浙江大學飼料科學研究所 欒兆雙 左安燕 胡彩虹＊

嘉興市凱越飼料有限公司 高振嶺 羅天生

中華鱉對蛋白質的需要量較高，其飼料配制嚴重依賴魚粉。由于魚粉短缺，價格昂貴，目前大量研究開始集中于用其他蛋白源替代魚粉。然而，當魚粉蛋白被部分或全部替代勢必導致水生動物對某些氨基酸缺乏。用合成氨基酸來平衡飼料中的氨基酸比例是提高飼料蛋白質利用率和節(jié)約蛋白質資源、降低飼料成本的有效途徑之一。飼料中添加游離態(tài)氨基酸，如晶體賴氨酸、蛋氨酸已普遍應用于畜禽養(yǎng)殖。但大量研究表明，魚、蝦不能有效地利用游離氨基酸。微膠囊及各種包膜技術可以延緩營養(yǎng)物質的釋放，包膜氨基酸在魚蝦上的應用已有較多報道 （遲淑艷等，2010；Alam等，2005；劉永堅等，2002）。而包膜氨基酸在中華鱉上的應用研究還鮮有報道。本試驗研究包膜賴氨酸對稚鱉生長性能的影響。

1 材料與方法

1.1 材料 普通賴氨酸鹽酸鹽：純度98%，賴氨酸含量78%。包膜賴氨酸鹽酸鹽：自制，芯材賴氨酸含量35%，壁材組成為硬脂酸和甘油酯。

1.2 試驗設計 在正式試驗開始以前，對試驗鱉進行為期2周的人工馴化，以使其適應試驗期間的養(yǎng)殖環(huán)境、投喂制度和試驗料，直到行為安逸，攝食正常，方可進入正式試驗期。選擇180只平均體重為18.40 g稚鱉隨機分為3組 （每組6個重復，每重復10只），分別飼喂賴氨酸缺乏（賴氨酸水平1.51%），添加晶體賴氨酸和包膜賴氨酸（賴氨酸水平2.62%）的等能等氮半純合成餌料。試驗餌料配方參考周小秋等（2001），見表1。試驗餌料所添加的賴氨酸部分用谷氨酸等氮代替，除賴氨酸外其他氨基酸模式與中華鱉鱉體氨基酸組成模式一致，蛋白質、微量元素、維生素需要參考NRC（1993）鰻魚的需要量。

表1 試驗餌料組成及營養(yǎng)水平

中華鱉飼養(yǎng)于80 cm×50 cm×50 cm的自動控溫控氧的室內水族箱中。水族箱底1/3鋪消毒后的河沙6 cm厚，水位高度保持9 cm，水溫恒定在（28.2±0.4）℃，自動供氧。每天早上 8∶00 將粉狀餌料用水調濕成面團狀放在離水面5 cm高的食臺上，保持安靜，鱉從木板橋爬到食臺上攝食。3天換水一次，換水量為總量的1/3。換水時將食臺消毒。試驗期60 d。

試驗結束時，中華鱉空腹24 h后，從每組隨機取鱉6只，采血制備分裝于eppendorf管，取肝臟樣品，置-70℃冰箱保存，備用。

1.3 試驗方法

1.3.1 曬背率、驚嚇逃跑率、腐斑率和成活率在試驗第20、40天和60天13∶00觀察食臺上鱉數，然后開門驚嚇并記錄逃跑數。計算公式如下：曬背率、驚嚇逃跑率、腐斑率等。曬背率（食臺上鱉數/試驗鱉數）；驚嚇逃跑率（驚嚇逃跑數量/食臺上總鱉數）；腐斑率（腐斑鱉數/觀察數）。

1.3.2 生長性能

特定生長率 （SGR）/%=（1nBWf-1nBWi）/T×100；

蛋白質效率 （PER）＝（BWf-BWi）/（FI×PC）×100；

飼料轉化率（FCR）＝FI/（BWf+BWo-BWi）×100；

存活率（SR）/%＝SNf/SNi×100；

式中：BWf為終末重 （g）；BWi為初始重，g；BWO為死亡個體重，g；T 為飼養(yǎng)試驗時間，d；FI-中華鱉所攝取的日糧量，g；PC為日糧中的蛋白質含量，g；SNi為初始存活數；SNf為終末存活數。

1.3.3 血清游離賴氨酸 取血清1.0 mL，加人2.0 mmol/L EDTA 0.5 mL，2%5-磺基水楊酸1.0 mL混勻，靜置l h后，4000 r/min，4℃ 條件下離心10 min。然后，取上清液0.25 mL，加人0.02 mol/L HCl 5 mL，0.22 μm聚乙烯濾膜過濾后用全自動氨基酸分析儀（日立8800）測定。

1.3.4 肝臟賴氨酸-α-酮戊二酸還原酶活性 肝臟樣品勻漿，參考Walton等（1984）的方法測定。

1.4 數據統計 結果以平均值±標準差表示。各處理間平均值的比較采用方差分析中的Duncan’s new multiple-range test，計算程序采用SAS（6.12）中的一般線性模式進行。

2 結果與分析

2.1 對鱉生活力的影響 由表2可見，賴氨酸缺乏的對照組中華鱉曬背率、驚嚇逃跑率較低，腐斑率較高，說明賴氨酸缺乏降低了鱉生活力。添加晶體賴氨酸和包膜賴氨酸均提高了鱉曬背率、驚嚇逃跑率，鱉生活力得到提高，且包膜賴氨酸作用效果優(yōu)于晶體賴氨酸。

2.2 對生長性能的影響 從表3可見，與對照組相比，添加包膜賴氨酸組的中華鱉特定生長率、蛋白質效率和存活率分別顯著提高44.35%、35.88%和11.52%（P＜0.05）；餌料系數顯著降低9.14%（P＜0.05）。本試驗結果表明，添加晶體賴氨酸可提高中華鱉生長性能，且包膜賴氨酸作用效果優(yōu)于晶體賴氨酸。

表2 賴氨酸對中華鱉生活力的影響 %

表3 賴氨酸對中華鱉生長性能的影響

2.3 對肝臟賴氨酸-α-酮戊二酸還原酶活性的影響 從表4可見，與對照組相比，添加晶體賴氨酸和包膜賴氨酸，中華鱉肝臟賴氨酸-α-酮戊二酸還原酶活性分別顯著提高20.35%（P＜0.05）和52.21%（P＜0.05）。由此結果可見，包膜賴氨酸作用效果優(yōu)于晶體賴氨酸。

表4 賴氨酸對中華鱉肝臟賴氨酸-α-酮戊二酸還原酶活性的影響

2.4 對血清游離賴氨酸的影響 由圖1可見，賴氨酸缺乏的對照組和晶體賴氨酸組鱉攝食后6 h內血清游離賴氨酸在2 h左右達到高峰水平，而包膜賴氨酸組在4 h左右達到高峰水平，由此可見，包膜賴氨酸可延緩血清游離賴氨酸達到高峰濃度的時間，促進機體組織氨基酸的有效利用。

3 討論

目前，關于鱉賴氨酸需要量的研究報道較少。鱉賴氨酸需要量一般借鑒鰻賴氨酸需要量（Arai，1972）。周曉秋等（2001）研究了稚鱉賴氨酸營養(yǎng)的需要量，確定的其需要量為2.40%。本試驗對照組含賴氨酸1.51%，應為賴氨酸營養(yǎng)缺乏。結果表明，賴氨酸缺乏可引起鱉生活力下降、生長受阻、肝臟賴氨酸-α-酮戊二酸還原酶活性下降，這與周曉秋等（2001）的報道一致。其他研究認為，賴氨酸缺乏將增加蝦的死亡率、攝餌量下降和生長受阻（Milamena等，1998），降低虹鱒肝臟賴氨酸-α-酮戊二酸還原酶活性（Walton等，1984）。

在水產動物飼料中添加晶體氨基酸效果較差，其主要原因是：晶體氨基酸在水中浸泡流失；游離態(tài)和結合態(tài)氨基酸在體內吸收不同步，存在消化吸收時間差，導致實際利用率低（劉永堅等，2002；Berge等，1994）。本試驗通過對氨基酸進行包被，結果表明，添加包膜賴氨酸顯著提高了鱉生活力、增重和蛋白質效率，作用效果優(yōu)于晶體賴氨酸。趙春蓉（2005）研究表明,穩(wěn)定化賴氨酸能提高幼建鯉全期和各階段增重和飼料利用率，與晶體形式賴氨酸鹽酸鹽相比，增重提高14%。本試驗結果與此結果一致。穩(wěn)定化氨基酸能提高水生動物生長速度，可能原因在于經穩(wěn)定化處理的氨基酸，能降低游離氨基酸的溶解和吸收速度，增加氨基酸在腸道的滯留時間，利于氨基酸吸收平衡，更多的氨基酸可用于合成蛋白質，促進動物生長（劉永堅等，2002）。本試驗也證實了包膜賴氨酸可延緩血清游離賴氨酸達到高峰濃度的時間，促進機體組織氨基酸的有效利用和蛋白質的合成。

[1]遲淑艷，林黑著，譚北平，等.低魚粉飼料中添加微膠囊或晶體蛋氨酸對凡納濱對蝦消化酶活性的影響[J].現代農業(yè)科技，2010，11：308～310.

[2]劉永堅，田麗霞，劉棟輝.實用飼料補充結晶或包膜賴氨酸對草魚生長、血清游離氨基酸和肌肉蛋白質合成率的影響[J].水產學報，2002，26：252～258.

[3]趙春蓉.賴氨酸對幼建鯉消化能力和免疫功能的影響：[碩士論文][D].四川雅安：四川農業(yè)大學，2005.

[4]周小秋，楊鳳，周安國，等.稚鱉賴氨酸營養(yǎng)的需要量[J].水產學報，2001，25：454～459.

[5]Alam M S，Teshima S，Koshio S，et al.Supplemental effects of coated methionine and/or lysine to soy protein isolate diet for juvenile kuruma shrimp，Marsupenaeus japonicus[J].Aquaculture，2005，248：13～19.

[6]Arai S.Amino acids essential for the growth of eels，Anguilla anguilla and A.japonica [J].Bulletin of the Japanese Society for the Science of Fish，1972，38：753～759.

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