì)照組，而CD8+高于健康對(duì)照組，表明細(xì)胞免疫功能明顯受到抑制。因此，在治療過(guò)程中檢查T 細(xì)胞亞群能夠了解細(xì)胞免疫功能狀況，進(jìn)而了解疾病發(fā)生發(fā)展、治療效果以及預(yù)后情況，這對(duì)制定治療方案有重要的參考價(jià)值。

本研究通過(guò)檢測(cè)外周血T 淋巴細(xì)胞亞群，對(duì)RCC 患者與健康者的細(xì)胞免疫功能狀態(tài)進(jìn)行了對(duì)比，對(duì)RCC 患者手術(shù)前后的免疫功能狀態(tài)的變化進(jìn)行了觀察和分析。研究結(jié)果顯示，RCC 患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較健康者明顯降低，CD8+升高，與文獻(xiàn)［13，14］報(bào)道一致，說(shuō)明RCC 患者細(xì)胞免疫功能較健康人低。腎癌根治術(shù)后患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較術(shù)前明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.05)，CD8+也有所下降，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明手術(shù)治療后RCC 患者細(xì)胞免疫功能比手術(shù)前有所提高，但仍然低于正常水平。

大量基礎(chǔ)及臨床試驗(yàn)證明，RCC 根治術(shù)后輔以免疫治療，能夠激發(fā)體內(nèi)抗腫瘤免疫反應(yīng)，可以清除腫瘤微轉(zhuǎn)移灶，提高患者的生存率，是RCC 治療的重要輔助方法，對(duì)預(yù)防RCC 術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移有較好的療效，越來(lái)越多地應(yīng)用于RCC 的治療。本研究通過(guò)對(duì)RCC 患者外周血T 淋巴細(xì)胞亞群的分析，能夠了解RCC 患者的細(xì)胞免疫功能狀況，從而監(jiān)測(cè)疾病的發(fā)生、發(fā)展進(jìn)程，為包括免疫治療在內(nèi)的各種治療方法的療效評(píng)定提供科學(xué)的指標(biāo)，為臨床制定和調(diào)整治療方案提供客觀的參考依據(jù)，并有助于對(duì)疾病的預(yù)后做出準(zhǔn)確的判斷。

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