廣東海洋大學(xué)農(nóng)學(xué)院 黃冠慶 余親平 陳雁群黃曉亮 謝金嬋

谷氨酰胺是動(dòng)物血液中最豐富的一種游離氨基酸，具有維持體內(nèi)酸堿平衡、保持小腸黏膜正常的結(jié)構(gòu)和功能、維持組織中抗氧化劑的貯備、增強(qiáng)免疫反應(yīng)等作用（Wilmore等，1988）。但谷氨酰胺在實(shí)際應(yīng)用中存在溶解低、熱不穩(wěn)定等缺點(diǎn)，影響了谷氨酰胺在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用。近年來(lái)，有學(xué)者將目光轉(zhuǎn)移到谷氨酰胺前體物質(zhì)α-酮戊二酸（α-ketoglutarate，AKG） 上進(jìn)行研究 （胡泉舟等，2008）。本試驗(yàn)通過(guò)飲水方式給黃羽肉雞供給AKG，通過(guò)代謝試驗(yàn)來(lái)研究AKG對(duì)黃羽肉雞飼料表觀代謝能和蛋白質(zhì)代謝的影響，為AKG在肉雞生產(chǎn)中應(yīng)用提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)藥物 AKG購(gòu)自上海朗源化工有限公司，規(guī)格：99.8%。

1.2 日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧按照NRC標(biāo)準(zhǔn)（1998）和廣東省地方黃羽肉雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 選用42日齡的健康黃羽肉雞（♀）24只，隨機(jī)分成A、B兩組，每組6個(gè)重復(fù)，每重復(fù)2只雞，每重復(fù)飼養(yǎng)于同一個(gè)代謝籠中，A組飼喂基礎(chǔ)日糧，B組飼喂基礎(chǔ)日糧并通過(guò)飲水方式按每只每天供給2 g AKG，A組和B組試雞的初始體重分別為 （737.33±32.27）g 和 （740.15±20.93）g，差異不顯著（P ＞ 0.05），進(jìn)行為期 7 d（其中預(yù)試期3 d，主試期4 d）的全收糞法代謝試驗(yàn)（計(jì)成，2008）。2010年9月在廣東海洋大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

表1 日糧組成與營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.4 試驗(yàn)指標(biāo)及方法 試驗(yàn)前、后空腹稱重，計(jì)算平均日增重，期間統(tǒng)計(jì)雞的飼料采食量和收集全部排泄物，用于測(cè)定能量和粗蛋白質(zhì)含量；試驗(yàn)結(jié)束后，每只雞翅靜脈采血3 mL，凝固后離心取血清，-20℃保存?zhèn)溆?，用于測(cè)定血清中總蛋白、白蛋白、尿素氮、谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶。

平均日增重=（終體重-始體重）/天數(shù)。

采用國(guó)產(chǎn)WZH-15全自動(dòng)熱量計(jì)測(cè)定飼料和排泄物的總能。

表觀代謝能=（攝入飼料能-排泄物能）/飼料采食量。

采用半微量凱氏定氮法測(cè)定飼料和排泄物的含氮量。

凈蛋白利用率/%=（攝入總氮-排泄物總氮）/攝入總氮×100。

總蛋白用考馬斯亮蘭比色法測(cè)定，白蛋白用溴甲酶綠比色法測(cè)定，尿素氮用二乙酰一肟比色法測(cè)定，谷草轉(zhuǎn)氨酶活性和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性均用比色法測(cè)定。試劑盒均購(gòu)于南京建成生物工程研究所，其操作按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.5 數(shù)據(jù)處理 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，并進(jìn)行t檢驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

由表2可知，B組的平均日增重、表觀代謝能、凈蛋白利用率、血清總蛋白和白蛋白含量分別比 A 組提高 3.59%、1.85%、4.57%（P＜0.05）、5.62%和4.10%，其中凈蛋白利用率和血清總蛋白含量達(dá)到顯著水平（P＜0.05）；B組的血清尿素氮含量及血清谷草轉(zhuǎn)氨酶和血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性分別比A組降低7.53%、2.79%和3.86%，其中血清尿素氮含量達(dá)到顯著水平（P＜0.05）。

表2 AKG對(duì)黃羽肉雞能量和蛋白質(zhì)代謝的影響

3 討論

3.1 AKG對(duì)黃羽肉雞飼料表觀代謝能的影響AKG是生物體三羧酸循環(huán)中重要的中間產(chǎn)物，也是生物體內(nèi)谷氨酸、谷氨酰胺和精氨酸等的生物合成前體物。有研究證明，谷氨酰胺和精氨酸在促進(jìn)受損腸道的修復(fù)過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用（Wu等，2000、1996）。代謝能是飼料總能減去糞能、尿能及消化道可燃?xì)怏w的能量后剩余的能量。代謝能的高低可以反映出雞對(duì)飼料的消化利用效果。本試驗(yàn)表明，通過(guò)飲水方式供給AKG可一定程度提高黃羽肉雞飼料表觀代謝能，說(shuō)明AKG能維護(hù)黃羽肉雞消化道的結(jié)構(gòu)和功能，促進(jìn)飼料養(yǎng)分的消化吸收，減少養(yǎng)分的排出，從而提高飼料的代謝能。

3.2 AKG對(duì)黃羽肉雞蛋白質(zhì)代謝的影響 血清總蛋白由白蛋白和球蛋白組成，主要作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的載體，參與維持血漿滲透壓，同時(shí)也是機(jī)體蛋白質(zhì)的一個(gè)來(lái)源，總蛋白在一定程度上代表了日糧中蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)水平及動(dòng)物對(duì)蛋白質(zhì)的消化吸收程度，血清總蛋白含量高是蛋白質(zhì)代謝旺盛的表現(xiàn)。

尿素氮是體內(nèi)蛋白質(zhì)降解的產(chǎn)物。一般而言，體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成量增加或體內(nèi)蛋白質(zhì)的分解代謝降低，均會(huì)導(dǎo)致血清尿素氮濃度下降；而體內(nèi)蛋白質(zhì)合成降低或體內(nèi)蛋白的分解代謝增強(qiáng)，都會(huì)導(dǎo)致血清尿素氮濃度的升高。谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶是動(dòng)物肝細(xì)胞內(nèi)參與氨基酸代謝的重要酶，當(dāng)組織細(xì)胞受損或通透性增大時(shí)，大量的谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶逸入血液，使血中谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶活性升高。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，通過(guò)飲水方式供給AKG，可顯著提高黃羽肉雞飼料凈蛋白利用率及血清總蛋白含量（P＜0.05），使血清白蛋白的一定程度的提高，顯著降低血清尿素氮含量（P＜0.05），而且血清轉(zhuǎn)氨酶活性有所降低，但差異不顯著。說(shuō)明外源補(bǔ)充一定量的AKG使肉雞體內(nèi)蛋白質(zhì)分解降低，合成增加，從而促進(jìn)了含氮物質(zhì)在體內(nèi)的沉積，也說(shuō)明外源供給AKG對(duì)肉雞肝臟無(wú)損傷。其作用機(jī)理為作為谷氨酰胺前身物的AKG和谷氨酰胺一樣可為腸上皮細(xì)胞和免疫細(xì)胞供能和補(bǔ)充氮源，同時(shí)為胃腸道細(xì)胞代謝提供能量，保障腸道屏障功能的完整性和正常的吸收功能 （Jones等，1999）。本試驗(yàn)AKG可顯著提高凈蛋白利用率（P＜0.05）及平均日增重一定程度的提高的結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)這一結(jié)論。本試驗(yàn)結(jié)果是在42日齡黃羽肉雞的代謝試驗(yàn)基礎(chǔ)上得出，而在實(shí)際生產(chǎn)中的效果如何尚有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，通過(guò)飲水方式供給42日齡黃羽肉雞AKG可提高飼料代謝能和促進(jìn)蛋白質(zhì)沉積。

[1]計(jì)成.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)[M].北京：高等教育出版社，2008.193～195.

[2]胡泉舟，侯永清，丁斌鷹.α-酮戊二酸對(duì)仔豬小腸組織學(xué)形態(tài)與功能的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2008，20（6）：662 ～ 667.

[3]Jones C，Palmer A，Griffiths R D.Randomized clinicaloutcome study of critically ill patients given glutamine-supplemented enteral nutrition[J].Nutrition，1999，15（2）：108 ～ 115.

[4]Wilmore D W，Smith R J，Dwyer S T，et al.The glutamine central organ after surgical stress[J].Surgery，1988，104：197 ～ 203.

[5]Wu G，Meier S A，Knabe D A.Dietary glutamine supplementation prevents jejunal atrophy in weaned pigs[J].The Journal of Nutrition，1996，126：2578 ～2584.

[6]Wu G，Meininger C J，Knabe D A，et al.Arginine nutrition in development health and disease[J].Current Opinion Clinical Nutrition Metabolism Care，2000，3：59 ～ 66.