張素芳 ，龔道新 ，伍一紅 ，謝 惠 ，周圣超

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)煙草工程技術(shù)研究中心，湖南 長沙 410128；2.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)環(huán)境保護(hù)研究所，湖南 長沙 410128）

四螨嗪（clofentezine）屬于有機(jī)氮雜環(huán)類低毒殺螨劑，對(duì)害螨具有觸殺作用，屬長效高效殺卵劑，主要用于防治蘋果全爪螨、柑橘銹螨等植物螨害[1－2]。四螨嗪對(duì)人、畜低毒，對(duì)鳥類、魚蝦、蜜蜂及捕食性天敵較為安全。

柑橘紅蜘蛛通過吸食葉片樹汁對(duì)柑橘的樹勢(shì)與產(chǎn)量造成影響，是柑橘生產(chǎn)中的主要害蟲之一[3－4]。有研究報(bào)道藥劑四螨嗪對(duì)柑橘紅蜘蛛具有較好的防治效果，且防效隨藥劑濃度的增加而增大[5－6]。對(duì)于四螨嗪殘留測(cè)定方法，已見報(bào)道有高效液相色譜法[7－8]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[9]等。關(guān)于四螨嗪及其制劑防治柑橘紅蜘蛛的相關(guān)的研究還未見報(bào)道，試驗(yàn)主要采用高效液相色譜法研究柑橘中四螨嗪的殘留降解規(guī)律，以期為四螨嗪在防治柑橘紅蜘蛛的應(yīng)用中提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試農(nóng)藥為40%阿維·四螨嗪懸浮劑（石家莊綠豐化工有限公司）；試驗(yàn)作物為柑橘（弓川蜜橘）；試驗(yàn)分別在湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)教學(xué)科研試驗(yàn)基地（湖南長沙）、浙江省農(nóng)科院試驗(yàn)研究基地（浙江杭州）、貴州大學(xué)試驗(yàn)研究基地（貴州貴陽）進(jìn)行。

1.2 田間試驗(yàn)設(shè)計(jì)及采樣方法

柑橘、土壤的降解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)均在從未施用過四螨嗪及其相關(guān)制劑的柑橘園中進(jìn)行，各試驗(yàn)均設(shè)施藥和對(duì)照兩個(gè)處理。其中，施藥處理為40%阿維·四螨嗪懸浮液兌水稀釋2 000倍噴霧（200.0mg/L），在柑橘采收前2個(gè)月噴藥1次；對(duì)照不施藥。每個(gè)處理設(shè)置設(shè)3次重復(fù)，每個(gè)處理不少于6棵柑橘樹。

柑橘的降解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)，各小區(qū)在施藥后2 h、1、3、5、7、10、14、21、28、35、42 d 分別采集柑橘園土壤（取樣深度為0～10 cm），采集柑橘全果（每個(gè)試驗(yàn)小區(qū)至少采集15個(gè)柑橘果實(shí)，采樣量不少于1.0 kg，并特別注意在柑橘樹的東、西、南、北、中及內(nèi)外等不同的部位采集柑橘果實(shí)），試驗(yàn)重復(fù)三次。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 試驗(yàn)儀器與試劑 HP-1100型液相色譜儀、SHY-2AS水浴恒溫振蕩機(jī)、RE-2000A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、SHZ-D（Ⅲ）循環(huán)水式真空泵、TP-220A電子天平、玻璃層析柱（長25 cm，直徑1.5 cm）、布氏漏斗、梨形抽濾瓶、具塞三角瓶、250 mL分液漏斗、量筒、移液管，玻璃棒等。試劑分別為：甲醇、石油醚、二氯甲烷、正己烷、丙酮、無水硫酸鈉、氯化鈉、乙酸乙酯（均為分析純）；弗羅里硅土（用前在550℃下烘3～5 h，待冷卻后以2%蒸餾水激活）。

1.3.2 樣品前處理 準(zhǔn)確稱取柑橘園土壤或柑橘全果樣品20.0 g，置于250 mL具塞三角瓶中，加入80 mL丙酮，在恒溫振蕩器中振蕩30 min，經(jīng)過布氏漏斗減壓抽濾，再用30、20 mL丙酮分別洗滌濾渣2次，合并抽濾液轉(zhuǎn)入250mL具塞三角瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮近干；用二氯甲烷將濃縮液無損轉(zhuǎn)入250mL分液漏斗中，加入10mL飽和氯化鈉溶液，用30、30、20 mL二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷萃取液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮近干，待弗羅里硅土（Florisil）柱凈化。

1.3.3 凈 化 層析柱從下至上依次裝填有少許脫脂棉、2 g無水硫酸鈉、4 g弗羅里硅土、2 g無水硫酸鈉，在裝柱的過程中要敲緊敲實(shí)，在弗羅里硅土（Florisil）凈化柱裝好后，先用20mL丙酮溶液預(yù)淋，再將上述提取濃縮液無損移入弗羅里硅土凈化柱中，用丙酮∶二氯甲烷（35∶65，V/V）混合溶液 60 mL分次洗脫，收集洗脫液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮近干，再用色譜甲醇定容至5.0 mL，過0.45μm微孔濾膜，待HPLC測(cè)定。

1.3.4 色譜條件 HP-1100型高效液相色譜儀帶紫外檢測(cè)器（UVD），色譜柱（不銹鋼柱）為：XB-C18柱（4.6×250 mm），流動(dòng)相為甲醇∶水=70∶30（V/V），流速為1.0 mL/min，紫外檢測(cè)波長277 nm，柱溫35℃，進(jìn)樣量為20μL，保留時(shí)間 14.2min。

1.3.5 分析方法的線性關(guān)系 采用外標(biāo)法定量分析，具體操作如下：取已經(jīng)配置好的濃度為1 000.0 mg/L的四螨嗪標(biāo)準(zhǔn)母液，采用梯度稀釋法配制成濃 度 為 0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、2.00、5.00 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，然后在所選定的液相色譜檢測(cè)條件下檢測(cè)，測(cè)定出四螨嗪的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的各濃度（X，mg/L）所對(duì)應(yīng)色譜峰的峰面積（Y）。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線繪制

經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析和處理得到四螨嗪回歸方程式為Y=73.385 X+4.688 1，相關(guān)系數(shù)為0.999 4。這表明，四螨嗪標(biāo)準(zhǔn)工作溶液與其相對(duì)應(yīng)的色譜峰面積在所選的濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，完全可以用來進(jìn)行定量分析。結(jié)果如圖1所示：

圖1 四螨嗪的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

2.2 方法的靈敏度、準(zhǔn)確度及精確度

在選定的液相色譜條件下，四螨嗪的最小檢出量為 5.0×10-10g，最低檢出濃度為 6.25×10-3mg/kg。在添加濃度0.05～5.00mg/kg時(shí)，四螨嗪在柑橘園土壤中的添加回收率在87.07%～92.20%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.08%～3.11%；在柑橘全果中的添加回收率在 84.91%～88.18%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.09%～2.89%，均符合農(nóng)殘?jiān)囼?yàn)要求。

2.3 降解動(dòng)態(tài)試驗(yàn)結(jié)果

從表1中可以看出，2009年試驗(yàn)中四螨嗪在湖南、浙江和貴州柑橘全果上的原始沉積量（以施藥后2 h的殘留量計(jì)）分別為0.303、0.286和0.272 mg/kg，其在柑橘全果上降解半衰期分別為7.83、7.24和5.74 d。2010年試驗(yàn)中四螨嗪在湖南、浙江和貴州柑橘全果上的原始沉積量分別為0.278、0.268和0.267 mg/kg，其在柑橘全果降解半衰期均分別在7.62、7.24和6.05 d。四螨嗪在柑橘全果上降解前期相對(duì)較快，后期較慢，降解規(guī)律符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)模式（表3）。 從表2中可以看出，2009年試驗(yàn)中四螨嗪在湖南、浙江和貴州柑橘園土壤中的沉積量分別為 0.293、0.292、0.306 mg/kg，其在柑橘土壤中的降解半衰期分別為 7.93、7.15、7.13 d。2010年試驗(yàn)中四螨嗪在湖南、浙江和貴州柑橘土壤上的 原始沉積量 分 別 為 0.301、0.294、0.313 mg/kg，其在柑橘土壤中的降解半衰期均分別為8.73、8.19、7.61 d，柑橘全果降解規(guī)律也符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)模式（表3）。

表2 四螨嗪在柑橘園土壤中的殘留降解

3 結(jié)論

阿維四螨嗪40%懸浮劑在柑橘園使用后，其有效成分四螨嗪在柑橘全果和土壤中的降解符合一級(jí)化學(xué)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程，其降解半衰期均小于10 d，按照《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)則》中劃分的標(biāo)準(zhǔn)，可知四螨嗪為低殘留、易降解的農(nóng)藥，在柑橘園中使用是安全的。

表3 四螨嗪在柑橘全果和柑橘園土壤中的降解動(dòng)力學(xué)方程

[1] Brooke P J，Parsons JH，Reid J，et a1.Acaricidal 1，2，4，5-etrazines[J].Pesticide Science，1987，18（3）：179-190.

[2] 饒國武，周 欣，楊忠愚，等.農(nóng)藥四螨嗪合成新工藝的研究[J].農(nóng)藥，2003，42（2）：13-14.

[3] 華南農(nóng)業(yè)大學(xué).農(nóng)業(yè)昆蟲學(xué)[M].北京：農(nóng)業(yè)出版社，1981.819-820.

[4] 胡軍華，馬麗娜，冉春，等.藁本提取物殺橘全爪螨活性研究[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2010，23（2）：405-509.

[5] 代興發(fā).80%四螨嗪WG防治柑橘紅蜘蛛田間藥效試驗(yàn)[J].農(nóng)機(jī)服務(wù)，2007，24（10）：58-63.

[6] 陳玉鳳，童英富，方建民，等.20%四螨嗪懸浮劑防治柑橘紅蜘蛛藥效試驗(yàn)[J].浙江柑橘，2005，22（2）：31-32.

[7] 趙善倉，趙領(lǐng)軍，毛江勝，等.草莓中四螨嗪殘留反相高效液相色譜法測(cè)定[J].現(xiàn)代農(nóng)藥，2007，6（2）：39-40，48.

[8] 鄧立剛，耿 越，李增梅，等.高效液相色譜法測(cè)定蘋果中四螨嗪殘留量[J].理化檢驗(yàn)-化學(xué)分冊(cè)，2009，45（2）：151-152.

[9] 李愛軍，王明泰，牟 峻，等.氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定水果中四螨嗪殘留量[J].理化檢驗(yàn)-化學(xué)分冊(cè)，2008，44（4）：323-325.