陳亞平
尿液中有形成分的檢測(cè),是用來(lái)診斷各種腎臟疾病、泌尿系疾病的主要手段,并可以用于對(duì)疾病進(jìn)行鑒別。其中白細(xì)胞是一項(xiàng)重要的檢測(cè)內(nèi)容,其具有吞噬、產(chǎn)生抗體、抵御病原菌等能力,很多疾病均有白細(xì)胞數(shù)量的改變[1]。本研究分析干化學(xué)法和尿沉渣鏡檢法在檢測(cè)尿液中白細(xì)胞的差異,研究干化學(xué)法的假陽(yáng)性和假陰性原因,現(xiàn)報(bào)道如下。
1.1 一般資料 本研究標(biāo)本為2010~2011年870例門診尿常規(guī)標(biāo)本。其中男性410例,女性460例,年齡在7~69歲之間,平均(33.87±7.95)歲。
1.2 方法 儀器和試劑:干化學(xué)法儀器采用H-300尿液分析儀(長(zhǎng)春瑞迪公司生產(chǎn)),試劑為原廠配套試劑。尿沉渣鏡檢法儀器采用奧林巴斯CX31顯微鏡,802臺(tái)式離心機(jī)(上海)。檢驗(yàn)前首先進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控。實(shí)驗(yàn)室工作人員嚴(yán)格按照儀器的說(shuō)明書及其操作規(guī)程進(jìn)行檢驗(yàn)。
首先,取新鮮的尿液標(biāo)本約10mL,進(jìn)行干化學(xué)法檢驗(yàn),將試紙的試劑部分均進(jìn)入到尿液中,靜待2s后,取出試紙,使用濾紙將多余尿液輕輕吸除,在傳輸盤上進(jìn)行檢測(cè)。
隨后,使用高速離心機(jī)以1500r/min離心5min,將上清液去除,留取沉渣進(jìn)行尿沉渣鏡檢。將沉渣放于載玻片,先使用低倍鏡觀察尿液中有形成分的全貌,再使用高倍鏡觀察不同視野的白細(xì)胞值,一般選擇10個(gè)視野,準(zhǔn)確記錄。
1.3 白細(xì)胞判定標(biāo)準(zhǔn) 尿沉渣鏡檢法:每高倍視野下有5個(gè)以上白細(xì)胞為陽(yáng)性;干化學(xué)分析法:白細(xì)胞在70/U以上為陽(yáng)性。
假陰性:經(jīng)過(guò)干化學(xué)檢測(cè)為陰性,但鏡檢結(jié)果為陽(yáng)性。假陽(yáng)性:干化學(xué)法檢測(cè)為陽(yáng)性,尿沉渣鏡檢法為陰性[2]。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均錄入SPSS18.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。干化學(xué)法與鏡檢法比較采用例數(shù)(n)、百分?jǐn)?shù)(%)表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05,當(dāng)P<0.05時(shí),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
以尿沉渣鏡檢法作為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn),干化學(xué)法檢測(cè)結(jié)果中,有20例假陽(yáng)性,占2.29%;假陰性68例,占7.82%。2種方法檢測(cè)結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。
表1 干化學(xué)法及尿沉渣鏡檢法檢驗(yàn)白細(xì)胞的比較分析[例(%)]
尿沉渣鏡檢法與干化學(xué)分析法的檢驗(yàn)原理不同。干化學(xué)法對(duì)尿液中白細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)的原理在于白細(xì)胞(粒細(xì)胞)中含有一定的酯酶,其作用在試劑帶模塊內(nèi)部的吲哚酚酯,使之產(chǎn)生吲哚酚。而吲哚酚在與試劑中的重氮鹽相結(jié)合后,可以形成紫色的縮合物。標(biāo)本中白細(xì)胞越多,其顏色越深。
3.1 干化學(xué)分析法假陰性 假陰性一般與以下幾點(diǎn)因素有關(guān):⑴患者尿液中有較多的淋巴細(xì)胞,如腎移植患者出現(xiàn)排斥反應(yīng)時(shí),即會(huì)有淋巴細(xì)胞在尿液中[3],而淋巴細(xì)胞內(nèi)也含有使吲哚酚酯發(fā)生反應(yīng)的酯酶,導(dǎo)致試紙變色;⑵尿液中如果有先鋒、慶大霉素等藥物,也能夠與重氮鹽結(jié)合;⑶尿液濃度過(guò)高,高蛋白尿等患者,也會(huì)出現(xiàn)假陰性。臨床研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)尿蛋白在++以上時(shí),白細(xì)胞即為假陰性出現(xiàn),而尿糖在+++以上也可以導(dǎo)致白細(xì)胞下降。此外,當(dāng)標(biāo)本內(nèi)含有亞硝酸鹽也可以導(dǎo)致試紙不變色而出現(xiàn)假陰性。另外,研究認(rèn)為,當(dāng)檢驗(yàn)溫度偏低時(shí),也可能導(dǎo)致假陰性出現(xiàn)[4]。
針對(duì)假陰性情況,醫(yī)生要注意患者是否有泌尿系感染,泌尿系感染的細(xì)菌是否含有硝酸鹽還原酶;患者尿液是否在膀胱內(nèi)停留在4h以上,且是否服用了如抗生素、維生素C等會(huì)導(dǎo)致假陰性出現(xiàn)的藥物。
本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果中,有68例假陰性出現(xiàn),經(jīng)分析,42例患者尿液中存在淋巴細(xì)胞,7例患者有泌尿系感染,15例患者為高蛋白和高尿糖,4例患者在檢查前服用了抗生素類藥物。
3.2 干化學(xué)分析法假陽(yáng)性 假陽(yáng)性一般與以下幾點(diǎn)有關(guān):⑴尿液如果在膀胱內(nèi)儲(chǔ)存的時(shí)間較長(zhǎng),或者標(biāo)本放置的時(shí)間較長(zhǎng),可能會(huì)導(dǎo)致白細(xì)胞被破壞,進(jìn)而將酯酶釋放到尿液中,造成干化學(xué)分析法檢測(cè)為陽(yáng)性,但是鏡檢結(jié)果卻為陰性。⑵在尿液中如果混有甲醛、膽紅素或者呋喃啶等,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性。⑶女性尿液標(biāo)本容易受到各種陰道分泌物的感染,如果有扁平上皮細(xì)胞、鱗狀上皮細(xì)胞的污染[5],可能會(huì)造成干化學(xué)法檢驗(yàn)陽(yáng)性。
本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果中,有20例假陰性出現(xiàn),其中15例標(biāo)本為女性,有較多分泌物混入,鏡檢發(fā)現(xiàn)有大量的上皮細(xì)胞,而上皮細(xì)胞有類似顆粒細(xì)胞的功能,可能導(dǎo)致其與白細(xì)胞的模塊發(fā)生反應(yīng);其余5例原因不明。
經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,干化學(xué)法與尿沉渣鏡檢法對(duì)尿液標(biāo)本內(nèi)白細(xì)胞的檢驗(yàn)結(jié)果盡管存在一定差異,但差異不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
盡管如此,使用干化學(xué)分析法檢驗(yàn)?zāi)蛞簶?biāo)本容易受到各種因素的影響,并可能導(dǎo)致出現(xiàn)白細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果的假陽(yáng)性和假陰性,在臨床檢驗(yàn)工作中,要注意盡量避免各種干擾因素,對(duì)可疑患者,當(dāng)出現(xiàn)干化學(xué)法檢測(cè)為陰性時(shí),為了避免誤診和漏診,需要給予尿沉渣鏡檢法檢驗(yàn),不能單純依賴干化學(xué)法對(duì)患者進(jìn)行診斷。
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