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        三種梅毒血清試驗方法的應(yīng)用評估

        2012-06-25 08:41:40黎新桂周紅翠尹承祥
        關(guān)鍵詞:螺旋體梅毒試劑

        黎新桂,周紅翠,尹承祥

        (廣西梧州市人民醫(yī)院 1、檢驗科 2、皮膚科,廣西 梧州 543000)

        梅毒是由梅毒螺旋體感染引起的一種嚴(yán)重危害身體健康的性傳播疾病,該病表現(xiàn)復(fù)雜,可侵犯全身各個器官[1],且病程長臨床表現(xiàn)復(fù)雜,呈多樣性,在診治過程中很容易漏診和誤診。目前梅毒的實(shí)驗室診斷方法主要有兩種:一是檢測非梅毒螺旋體(NTP)抗體,如快速血漿反應(yīng)素試驗(RPR)、不加熱血清反應(yīng)素試驗(USR)、甲苯胺紅不加熱血清試驗(TRUST)和應(yīng)用性病研究實(shí)驗室試驗(VDRL)等;二是檢測梅毒特異性抗體,如梅毒螺旋體血凝試驗(TPHA)、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(TPPA)等。本文采用TRUST、ELISA、TPPA 三種方法76例梅毒患者的標(biāo)本進(jìn)行檢測,并對結(jié)果進(jìn)行分析比較,為選擇合適的梅毒檢測方法提供參考。

        1 材料與方法

        1.1 研究對象 2010年1月至2011年6月來本院皮膚科就診的梅毒患者76例(梅毒組),其中男59例,女17例,年齡21~72歲。對照組為同期就診的非梅毒患者50例。

        1.2 試劑TRUST 試劑 由上海榮盛生物有限公司提供 ELISA 試劑由上??迫A生物有限公司提供;TPPA 試劑由日本株式會社提供。

        1.3 儀器 酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、離心機(jī)、微量振蕩器和恒溫水浴箱等。

        1.4 檢測方法 空腹抽血5ml,然后分離血清。對所有標(biāo)本都分別用TRUST 法、ELISA 法和TPPA 法同時檢測,操作與判斷結(jié)果嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。

        1.5 統(tǒng)計方法 采用χ2檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 三種檢測方法的結(jié)果,見表1。

        表1 三種檢測方法的結(jié)果(n)

        2.2 三種梅毒檢測方法敏感性及特異性比較 見表2。

        表2 三種梅毒檢測方法敏感性及特異性(%)

        2.3 結(jié)果 通過χ2檢驗,TRUST 法和ELISA 法檢測梅毒組血清標(biāo)本差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=12.35,P<0.05);TRUST 法和TPPA 法檢測梅毒組血清標(biāo)本差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=17.88,P<0.05);ELISA 法和TPPA 法檢測梅毒組血清標(biāo)本差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=2.03,P>0.05)。

        3 討論

        本研究顯示,TRUST 法的靈敏度為78.9%,明顯低于ELISA 法和TPPA 法。原因是TRUST 法檢測的是梅毒非特異性類脂質(zhì)抗體,感染發(fā)病過程中,一般在硬下疳出現(xiàn)4 周才能檢出,梅毒在治療過程中,非特異類脂質(zhì)抗體滴度逐漸下降[2]。此外如果梅毒血清抗體過高,出現(xiàn)前帶現(xiàn)象而導(dǎo)致假陰性的出現(xiàn)。因此臨床上懷疑梅毒感染,而TRUST 檢測陰性時應(yīng)進(jìn)行梅毒確診試驗,以免誤診。由于TRUST 檢測的是非特異性抗體,在某些疾病時如結(jié)締組織病(SLE 類風(fēng)濕、系統(tǒng)性硬皮病等)、感染性疾病(風(fēng)疹、麻疹、病毒性肝炎等)時也可出現(xiàn)假陽性[3],本研究結(jié)果表明TRUST 法的特異性為80%,因此TRUST 法陽性也應(yīng)進(jìn)行梅毒確診試驗。TRUST 陽性滴度水平與梅毒的治療情況呈正相關(guān),是觀察治療效果、復(fù)發(fā)或感染的重要指標(biāo)。

        TPPA 法使用梅毒螺旋體毒株制成診斷抗原,有很高的靈敏度和特異性。本研究顯示TPPA 法的靈敏度為100%、特異性為100%,但由于試劑成本高、操作煩瑣、耗時較長,所以不適合大量標(biāo)本的篩查,本方法主要用于確診試驗。ELISA 法是檢測抗TP 抗體的特異性試驗,它把重組的梅毒螺旋體多肽抗原(KD47、KD42、KD15)包被于反應(yīng)板上,可同時檢測IgG、IgM 抗體;人體感染梅毒螺旋體后,IgM的出現(xiàn)早于IgG,所以用ELISA 法能縮短梅毒抗體的窗口期的檢出;同時重組抗原特異性、高純度高,且多種重組抗原聯(lián)合使用可得到更高的敏感性和特異性[4]。本研究結(jié)果表明ELISA 法的靈敏度為97.4%、特異性為96.0%,與TPPA 法比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義,與文獻(xiàn)[5-6]的研究相符。由于ELISA 法試劑成本低、操作簡便、并可實(shí)現(xiàn)自動化操作適合大量標(biāo)本的篩查。ELISA 法與TPPA 法檢測的是梅毒IgG和IgM的混合抗體,梅毒IgG 抗體在治愈后相當(dāng)長時間內(nèi)仍可為陽性,因此,檢測為陽性只說明正處于感染期或曾經(jīng)感染過,不能判斷梅毒疾病活動與否,所以不作為療效監(jiān)測手段。

        綜上所述,梅毒血清學(xué)試驗各有優(yōu)缺點(diǎn),實(shí)驗室應(yīng)根據(jù)其靈敏度和特異性選擇適合的方法進(jìn)行梅毒的檢測。在進(jìn)行梅毒篩查時可選用ELISA 法;在進(jìn)行療效監(jiān)測時選用TRUST 法;在確診試驗時選用TPPA 法。也可用幾種方法聯(lián)合檢測,以減少漏診或誤診。值得注意的是梅毒的血清學(xué)檢測并不是惟一的診斷依據(jù),還須結(jié)合患者的病史臨床表現(xiàn)及抗梅毒治療情況進(jìn)行綜合分析,才能作出正確的診斷。

        [1]胥國強(qiáng),康清秀,蒲澤宴,等.4種方法檢測梅毒旋螺體抗體的比較及應(yīng)用評價[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(16):1869-1870.

        [2]鐘菊香,付先輝,陳蘭芳,等.三種梅毒血清學(xué)試驗方法的比較分析[J].實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué),2009,16(1):231-233.

        [3]孫龍安,李 龍,林 鋼.醫(yī)學(xué)特種檢驗與實(shí)驗室診斷[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2002:260.

        [4]聶冬梅,葉賢林,鄧超干,等.三種梅毒抗體篩查方法的比較[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2006,27(7):615-621.

        [5]鐘 惠.3種檢測方法對梅毒診治的臨床價值[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2009,6(15):1273-1275.

        [6]鄭 穎,丁文杰,單曉潔,等.5種梅毒血清學(xué)檢測方法的臨床應(yīng)用評價[J].現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué),2009,21(8):824-825.

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