[摘要] 目的 建立HPLC法測(cè)定鹽酸二氧丙嗪片含量的方法。 方法 采用HPLC法，C18柱（46 mm×200 mm，5 μm）；流動(dòng)相為醋酸鹽緩沖液（取0.05 mol/L的醋酸銨溶液1 000 mL，加三乙胺1 mL，用醋酸調(diào)節(jié)pH值至6.5）-乙腈（75︰25）；檢測(cè)波長(zhǎng)為258 nm。 結(jié)果 鹽酸二氧丙嗪在2.21～22.08 μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.999 9），平均回收率為99.76%，RSD=0.52%。 結(jié)論 本方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確，專屬性強(qiáng)，可作為鹽酸二氧丙嗪片的含量測(cè)定方法。

[關(guān)鍵詞] HPLC法；鹽酸二氧丙嗪片；含量

[中圖分類號(hào)] R917 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 2095-0616（2012）20-91-02

鹽酸二氧丙嗪片又名咳速克，具有較強(qiáng)的鎮(zhèn)咳作用，并具有抗組胺、解除平滑肌痙攣、抗炎和局部麻醉作用。適用于鎮(zhèn)咳、平喘，也適用于治療蕁麻疹及皮膚瘙癢癥等。關(guān)于其含量測(cè)定方法，《中國(guó)藥典2010年版二部》為紫外分光光度法，用0.1 mol/L的鹽酸溶液提取后測(cè)定其吸光度，該方法專屬性差，雜質(zhì)對(duì)測(cè)定有干擾[1]。本實(shí)驗(yàn)建立用高效液相色譜法測(cè)定鹽酸二氧丙嗪的含量，通過色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)，測(cè)出鹽酸二氧丙嗪的含量與藥典方法比較得出：HPLC法測(cè)定其含量，操作簡(jiǎn)便，靈敏，專屬性強(qiáng)，可作為本品的質(zhì)量控制[2]。

1 儀器與試藥

島津UV-2450型紫外分光光度計(jì)，METTLER雙量程電子天平，HP1100高效液相色譜儀，在線脫氣機(jī)，HP1100化學(xué)工作站，Agilent G1313ALS自動(dòng)進(jìn)樣器。鹽酸二氧丙嗪對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)10299-0001，供含量測(cè)定用）；鹽酸二氧丙嗪片（焦作福瑞堂制藥有限公司生產(chǎn)，H41021659），批號(hào)：20110608，20110611，20110703；水為超純水；乙腈為色譜純；其他試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Diamonsil-C18柱（46 mm×200 mm，5 μm）；流動(dòng)相：醋酸鹽緩沖液（取0.05 mol/L的醋酸銨溶液1 000mL，加三乙胺1 mL，用醋酸調(diào)節(jié)pH值至6.5）-乙腈（75︰25）；流速：1.00 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)258 nm；靈敏度：0.01 AVFS；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：20 μL。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

取鹽酸二氧丙嗪對(duì)照品適量，精密稱定，加流動(dòng)相制成每毫升含0.276 mg鹽酸二氧丙嗪的溶液，作為對(duì)照品貯備溶液。精密吸取對(duì)照品貯備溶液5.0 mL，置25 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為55.2 μg/mL的對(duì)照品溶液[3]。

2.3 供試品溶液的制備

取本品20片，分別除去包衣后，用分析天平精密稱定，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于鹽酸二氧丙嗪5.0 mg），分別放置100 mL量瓶中，加流動(dòng)相適量溶解，然后用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5.0 mL，置25 mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液[4]。

2.4 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)[5]

分別取已經(jīng)制備好的鹽酸二氧丙嗪的對(duì)照溶液、供試品溶液和陰性溶液，按照2.1項(xiàng)下的色譜條件，分別準(zhǔn)確進(jìn)樣20 μL，進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，考察系統(tǒng)適用性。見圖1。

2.5 線性關(guān)系的考察

精密量取對(duì)照品溶液1.0、2.5、5.0、7.5、10.0 mL，分置25 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得。對(duì)照品溶液的濃度分別為：2.21、5.52、11.04、16.56、22.08 μg/mL。分別吸取20 μL，注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，以對(duì)照品進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，計(jì)算回歸方程：Y=29 362.3X+301.02，r=0.999 9 結(jié)果表明，在2.21～22.08 μg/mL 范圍內(nèi)對(duì)照品鹽酸二氧丙嗪呈良好的線性關(guān)系[6]。

2.6 進(jìn)樣精密度試驗(yàn)

按2.1項(xiàng)下的色譜條件，取濃度為11.04 μg/mL的鹽酸二氧丙嗪對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次，測(cè)定色譜峰的峰面積，RSD為0.69%，結(jié)果表明此種方法精密度良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密吸取2.3項(xiàng)下的供試品溶液，分別于放置0、2、4、6、8、12 h后，分別吸取20 μL，注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，結(jié)果鹽酸二氧丙嗪的RSD為0.82%。表明樣品在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8 重復(fù)性試驗(yàn)

取批號(hào)20110608的樣品，按照樣品測(cè)定方法操作，依法平行測(cè)定6次，記錄峰面積，計(jì)算鹽酸二氧丙嗪的RSD為 0.77%。結(jié)果表明該方法的重現(xiàn)性較好。

2.9 加樣回收率試驗(yàn)

取已知含量的樣品，分別取約0.029 g 6份，精密稱定，分置100 mL量瓶中，分別加入2.3項(xiàng)下對(duì)照品溶液5.0 mL，用流動(dòng)相超聲溶解，并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，按2.1項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定，結(jié)果見表1。

2.10 樣品中鹽酸二氧丙嗪的含量測(cè)定

取3批樣品各20片，除去包衣后精密稱定，研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于鹽酸二氧丙嗪5.0 mg），按照2.3項(xiàng)下的方法制備樣品溶液，分別準(zhǔn)確吸取20 μL，按照2.1項(xiàng)下色譜條件，以峰面積計(jì)算，結(jié)果見表2。

3 討論

筆者選用258 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)，是將對(duì)照品溶液在

200～400 nm的波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，結(jié)果在258 nm的波長(zhǎng)處有最大吸收；以醋酸鹽緩沖液（取0.05 mol/L的醋酸銨溶液1 000 mL，加三乙胺1 mL，用醋酸調(diào)節(jié)pH值至6.5）-乙腈（75︰25）為流動(dòng)相，出峰時(shí)間理想，且色譜峰形好，陰性對(duì)照無干擾[7]。結(jié)果證明，回收率高，精密度好，雜質(zhì)和輔料無影響，可用于鹽酸二氧丙嗪片的含量測(cè)定。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典2010年版二部[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄ⅤD29-31.

[2] 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典2010年版二部[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：627-628.

[3] 王友新，劉俊波，閻廣華，等.HPLC法測(cè)定小兒布洛芬口服液中布洛芬的含量[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010，7（30）：48-49.

[4] 許建平.HPLC法測(cè)定布洛芬膠囊的含量[J].中華中西醫(yī)學(xué)雜志，2010，8（3）：6-7.

[5] 王艷芝.HPLC法測(cè)定雷公藤片中雷公藤甲素的含量[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010，7（30）：44-45.

[6] 周岐?jiǎng)?，李健和，徐幸?高效液相色譜法測(cè)定鹽酸甲氯芬酯分散片含量及有關(guān)物質(zhì)[J].中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥，2009，16（4）：73-76.

[7] 楊斌.HPLC法測(cè)定蒲公英中綠原酸的含量[J].西北藥學(xué)雜志，2009，24（3）：182-183.

（收稿日期：2012-06-21）