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        β-環(huán)糊精及其衍生物對(duì)黃曲霉毒素B1熒光增強(qiáng)機(jī)理研究

        2012-06-01 09:25:08張宇昊
        食品科學(xué) 2012年15期
        關(guān)鍵詞:環(huán)糊精空腔黃曲霉

        張 敏,郭 婷,劉 馨,肖 潔,張宇昊,3,馬 良,3,*

        β-環(huán)糊精及其衍生物對(duì)黃曲霉毒素B1熒光增強(qiáng)機(jī)理研究

        張 敏1,2,郭 婷1,劉 馨1,肖 潔1,張宇昊1,3,馬 良1,3,*

        (1.西南大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院,重慶 400716;2.四川省資陽(yáng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所,四川 資陽(yáng) 641300;3.重慶市特色食品工程技術(shù)研究中心,重慶 400716)

        利用光譜法、Benesi-Hildebrand法、熱力學(xué)方法研究β-環(huán)糊精(β-CD)及其衍生物對(duì)黃曲霉毒素B1(AFB1)熒光增強(qiáng)機(jī)理,探討溶劑中甲醇體積比、M-β-CD濃度、時(shí)間、干擾離子等因素對(duì)熒光增強(qiáng)作用的影響。根據(jù)Benesi-Hildebrand法確定7種β-環(huán)糊精及其衍生物在低濃度時(shí)與AFB1包絡(luò)比為1:1,高濃度時(shí)包絡(luò)比為2:1。采用熱力學(xué)方法計(jì)算了包合常數(shù)最大的M-β-CD與AFB1包合過(guò)程的熵變(ΔS)、焓變(ΔH)及自由能變化(ΔG)均為負(fù)值,說(shuō)明包合反應(yīng)是放熱反應(yīng)且能自發(fā)進(jìn)行,焓變是形成超分子包絡(luò)物的主要驅(qū)動(dòng)力。紫外吸收光譜及KI淬滅實(shí)驗(yàn)表明AFB1進(jìn)入M-β-CD空腔從而使熒光得到保護(hù)。得出結(jié)論:7種β-環(huán)糊精及其衍生物與AFB1通過(guò)形成超分子包絡(luò)物可大幅增強(qiáng)AFB1熒光發(fā)射強(qiáng)度,提高AFB1熒光分析法的檢測(cè)靈敏度。

        β-環(huán)糊精;AFB1;熒光增強(qiáng);超分子包絡(luò)物

        黃曲霉毒素B1(aflatoxin B1, AFB1)是黃曲霉菌和寄生曲霉菌的代謝產(chǎn)物,1993年被世界衛(wèi)生組織(WTO)的癌癥研究機(jī)構(gòu)劃定為Ⅰ類致癌物,可引起肝細(xì)胞變性、壞死,并且分布廣,對(duì)人類健康危害極大,因此對(duì)AFB1的監(jiān)測(cè)顯得十分重要[1]。

        在研究AFB1檢測(cè)技術(shù)時(shí),使用熒光檢測(cè)器來(lái)檢測(cè)AFB1超微量的已經(jīng)被廣泛用來(lái)作為黃曲霉毒素的高靈敏度的檢測(cè)方法[2-3]。但是,AFB1的天然熒光很弱,而且熒光特性受溶劑的影響很大。因此必須研究如何提高熒光檢測(cè)的敏感度,讓AFB1的熒光值大大增加,這樣能夠解決方法檢出限較高,不能與國(guó)際接軌的問(wèn)題?,F(xiàn)有的AFB1衍生試劑主要有強(qiáng)氧化劑三氟乙酸(TFA)和鹵族元素(碘、溴)以及衍生物過(guò)溴化吡啶溴(PBPB)等[4]。但是由于具有種種不足,如加熱衍生、穩(wěn)定性差、試劑有揮發(fā)性、腐蝕性,保存壽命短等[5]。研究安全而穩(wěn)定的新型熒光增強(qiáng)劑,提高光學(xué)系統(tǒng)靈敏度成為研究黃曲霉毒素檢測(cè)技術(shù)的重要發(fā)展方向。

        β-環(huán)糊精(β-cyclodextrin,β-CD)作為超分子化學(xué)最重要的主體,具有外親水內(nèi)疏水的特殊結(jié)構(gòu),可以和多類客體分子形成超分子包絡(luò)物[6]。Abdel-Shafi[7]、李香[8]、韓建榮[9]等研究表明β-CD及其衍生物分別與1-萘酚-5-磺酸鹽、姜黃素、雙臂苯并15-冠-5形成超分子體系的過(guò)程中,熒光強(qiáng)度增加。Wagner[10]、段云青[11]、侯法菊[12]等將β-CD及其衍生物分別作為甘氨酸和賴氨酸、 滅鼠劑溴敵隆、銪(Ⅲ)-強(qiáng)力霉素(DC)體系的熒光增敏試劑,提高了檢測(cè)靈敏度,為高靈敏度檢測(cè)技術(shù)的開發(fā)提供了新的思路和方向。Franco[13]、Cavaliere[14]、劉雪芬[15]等研究了β-CDs對(duì)AFB1的熒光增強(qiáng)作用,但未對(duì)增強(qiáng)機(jī)理進(jìn)行研究。因此,本實(shí)驗(yàn)利用熒光光譜法研究了7種β-CDs與AFB1的超分子相互作用,并采用Benesi-Hildebrand雙倒數(shù)法、熱力學(xué)、KI淬滅實(shí)驗(yàn)等對(duì)增強(qiáng)機(jī)理進(jìn)行探索,對(duì)影響包絡(luò)反應(yīng)的溫度、反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)物質(zhì)量濃度、干擾離子等因素進(jìn)行研究,為研究和開發(fā)新型高效的熒光增強(qiáng)劑、擴(kuò)大β-CDs在食品安全中的應(yīng)用范圍提供參考。

        1 材料與方法

        1.1 材料、試劑與儀器

        AFB1(稱取0.0010g溶于1mL甲醇中,配制成質(zhì)量濃度為1.0g/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,密封后,于冰箱中4℃保存,使用時(shí)用甲醇稀釋) 美國(guó)Sigma公司。

        甲醇(色譜純) 天津四友精細(xì)化學(xué)品有限公司;β-環(huán)糊精、2,4-二甲基-β-環(huán)糊精(DM-β-CD)、羥丙基-β-環(huán)糊精(HP-β-CD)、羥乙基-β-環(huán)糊精(HE-β-CD)、甲基-β-環(huán)糊精(M-β-CD)、磺丁基-β-環(huán)糊精、葡萄糖基-β-環(huán)糊精均為分析純 山東新大精細(xì)化工有限公司。

        F-2500熒光分光光度儀 日本日立公司;JY2002分析天平(精度0.0001g) 上海精密科學(xué)儀器有限公司天平儀器廠。

        1.2 方法

        1.2.1 熒光光譜掃描方法

        取1mL混合均勻的AFB1樣液,用1.0cm熒光用石英比色杯放置在F-2500熒光分光光度計(jì)中進(jìn)行熒光發(fā)射光譜、激發(fā)光譜的掃描(激發(fā)光源為150W氙弧燈;響應(yīng)時(shí)間:自動(dòng);掃描速率:1200nm/min;掃描光譜進(jìn)行儀器自動(dòng)校正),儀器狹縫均置為5nm。固定365nm波長(zhǎng),掃描樣液的熒光發(fā)射光譜,得到最佳熒光發(fā)射波長(zhǎng);固定440nm波長(zhǎng),掃描樣液的激發(fā)光譜,得到最佳激發(fā)波長(zhǎng)。

        1.2.2 熒光衍生測(cè)定方法

        取特定質(zhì)量濃度的AFB1標(biāo)準(zhǔn)品溶液,加入一定體積的β-CDs溶液,混合均勻,用1.0cm熒光用石英比色杯,以最佳激發(fā)波長(zhǎng)的光源激發(fā),于最佳熒光發(fā)射波長(zhǎng)處測(cè)量熒光強(qiáng)度,熒光分光光度計(jì)狹縫均置為5nm。

        1.2.3 溫度測(cè)定方法

        將混勻的AFB1-β-CDs溶液于1.0cm熒光用石英比色杯中,加蓋,置于自制控溫裝置中放置2min后,按1.2.2節(jié)方法測(cè)定熒光強(qiáng)度。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 AFB1的熒光光譜

        圖1 AFB1熒光激發(fā)光譜和發(fā)射光譜Fig.1 Excitation and emission spectra of AFB1

        由圖1可知,AFB1的熒光體系最大激發(fā)波長(zhǎng)是365nm,最大發(fā)射波長(zhǎng)是432 nm。在這種激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)下,可以對(duì)AFB1熒光增強(qiáng)作用進(jìn)行考察。

        2.2 β-CD及其衍生物對(duì)AFB1的熒光增敏作用

        由圖2可知,在室溫(20℃)、溶劑中甲醇體積分?jǐn)?shù)為2%、反應(yīng)時(shí)間2min條件下,除β-CD激發(fā)光譜略微紅移(366~370nm),其余6種β-CDs衍生物均未發(fā)生明顯移動(dòng)。7種β-CDs的加入均未使AFB1的發(fā)射峰波長(zhǎng)發(fā)生明顯移動(dòng)。說(shuō)明β-CDs對(duì)AFB1可能只起著物理的包絡(luò)作用,其熒光性質(zhì)沒有發(fā)生變化。7種β-CDs均使AFB1的熒光激發(fā)和發(fā)射顯著增強(qiáng)。這種熒光增敏作用應(yīng)該是由于在疏水作用、范德華力級(jí)氫鍵力等非共價(jià)鍵作用的驅(qū)動(dòng)下,進(jìn)入β-CDs空腔形成超分子包絡(luò)物所致。分析可能原因?yàn)?1)β-CDs空腔為AFB1的生色團(tuán)提供了一個(gè)非極性環(huán)境,使其處于去水化狀態(tài),對(duì)增進(jìn)量子效應(yīng)從而為增強(qiáng)熒光強(qiáng)度提供了有利的條件;2)當(dāng)AFB1包合進(jìn)β-CDs分子的空腔后,β-CDs腔的構(gòu)造保護(hù)了AFB1的熒光單級(jí)態(tài)分子免于從外部淬滅;3)可能由于增加了疏水性AFB1在水中的溶解度,而增加了熒光強(qiáng)度。

        圖2 AFB1及AFB1-β-CDs反應(yīng)物的激發(fā)(Ex)和發(fā)射(Em)光譜Fig.2 Excitation and emission spectra of AFB1 and AFB1-β-CDs

        2.3 包絡(luò)物包絡(luò)比及包絡(luò)常數(shù)的測(cè)定結(jié)果

        如果小分子配體具有熒光,當(dāng)其與大分子作用后熒光強(qiáng)度增大,可利用Benesi-Hildebrand 法研究主客體的結(jié)合比。若β-CDs 濃度遠(yuǎn)大于客體分子(G)濃度(即[β-CDs]≥[G]),根據(jù)改進(jìn)的Benesi-Hildebrand方程[16]:

        [AFB1]/(F-F0)=1/[β-CDs]·K·α+1/α (1)

        式中:F0和F分別為加入β-CDs前后溶液的熒光強(qiáng)度;α為常數(shù);[AFB1]和[β-CDs]分別為AFB1和CD的總濃度;K是包絡(luò)常數(shù)。K值的大小反映了β-CDs與客體分子形成包絡(luò)物時(shí)結(jié)合力的強(qiáng)弱。若 [AFB1]/ (F-F0)對(duì)1/[β-CDs]的雙倒數(shù)圖呈線性,則只形成1:1包合,用所得直線的斜率除以截距計(jì)算得K。若雙倒數(shù)圖是兩條交叉的直線,則β-CDs在不同濃度時(shí)與客體分子形成不同包絡(luò)比的包絡(luò)物,即低濃度時(shí)與AFB1呈1:1包絡(luò),在高濃度時(shí)呈2:1包絡(luò)。此方法最有意義之處是可以揭示客體分子與環(huán)糊精之間的多級(jí)包合,這一特點(diǎn)是其他方法所不能及的[17]。包合過(guò)程如下:

        包絡(luò)常數(shù)K=K1·K2[18],K1、K2分別由兩條交叉直線的斜率與截距計(jì)算得出,K1為低濃度時(shí)的包絡(luò)常數(shù);K2為高濃度時(shí)的包絡(luò)常數(shù);β-CDs:AFB1表示β-CDs與 AFB1形成1:1包絡(luò)物;2β-CDs:AFB1表示β-CDs與AFB1形成2:1包絡(luò)物。

        圖3 AFB1-CM-β-CD 雙倒數(shù)圖Fig.3 Double reciprocal plots for inclusion complexes between AFB1 andβ-CD or its derivatives

        為了確保Benesi-Hildebrand方法的可靠性[19],使初始濃度比cβ-CDs/ρAFB1=6000mol/μg>100mol/μg。20℃時(shí),7種β-CDs的雙倒數(shù)圖均呈兩條交叉的直線,如圖3所示,說(shuō)明7種β-CDs與AFB1在低濃度時(shí)形成1:1包合,高濃度時(shí)形成2:1包合。

        表1 AFB1與不同β-CD的包合常數(shù)Table 1 Inclusion constants of AFB1 with β-CD or its derivativess

        由雙倒數(shù)圖計(jì)算出各自的包絡(luò)常數(shù),見表1。K2均遠(yuǎn)小于K1,說(shuō)明AFB1的一端進(jìn)入β-CD空腔時(shí),另一端與另一β-CDs分子結(jié)合變得困難。這是由于β-CDs空腔直徑較大,與AFB1形成1:1包合后可繼續(xù)沿著AFB1分子穿透,干擾了第2個(gè)β-CD分子與AFB1的作用。比較7種β-CD的包合常數(shù)大小次序?yàn)?M-β-CD>HP-β-CD>DM-β-CD(葡萄糖基-β-CD)>β-CD>HE-β-CD>磺丁基-β-CD。選擇包合常數(shù)最大的M-β-CD作為AFB1熒光增強(qiáng)劑進(jìn)行進(jìn)一步研究。

        2.4 包絡(luò)反應(yīng)熱力學(xué)常數(shù)

        根據(jù)范德霍夫方程lnK=-ΔH/RT+ΔS/R,以各溫度條件下的lnK對(duì)溫度的倒數(shù)(1/T)進(jìn)行線性回歸,根據(jù)直線的斜率和截距可求得包絡(luò)物形成過(guò)程的熱力學(xué)參數(shù): ΔH及ΔS;再根據(jù)熱力學(xué)定律:ΔH=ΔG+TΔS,可求得包合反應(yīng)的ΔG[16],結(jié)果如表2所示。

        表2 不同溫度下M-β-CD- AFB1的包絡(luò)常數(shù)和熱力學(xué)參數(shù)Table 2 Effect of temperature on K,ΔG,ΔH andΔS of M-β-CDAFB1

        由表2可知,說(shuō)明隨著溫度的升高,K值逐漸減小,說(shuō)明包絡(luò)物可能趨于離解,客體分子又從M-β-CD空腔內(nèi)重新進(jìn)入水相,包絡(luò)物的穩(wěn)定性降低,也表明低溫有利于包絡(luò)反應(yīng)的進(jìn)行。吉布斯函變?chǔ)<0,說(shuō)明包絡(luò)過(guò)程是一個(gè)自發(fā)的過(guò)程;焓變?chǔ)<0,說(shuō)明反應(yīng)是一個(gè)放熱過(guò)程,其源于主客體分子的范德華力及釋放M-β-CD空腔內(nèi)高能水分子。分子的幾何形狀引起的空間障礙和空腔對(duì)客體分子平移和旋轉(zhuǎn)自由度的限制將引起負(fù)的熵變,而疏水性客體分子在進(jìn)入空腔前脫去水殼并釋放結(jié)合水將引起正的熵變。在本系統(tǒng)中熵變S<0,說(shuō)明分子的幾何形狀引起的空間障礙和空腔對(duì)客體分子平移和旋轉(zhuǎn)自由度的限制在包絡(luò)過(guò)程中起著非常重要的作用。

        2.5 KI淬滅實(shí)驗(yàn)

        圖4 KI對(duì)AFB1及M-β-CD- AFB1體系的熒光淬滅Fig.4 AFB1 fluorescence quenching by KI in the absence and presence of M-β-CD

        KI是常用的陰離子淬滅劑,可以淬滅許多小分子的熒光。在動(dòng)態(tài)淬滅過(guò)程中,熒光體與淬滅劑分子間的相互作用可用Stern-Volmer方程進(jìn)行描述F0/F=1+Ksv[Q],其中F0與F分別是加入淬滅劑前后的熒光強(qiáng)度,[Q]為淬滅劑濃度/(mol/L),Ksv為動(dòng)態(tài)淬滅常數(shù)/(L/mol)[9]。如圖4所示,M-β-CD存在時(shí),KI對(duì)M-β-CD-AFB1體系熒光的淬滅要比對(duì)游離的AFB1弱一些,說(shuō)明M-β-CD對(duì)AFB1的熒光具有保護(hù)作用。這為AFB1進(jìn)入M-β-CD空腔提供了直接證據(jù)。

        2.6 紫外吸收光譜

        圖5 包結(jié)前后AFB1的紫外吸收光譜Fig.5 UV absorbance spectra of AFB1 before and after inclusion

        由圖5可知,AFB1在紫外區(qū)有兩個(gè)吸收峰a(264nm)和b(364nm),b為AFB1分子的吸收峰,推測(cè)a可能為構(gòu)成AFB1分子的雙呋喃環(huán)或香豆素的特征吸收峰。加入M-β-CD后吸收光譜形狀沒有發(fā)生改變,隨著M-β-CD濃度的變化,吸光度發(fā)生了相應(yīng)的變化,為AFB1進(jìn)入M-β-CD空腔提供了證據(jù)。a峰紫外吸收隨M-β-CD濃度的增加呈規(guī)律性的增加,表明AFB1的某一基團(tuán)進(jìn)入M-β-CD空腔,發(fā)生了分子間的包結(jié)作用。

        2.7 M-β-CD- AFB1超分子體系熒光強(qiáng)度影響因素

        2.7.1 溶劑中的甲醇體積分?jǐn)?shù)

        圖6 甲醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)熒光強(qiáng)度的影響Fig.6 Effect of methanol concentration on fluorescence intensity

        由于AFB1溶于有機(jī)溶劑,在水中溶解度極低;M-β-CD溶于水,能夠增加AFB1在水相中的溶解度。因此,甲醇在整個(gè)反應(yīng)體系中的比例對(duì)熒光值的增強(qiáng)是一個(gè)考察的重點(diǎn)因素。由圖6可知,甲醇體積分?jǐn)?shù)越低,熒光值越高。分析原因,有機(jī)溶劑主要影響M-β-CD與客體分子間的疏水作用,隨甲醇體積分?jǐn)?shù)的增加主客體間的疏水作用減弱。有人認(rèn)為兩個(gè)過(guò)程可能會(huì)導(dǎo)致該現(xiàn)象:一是小分子對(duì)M-β-CD空腔的競(jìng)爭(zhēng)作用致使空腔內(nèi)的客體被置換到水相中,二是M-β-CD、客體分子及小分子形成三元超分子包結(jié)物。分析甲醇和AFB1的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)不易與M-β-CD形成三元包結(jié)物[20]。所以推測(cè)是甲醇分子競(jìng)爭(zhēng)進(jìn)入M-β-CD空腔,導(dǎo)致AFB1包合不完全,從而使熒光強(qiáng)度降低。

        2.7.2 M-β-CD濃度

        圖7 M-β-CD濃度對(duì)熒光強(qiáng)度的影響Fig. 7 Effect of M-β-CD concentration on fluorescence intensity

        由圖7可知,AFB1質(zhì)量濃度為20μg/L時(shí),隨著M-β-CD濃度的增加,體系的熒光強(qiáng)度時(shí),顯著增大,至22.5mmol/L時(shí),熒光強(qiáng)度基本穩(wěn)定,繼續(xù)增大M-β-CD用量,熒光強(qiáng)度增加很緩慢。

        2.7.3 放置時(shí)間

        圖8 放置時(shí)間對(duì)熒光強(qiáng)度的影響Fig.8 Effect of sitting time on fluorescence intensity

        由圖8可知,加入試劑搖勻后,室溫條件下放置1min熒光強(qiáng)度即可穩(wěn)定,且較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持穩(wěn)定。

        2.7.4 干擾離子

        由于AFB1主要污染花生、玉米、飼料等,根據(jù)文獻(xiàn)[2 0]報(bào)道,此類農(nóng)作物及其加工產(chǎn)品中,含有Ca2+、Mg2+、K+、Na+、Fe3+等元素??紤]到這些元素可能會(huì)對(duì)測(cè)定造成干擾,因此在優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件下,考察這些共存離子對(duì)測(cè)定的影響。以空白干擾信號(hào)強(qiáng)度的3倍標(biāo)準(zhǔn)差(S)作為判斷干擾與否的標(biāo)準(zhǔn), 除Fe3+對(duì)熒光有強(qiáng)淬滅作用,絕大多數(shù)離子不會(huì)對(duì)測(cè)定產(chǎn)生干擾,結(jié)果見表3。

        表3 共存離子對(duì)AFB1熒光強(qiáng)度的影響Table 3 Effect of interfering ions on AFB1 fluorescence intensity

        3 結(jié) 論

        β-CDs與AFB1通過(guò)形成超分子包絡(luò)物從而大幅度提高了體系的熒光響應(yīng)值,利用這種特性可提高AFB1熒光檢測(cè)的靈敏度。實(shí)驗(yàn)對(duì)β-CDs增強(qiáng)AFB1熒光強(qiáng)度的機(jī)理進(jìn)行了研究,Benesi-Hildebrand表明6種β-CDs低濃度時(shí)均能與AFB1形成1:1型的超分子包絡(luò)物,高濃度時(shí)形成2:1型包絡(luò)物,從而大大增強(qiáng)AFB1的熒光發(fā)射強(qiáng)度。但是在某些情況下,對(duì)于2:1型作用體系,Benesi-Hildebrand方程可能會(huì)給出錯(cuò)誤的作用比信息,因此要明確包合比,需在今后進(jìn)行更嚴(yán)謹(jǐn)?shù)难芯俊?shí)驗(yàn)選擇了包合常數(shù)最大的M-β-CD做進(jìn)一步研究顯示,M-β-CD與AFB1包合過(guò)程的熵變?chǔ)、焓變?chǔ)及自由能變化ΔG均為負(fù)值,說(shuō)明包合反應(yīng)是放熱反應(yīng)且能自發(fā)進(jìn)行,焓變是形成超分子包絡(luò)物的主要驅(qū)動(dòng)力。KI淬滅實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明AFB1進(jìn)入M-β-CD空腔,從而熒光得到保護(hù)。溶劑中甲醇體積分?jǐn)?shù)、M-β-CD濃度、時(shí)間、溫度、干擾離子等對(duì)包絡(luò)反應(yīng)均有較大影響。在實(shí)際應(yīng)用中,通過(guò)對(duì)各影響因素的控制,可以達(dá)到最佳熒光增強(qiáng)效果。

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        Mechanisms Underlying Fluorescence Enhancement of Aflatoxin B1by β-Cyclodextrin and Its Derivatives

        ZHANG Min1,2,GUO Ting1,LIU Xin1,XIAO Jie1,ZHANG Yu-hao1,3,MA Liang1,3,*
        (1.College of Food Science, Southwest University, Chongqing 400716, China;2. Product Quality Supervision and Assay Office of Ziyany, Ziyang 641300, China;3. Chongqing Special Food Programme and Technology Research Center, Chongqing 400716, China)

        The mechanisms underlying fluorescence enhancement of aflatoxin B1 (AFB1) by β-cyclodextrin (β-CD) and its derivatives were explored using spectroscopy, Benesi-Hidebrand analysis and thermodynamics. Moreover the effects of methanol volume percentage, M-β-CD concentration, reaction time and interfering ions on fluorescence enhancement were analyzed. β-CD and its six derivatives showed an inclusion ratio to AFB1 of 1:1 at low concentrations and 2:1 at high concentrations. The thermodynamic parameters entropy change (ΔS), enthalpy change (ΔH) and free energy change (ΔG) for maximum inclusion constant between M-β-CD and AFB1 were negative, suggesting that the inclusion reaction is exothermic and can occur spontaneously. Enthalpy change was the dominant force during the formation of inclusion complexes. UV absorption spectra and KI quenching experiments showed that AFB1could enter M-β-CD cavity to protect fluorescence. Therefore, βcyclodextrin and its derivatives can allow considerable enhancement in the fluorescence emission intensity of AFB1 by the formation of supramolecular inclusion complexes, resulting in increased sensitivity of AFB1 fluorescence analysis.

        β-cyclodextrin;aflatoxin B1;fluorescence enhancement;supramolecular inclusion

        TS207.3

        A

        1002-6630(2012)15-0028-06

        2011-07-04

        國(guó)家“863”計(jì)劃項(xiàng)目(2007AA10Z427);中央高?;究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)(XDJK 2009C056);

        西南大學(xué)研究生科技創(chuàng)新基金項(xiàng)目(ky2010006)

        張敏(1987—),女,碩士研究生,研究方向?yàn)槭称钒踩c質(zhì)量控制。E-mail:zmsally@163.com

        *通信作者:馬良(1979—),女,副教授,博士,研究方向?yàn)槭称钒踩珯z測(cè)技術(shù)與食品質(zhì)量控制。E-mail:zhyhml@163.com

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