李春英 張晶 王芳

【摘要】目的：探討皺葉酸模潛在的藥用價(jià)值。方法：通過復(fù)制高鹽飲食誘導(dǎo)高血壓大鼠模型，研究皺葉酸模提取物對(duì)高血壓大鼠動(dòng)脈血壓的影響，并通過其對(duì)血壓的影響及對(duì)左心室功能、血管緊張素系統(tǒng)的作用，探討相關(guān)的作用機(jī)制。結(jié)果：（1）皺葉酸膜提取物可顯著降低高血壓大鼠的收縮壓和減慢心率（P<0.01）；（2）皺葉酸膜提取物高劑量[24ml/（kg·d）灌胃給藥]可降低高血壓大鼠血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）、醛固酮（ALD）水平和左心室重量指數(shù)（LVMI）（P<0.05）。結(jié)論：皺葉酸膜提取物對(duì)高血壓大鼠具有良好的降壓作用，并能延緩左心室肥厚，其降壓機(jī)制可能與其影響腎素血管緊張素系統(tǒng)，降低AngⅡ的含量有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】皺葉酸膜提取物；高血壓；大鼠；機(jī)制

高血壓為常見的心腦血管疾病，發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，致殘率高、致死率高，藥物治療是當(dāng)前控制原發(fā)性高血壓最為有效的方法。目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)高血壓的研究高度重視，但大多數(shù)藥物雖能降低血壓但不能保護(hù)靶器官損傷，且具有毒副反應(yīng)，因此，需要研發(fā)抗高血壓新藥以供給臨床。皺葉酸模（RumexcrispusnepalensisSpreng，RCNS，土大黃，洋鐵葉）為蓼科酸模屬多年生草本植物，價(jià)格低廉且來源廣泛。本實(shí)驗(yàn)旨在探討皺葉酸模潛在的藥用價(jià)值，為臨床防治高血壓提供價(jià)格低廉且安全有效的藥物提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1資料與方法

1.1一般資料本實(shí)驗(yàn)選取80只雄性Wistar大鼠，6個(gè)月齡，體重200～250g（哈爾濱醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供），培養(yǎng)方式：安靜、室溫（22±0.5）℃、標(biāo)準(zhǔn)鼠食適應(yīng)性喂養(yǎng)1周。

1.2研究設(shè)計(jì)采用單純高鹽飲食法誘導(dǎo)大鼠導(dǎo)致原發(fā)性高血壓，建立穩(wěn)定的高血壓大鼠模型，為研發(fā)治療原發(fā)性高血壓的新藥提供動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái)，從黑龍江生產(chǎn)的皺葉酸模的根及葉中提取有效成分，研究其對(duì)高血壓大鼠動(dòng)脈血壓的影響及對(duì)心臟功能的影響，探討相關(guān)的機(jī)制。

1.3儀器與試劑皺葉酸膜提取物，購(gòu)自湖南省郴州市明潤(rùn)生物制品有限公司；大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶ELISA試劑盒，大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶ELISA試劑盒，購(gòu)自上海信然科技發(fā)展有限公司。無創(chuàng)傷性大鼠血壓心率測(cè)量?jī)x，購(gòu)自淮北正華生物儀器設(shè)備有限公司。

1.4分組隨機(jī)分為空白組（10只），其余均高鹽喂養(yǎng)（8%NaCl）。每周測(cè)體重、鼠尾血壓及心率；4周后，將尾動(dòng)脈血壓持續(xù)升高且體重增加的大鼠隨機(jī)分四組（收縮壓≥160mmHg），即對(duì)照組[腹腔注射生理鹽水，10mg/（kg·d）]、

卡托普利組[腹腔注射，10mg/（kg·d）]、皺葉酸膜高劑量組[灌胃，24ml/（kg·d）］、皺葉酸膜低劑量組[灌胃，8ml/（kg·d）]，每組10只。（1）空白對(duì)照組第4周處死，取血及心臟；（2）卡托普利組、皺葉酸膜組從第4周給藥，持續(xù)給藥12周，每周測(cè)體重、鼠尾血壓、心率；（3）實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，各組大鼠斷尾取血及心臟，測(cè)定大鼠血漿醛固酮（Ald）、血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）、血漿腎素活性（PRA）及左心室重量指數(shù)（LVMI）。

1.5研究方法

1.5.1高鹽飼養(yǎng)制備高血壓大鼠模型，測(cè)定大鼠尾動(dòng)脈收縮壓及心率、大鼠體重，收縮壓≥160mmHg且維持4周以上。

1.5.2收縮壓指標(biāo)測(cè)定無創(chuàng)傷性大鼠血壓心率測(cè)量?jī)x，測(cè)量大鼠清醒狀態(tài)下尾動(dòng)脈收縮壓和心率。

1.5.3取血及心臟給藥第12周末，大鼠禁食12h，以戊巴比妥腹腔注射麻醉，斷尾及處死動(dòng)物。尾動(dòng)脈取血，1000～1200r/min離心10min，分離血漿，存放于-70℃待測(cè)。用放射免疫法測(cè)定大鼠血漿醛固酮（Ald）、血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）、腎素活性（PRA）。左心室重量指數(shù)（LVMI），將取出的心臟用冷生理鹽水灌洗，沿房室環(huán)剪去心房及右心室游離壁，濾紙吸干水分，將余下的室間隔和左心室游離壁作為左心室重量（LVM），左心室重量與體重的比值作為左心室重量指數(shù)（LVMI，mg/g）[1]。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用GraghpadPrism3.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行制圖，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

0.1333kPa），高于正常鹽組（145±10.9）mmHg，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；連續(xù)灌胃2周后，皺葉酸膜提取物可顯著降低高血壓大鼠的收縮壓和減慢心率（P<0.01），并呈劑量依賴性。腹腔注射卡托普利后，大鼠血壓降低，皺葉酸膜組與卡托普利組兩組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.1各組大鼠體重、心率的比較對(duì)照組、低劑量組、高劑量組皺葉酸膜持續(xù)用藥12周，收縮壓的變化見圖1。實(shí)驗(yàn)4周后，空白組體重基本不變，對(duì)照組體重略有升高，但與基礎(chǔ)體重比較無差異。皺葉酸膜低劑量組和高劑量組與對(duì)照組心率比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2給藥前后各組大鼠PRA、AngⅡ、ALD、LVMI的比較皺葉酸膜高劑量組[24ml/（kg·d）灌胃給藥]可顯著降低高血壓大鼠AngⅡ、ALD、LVMI水平（P<0.05）。見表2。

3討論

在高血壓病的發(fā)生發(fā)展和靶器官損害上，腎素-血管緊張素系統(tǒng)有著極其重要的作用，而局部腎素-血管緊張素系統(tǒng)可能對(duì)靶器官的影響更為重要[2]。有學(xué)者認(rèn)為，AngⅡ有促生長(zhǎng)因子作用[3-5]，能使心血管細(xì)胞增生，組織重塑，導(dǎo)致靶器官功能障礙[6-7]。本研究證實(shí)，皺葉酸膜提取物在抗炎、抗腫瘤等生理活性外[8-9]，尚有顯著的心血管系統(tǒng)生理活性，對(duì)高血壓大鼠具有良好的降壓作用，延緩高血壓大鼠的左心室肥厚，其降壓機(jī)制與其影響腎素血管緊張素系統(tǒng)，降低AngⅡ的含量有關(guān)，從而為其更好地應(yīng)用于臨床提供依據(jù)。

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（收稿日期：2012-11-13）（本文編輯：車艷）