鄒麗麗，楊 俊，黎卓炎，韋雄文，梁遠(yuǎn)東*，馬建升

（1.廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，南寧 530005；2.廣西南丹縣港豐農(nóng)牧有限公司，廣西 南丹 547200；3.廣西比樂(lè)生物科技公司，南寧 530031；4.廣州龍沙有限公司，廣州 510288）

肉堿有左旋（L-型）和右旋（D-型）兩種，其中只有左旋肉堿才有生物活性。L-肉堿又稱肉毒堿，化學(xué)名稱β-羥基-γ-甲銨丁酸，是一種白色透明細(xì)粉或者白色晶狀體。L-肉堿是人類及動(dòng)物必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，是類維生素營(yíng)養(yǎng)素，相當(dāng)于B族維生素，是一種與動(dòng)物體內(nèi)脂肪酸代謝有關(guān)的化合物，其主要功能是作為載體將長(zhǎng)鏈脂肪酸從線粒體膜外輸送到膜內(nèi)促進(jìn)脂肪酸的β-氧化[1]。大量試驗(yàn)證實(shí)，L-肉堿對(duì)提高母豬的繁殖性能、促進(jìn)肉仔豬的生長(zhǎng)和發(fā)育、提高飼料利用率、減少動(dòng)物體內(nèi)脂肪的沉積、改善肉的品質(zhì)、提高精液質(zhì)量和繁殖育種等方面有良好的效果，是一種新型多功能飼料添加劑[2-9]。本試驗(yàn)旨在研究L-左旋肉堿對(duì)地方種公雞精液品質(zhì)的影響及相關(guān)性，探討L-左旋肉堿適宜添加水平，為配制地方種公雞日糧合理應(yīng)用L-左旋肉堿提供參考依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

左旋肉堿由廣州龍沙有限公司提供，有效成分含量為50%。試驗(yàn)種公雞和種公雞飼料由廣西南丹港豐公司提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選用36周齡的瑤雞種公雞作為試驗(yàn)用雞。將24只種公雞隨機(jī)分為6個(gè)處理組，每個(gè)處理設(shè)4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只公雞，對(duì)應(yīng)每只公雞配20只母雞。6個(gè)試驗(yàn)處理日糧左旋肉堿添加水平分別為0、125、250、375、500、750mg·kg-1。試驗(yàn)種公雞基礎(chǔ)飼糧由港豐公司飼料廠按照配方配制，飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)設(shè)預(yù)試期15 d，正試期91 d，試驗(yàn)期為37～52周齡。試驗(yàn)在瑤雞種雞場(chǎng)進(jìn)行，試驗(yàn)雞采用二層全階梯籠養(yǎng)。人工控制通風(fēng)、自然光照和人工光照相結(jié)合，乳頭式全自動(dòng)飲水和人工定時(shí)喂料。預(yù)試期各處理組飼喂基礎(chǔ)日糧，正試期分別喂各試驗(yàn)日糧。日常管理和免疫程序按照雞場(chǎng)規(guī)定進(jìn)行，每天觀察雞群健康狀況和記錄試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)

分別于39、42、50、51、52周齡共5次測(cè)定試驗(yàn)雞精液量、精子活力、精子密度、有效精子數(shù)、精液pH，精液量按照精杯刻度記錄。取原精液在常溫條件下用400倍顯微鏡平板壓片檢測(cè)精子活力。精子密度用紅細(xì)胞球計(jì)數(shù)法測(cè)定。精液pH用精密pH試紙測(cè)定。有效精子數(shù)計(jì)算公式見(jiàn)式（1）。

表1 基礎(chǔ)日糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平

有效精子數(shù)=精液量×精子密度×精子活率（1）

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel進(jìn)行處理，SPSS 16.0軟件進(jìn)行方差分析，LSD法進(jìn)行多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)種公雞精液品質(zhì)的影響

L-左旋肉堿對(duì)種公雞精液品質(zhì)的影響結(jié)果見(jiàn)表2。

由表2可知，各試驗(yàn)處理組間公雞的精液量以D組精液量最多，D組比A組提高33.33%，差異極顯著（P＜0.01），E組與A組相比提高26.67%，差異極顯著（P＜0.01）；E組與A組相比提高20%，差異顯著（P＜0.05）。從精子的活力來(lái)看，E組活力最高，比A組提高30.3%，差異極顯著（P＜0.01）；A、B、C、D、F組之間差異不顯著（P＞0.05）。從精子密度來(lái)看，D組密度最高，與A組相比提高52.64%，差異極顯著（P＜0.01）；從有效精子數(shù)來(lái)看，D組的有效精子數(shù)最多，比A組提高186.32%，差異極顯著（P＜0.01）；從精液pH來(lái)看，各處理間差異不顯著（P＞0.05）。結(jié)果表明，日糧中添加L-左旋肉堿極顯著提高種公雞的精液量、精子活力、精子密度、有效精子數(shù)，而對(duì)精液pH無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

表2 各處理的種公雞精液品質(zhì)

2.2 L-左旋肉堿與精液量和精子活力的相關(guān)關(guān)系

L-左旋肉堿與精液量和精子活力的相關(guān)關(guān)系見(jiàn)圖1～2。

從圖1可知，種公雞精液量與L-左旋肉堿的添加量呈曲線相關(guān)（R2=0.7946），依據(jù)其回歸方程式y(tǒng)=-0.0000004x2+0.0004x+0.2956計(jì)算曲線拐點(diǎn)的L-左旋肉堿添加量為500mg·kg-1。從圖2可知，種公雞精子活力與L-左旋肉堿的添加量呈曲線相關(guān)（R2=0.7946），依據(jù)回歸方程式y(tǒng)=-0.0000008x2+0.0008x+0.9836計(jì)算曲線拐點(diǎn)的L-左旋肉堿添加量為450mg·kg-1。結(jié)果表明，種公雞精液量和精子活力與L-左旋肉堿的添加量呈高度曲線相關(guān)，精液量隨L-左旋肉堿的添加量增加而增加，到適當(dāng)?shù)奶砑恿亢缶毫砍霈F(xiàn)拐點(diǎn)，呈下降狀態(tài)，隨L-左旋肉堿的添加量增加而減少。

圖1 精液量曲線

圖2 精子活力曲線

3 討論

日糧中添加L-左旋肉堿顯著提高種公雞的精液量、精子活力、精子密度、有效精子數(shù)（P＜0.05），而對(duì)精液pH無(wú)顯著影響（P＞0.05）。關(guān)于L-肉堿的添加應(yīng)用研究已經(jīng)比較多，但是應(yīng)用于公雞上的比較少。有專家研究報(bào)道，在58～62周齡和32～37周齡兩個(gè)階段的白萊航公雞飼糧中添加L-左旋肉堿500mg·kg-1可提高精液的濃度，減少脂質(zhì)過(guò)氧化的精子，提高有效精子數(shù)[10]。白小龍等研究表明，在飼糧中添加L-肉堿可以通過(guò)增強(qiáng)公豬的性欲、增加精子抗氧化性和精子中的DHA從而提高公豬的精子量、精子活力和精子密度[11]。王國(guó)富等報(bào)道，添加左旋肉堿可極顯著提高長(zhǎng)白豬和大白豬的精子活力（P＜0.01）[12]。添加L-左旋肉堿300mg·kg-1灌胃糖尿病大鼠6周，可以減少DM大鼠生精細(xì)胞凋亡，增加附睪中的精子數(shù)量，提高精子活力[13]。

種公雞精液量和精子活力與L-左旋肉堿的添加量呈高度曲線相關(guān)。種公雞體內(nèi)新形成的精子無(wú)自然受精能力，尚未成熟，需要在附睪中獲得運(yùn)動(dòng)和受精能力，肉堿在其中起到重要的作用，其重要作用主要是直接影響精子的成熟和精子的活力。肉堿是雄性動(dòng)物附睪上皮的一種分泌物，也是脂肪酸進(jìn)入線粒體進(jìn)行β-氧化的轉(zhuǎn)運(yùn)載體，在附睪和精液中一定濃度的肉堿可促進(jìn)脂肪酸氧化功能，還可降低不飽和脂肪酸脂質(zhì)發(fā)生過(guò)氧化反應(yīng)[14]。過(guò)高或者偏低的量都抑制肉堿作用的發(fā)揮，程懷瑾等研究報(bào)道，肉堿與精子密度、活力等精液參數(shù)之間存在相關(guān)性[15]。本試驗(yàn)得出精液量和精子活力與添加量呈高度曲線關(guān)系，精液量和精子活力拐點(diǎn)的L-左旋肉堿添加量分別為500和450mg·kg-1。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加L-左旋肉堿可顯著提高種公雞的精液量、精子活力、精子密度、有效精子數(shù)，但對(duì)精液pH無(wú)顯著影響。從L-左旋肉堿添加量對(duì)高種公雞的精液量、精子活力、精子密度、有效精子數(shù)最大效應(yīng)考慮，其最適添加量應(yīng)為450～500mg·kg-1。

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