楊艷秋，段 麗

（大理學(xué)院德宏教學(xué)醫(yī)院，云南芒市 678400）

宮頸癌是女性常見惡性腫瘤之一。據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）報(bào)道，全世界每年約有50萬新發(fā)子宮頸癌病例，約有23萬婦女死于宮頸癌，中國宮頸癌的新發(fā)病例和死亡人數(shù)約占世界的三分之一。人乳頭瘤病毒感染是宮頸癌的主要病因〔1〕。人乳頭瘤病毒是一種小的雙鏈DNA病毒，可特異性地感染人皮膚黏膜的鱗狀上皮細(xì)胞，引起多種良性、惡性病變〔2〕。由于宮頸癌存在較長的可逆轉(zhuǎn)的癌前病變期，早期發(fā)現(xiàn)、及時(shí)治療，宮頸癌患者五年治愈率可達(dá)90%〔3〕。所以宮頸癌的篩查和預(yù)防是非常有意義的。液基薄層細(xì)胞學(xué)（TCT）技術(shù)和人乳頭瘤病毒（HPV）檢測是目前宮頸病變篩查中常用的兩種方法，現(xiàn)將兩種方法的相關(guān)性進(jìn)行分析。

1 資料與方法

1.1臨床資料2010年9月至2011年12月到云南省德宏州醫(yī)療集團(tuán)人民醫(yī)院就診的門診、住院病人及芒市保健院送檢標(biāo)本，共1 608例，其中年齡最大者72歲，最小者17歲，平均年齡38.7歲〔1〕。

1.2標(biāo)本采集方法先用無菌棉簽拭凈宮頸表面分泌物，再用亞能公司生產(chǎn)的宮頸專用采集器嚴(yán)格按要求采集宮頸脫落細(xì)胞送檢驗(yàn)科做HPV分型檢測，用云南馳恒科技有限公司提供的宮頸薄層液基細(xì)胞配套采集器采集樣本放入細(xì)胞保存液內(nèi)送病理科做TCT檢測。

1.3儀器與試劑

1.3.1 檢測儀器 ABI7500熒光定量PCR檢測儀，韓國Combi分子雜交儀，CytoPrep-1制片機(jī)，OLympusBx41顯微鏡。

1.3.2 試劑來源 HPV基因分型檢測試劑由亞能生物技術(shù)（深圳）有限公司提供，可同時(shí)做18種高危型及5種低危型，其分別為高危型16、18、52、31、58、68、33、45、51、56、35、39、53、66、59、73、83、MM4；低危型6、11、42、43、44。

1.3.3 細(xì)胞學(xué)診斷 按2004年國際癌癥協(xié)會TBS分級系統(tǒng)進(jìn)行分級報(bào)告。

1.3.4 操作方法 HPV基因分型檢測按試劑盒說明書進(jìn)行HPV－DNA提取、擴(kuò)增、雜交、洗膜、顯色、讀取結(jié)果；TCT診斷按TCT要求采集的標(biāo)本經(jīng)振蕩離心處理，并分離沉淀的黏液、血液和炎細(xì)胞，余下的細(xì)胞經(jīng)Cyto Prep-1制片機(jī)制片，將細(xì)胞均勻地制成直經(jīng)13 mm超薄層細(xì)胞于載玻片上，用蘇木素－伊紅染色制片鏡檢，The Bethesda System（TBS）分級系統(tǒng)進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 HPV感染率1 608例宮頸可疑標(biāo)本經(jīng)HPV基因分型檢測共檢出645例陽性，陽性率為40.11%，高危型522例，高危率為32.46%，低危型73例，低危率為4.54%，混合型50例，混合率3.11%，18型高危型只有MM4未檢出，5種低危型中44型未檢出。

2.2 TCT檢測人乳頭瘤病毒陽性中有483例同時(shí)做了病理TCT檢測，ASCUS者118例，高度病變36例，低度病變24例，炎癥154例，正常125例，其它病變26例。

2.3 HPV各亞型在TCT異常病變中的分布在483例HPV陽性標(biāo)本中，HPV各亞型分別為16型及16型合并其它亞型者147例，TCT異常55例，異常率30.56%；58型及合并其它亞型者80例，異常34例，異常率18.89%，52型及合并其它亞型者52例，異常18例，異常率10%；33型及合并其它亞型者38例，異常17例，異常率9.44%；18型及合并其它亞型者37例，異常14例，異常率7.78%，43型及合并其它亞型者33例，異常8例，異常率4.44%；31型及合并其它亞型者13例，異常6例，異常率3.33%，低危11型13例，異常3例，異常率1.67%，其它亞型70例，異常25例，異常率13.89%，因在HPV檢測中不僅是單獨(dú)感染，還有雙重、三重，最多四重感染。見表1-2。

表1 483例HPV陽性與178例TCT異常病變中HPV亞型分布情況

表2 178例TCT異常病變者與年齡的分布情況

3 討論

上述資料顯示云南省德宏州1 608份宮頸脫落細(xì)胞HPV檢測中陽性645例，陽性率為40.11%，與國內(nèi)蘇光〔4〕等報(bào)告的37.23%較一致，而與國外Munoz〔5〕等報(bào)導(dǎo)的57.4%有一定差距，可能與篩查對象和我州特殊的地理環(huán)境有關(guān)；其高危型522例，高危率為32.46%，低危型73例，低危率為4.54%，混合型50例，混合率3.11%；我州是一個(gè)地處西南邊陲，與緬甸相毗鄰的少數(shù)民族地區(qū)，經(jīng)濟(jì)和文化知識都比較落后，對自身保健意識不是很高，目前國家對這方面的投入較少，病人只能自費(fèi)檢查，所以臨床癥狀較輕的及農(nóng)村病人不愿做TCT檢測，在645例HPV陽性病患中只有483例同時(shí)做了病理TCT檢測，其中ASCUS者118例，高度病變36例，低度病變24例，將高度病變、低度病變及ASCUS視為TCT異常者共178例，炎癥154例，正常125例，其它病變26例，本次實(shí)驗(yàn)還顯示178例不正常TCT結(jié)果中HPV亞型分布較高的依次為16型，共檢出147例，TCT異常55例，異常率30.89%是所有亞型中檢出率及病變率都較高的一型，與相關(guān)報(bào)道一致；其次是58型80例，TCT異常34例，異常率19.10%，52型52例，異常18例，異常率10.11%；33型38例，TCT異常17例，異常率9.55%；18型37例，TCT異常14例，異常率7.86%，43型33例，TCT異常8例，異常率4.49%；31型13例，TCT異常6例，異常率3.37%，低危11型13例，TCT異常3例，異常率1.69%，其它亞型70例，TCT異常25例，異常率14.04%，與國外報(bào)到的HPV16和HPV18是宮頸癌中最常見型別，其次是HPV58、HPV52、HPV56亞型〔6〕不完全一致；HPV各亞型在各民種族及民族中的差異可能與每個(gè)地區(qū)的種族和民族的遺傳特點(diǎn)有關(guān)〔7〕。此次178例TCT異常病變患者中30歲以下及50歲以上因就診患者相對較少，HPV檢出率及組織學(xué)病變率也較低，30～50歲齡段HPV檢出率及TCT異常病變率都是最高的，但在ASCUS患者中年齡最小者僅17歲，是16型感染所致，說明HPV感染和宮頸組織學(xué)病變都存在年輕化趨勢。雖然低危型主要只引起外生殖器尖銳濕疣和宮頸良性病變，在本次研究中低危型以11型檢出率相對較高，檢出13例，在13例陽性患者中有3例發(fā)生了TCT結(jié)果異常，所以低危型感染者臨床不能輕視。

宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)由量變到質(zhì)變、漸變到突變的過程，此過程需要多年，這是早期發(fā)現(xiàn)宮頸癌及癌前病變的絕好時(shí)機(jī)〔8〕。如能定期進(jìn)行婦科檢查，及時(shí)發(fā)現(xiàn)和治療宮頸癌前病變，落實(shí)防治措施，宮頸癌的治愈率很高〔9〕。

目前，對HPV感染進(jìn)行分型分布的研究在宮頸癌篩查及癌前病變病情隨訪監(jiān)測中有著重要的意義〔10〕，使流行病學(xué)的研究更深入化，在篩查、防治過程中發(fā)揮著重要作用，定期、及時(shí)的進(jìn)行HPV基因分型診斷及監(jiān)測是預(yù)防宮頸癌的有效途經(jīng)〔2〕。HPV基因分型檢測較TCT更敏感，檢出率更高，但操作復(fù)雜，費(fèi)用高，臨床可結(jié)合使用。

〔1〕吳有利，陸學(xué)東，劉鍵，等，膜雜交多重檢測技術(shù)在HPV基因分型中的應(yīng)用〔J〕.中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，2005，25（12）：1048.

〔2〕吳意，吳正林，周曉梅，等.HPV基因分型與宮頸組織病變的相關(guān)性〔J〕.中國婦幼保鍵，2009，24（26）：3724-3726.

〔3〕段麗，楊繼華，趙中晟，等，2280例宮頸TCT防癌普查結(jié)果分析〔J〕.大理學(xué)院學(xué)報(bào)，2007，6（S1）：147-148.

〔4〕蘇光，錢莉蕓，劉陽，等，多重人乳頭瘤病毒感染檢測在宮頸病變診斷中的價(jià)值〔J〕.中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2007，23（9）：706.

〔5〕Munoz N，Bosch FX，Castellsague X，et al.Againstwhich human papillomavirus types shall we vaccineate and screen?The internationall perspective〔J〕.Cancer，2004，111（2）：278-285.

〔6〕An HJ，Cho NH，Lee SY，et al.Correlation of cervical carcinoma and precancerous lesions with human papillomavirus（HPV）genotypes detected with the HPV DNA chip microbaray meehod〔J〕.Cancer，2003，97（7）：1672-1680.

〔7〕LO KW，Wong YF，Chan MK，et al.prevalence of human papillomavirus in cervical cancer：a multicenter study in China〔J〕.Int J Cancer，2002，100（3）：327.

〔8〕Denny L，Kuhn L，Pollack A，et al.Evaluation of alternative methods of cervical cancer screening for resource-poor settings〔J〕.Cancer,2000,89（4）：826-833.

〔9〕鄒倩，濮德敏，周利千.液基超薄細(xì)胞技術(shù)及TBS系統(tǒng)檢2635例宮頸涂片的臨床分析〔J〕.中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2008，22（4）：268-270.

〔10〕Guyot A，Karim S，Kyi MS，et al.Evaluation of adjunction HPV testing by hybrid captuerll in woman with minor cytological abnormalities for CIN2/3 and cost comparison with colposcopy〔J〕.BMC Infect Dis，2003（3）：23.