張全 韓君 張小兵 劉峰

摘要：采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定了9種殺菌劑對(duì)蘋(píng)果炭疽病菌的抑制活性。結(jié)果表明，蘋(píng)果炭疽病菌對(duì)三唑類殺菌劑戊唑醇、己唑醇、氟硅唑、苯醚甲環(huán)唑、腈菌唑的敏感性依次下降，EC₅₀值均在2.2μg/ml以下EC₅₀值均低于21μg/ml；甲基硫菌靈對(duì)蘋(píng)果炭疽病菌毒力EC₅₀值為1.9008μg/ml，與腈菌唑毒力相當(dāng)；而福美鋅、醚菌酯和代森聯(lián)抑制病菌生長(zhǎng)的毒力顯著低于三唑類殺菌劑。

關(guān)鍵詞：殺菌劑；毒力；蘋(píng)果炭疽病菌

中圖分類號(hào)：S482.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001-4942(2012)01-0091-03

蘋(píng)果炭疽病又稱苦腐病、晚腐病，由蘋(píng)果炭疽病菌(Glomerella cingulata)引起，主要危害蘋(píng)果果實(shí)，是引起果實(shí)斑點(diǎn)或腐爛的一種真菌病。我國(guó)大部分蘋(píng)果產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生，在夏季高溫、多雨、潮濕的地區(qū)發(fā)病尤為嚴(yán)重，在果實(shí)近成熟時(shí)開(kāi)始發(fā)病，采收后在貯藏期繼續(xù)發(fā)病，成為采前和采后貯運(yùn)期的重要病害，且此病在蘋(píng)果的整個(gè)生長(zhǎng)期有多次再侵染和潛伏侵染現(xiàn)象，近年發(fā)病又有上升的勢(shì)頭，一般不易有效防治。目前防治上多采用代森錳鋅、百菌清、代森聯(lián)等保護(hù)劑等，預(yù)防效果較好，但治療效果差，施藥周期短。三唑類殺菌劑是一類廣譜、高效、內(nèi)吸性殺菌劑，對(duì)絲核菌屬真菌具很高的生物活性，其作用機(jī)理為影響甾醇類生物合成，使菌體細(xì)胞膜功能受到破壞，其重要品種戊唑醇對(duì)小麥散黑穗病、小麥條銹病、大豆銹病、花生葉斑病、豇豆銹病、蘋(píng)果輪紋病等病害都具有很好的防治效果。為了評(píng)價(jià)不同藥劑防治蘋(píng)果炭疽病的可行性，筆者測(cè)定了9種殺菌劑對(duì)蘋(píng)果炭疽病菌的毒力，以期為篩選防治蘋(píng)果炭疽病的殺菌劑提供參考。

1.材料與方法

1.1供試菌種

蘋(píng)果炭疽病菌(GlomereIla cingulata)由泰安郊區(qū)新鮮發(fā)病材料上分離得到。

1.2供試殺菌劑

95％己唑醇原藥(江蘇常州市豐登農(nóng)藥廠提供)；96％戊唑醇原藥(山東華陽(yáng)農(nóng)藥科技股份有限公司提供)；93％氟硅唑原藥(江蘇建農(nóng)農(nóng)藥化工有限公司提供)；95％醚菌酯原藥(山東京博農(nóng)化有限公司提供)；92％苯醚甲環(huán)唑原藥(山東聯(lián)合農(nóng)藥有限公司提供)；92％甲基硫菌靈原藥(江西省海利貴溪化工農(nóng)藥有限公司)；90％福美鋅原藥(河北冠龍農(nóng)化有限公司)；85％代森聯(lián)原藥(江蘇省南通寶葉化工有限公司)；95％腈菌唑原藥(浙江一帆農(nóng)化有限公司)。

1.3殺菌劑的室內(nèi)毒力測(cè)定

1.3.1供試藥劑1％母液的制備苯醚甲環(huán)唑、腈菌唑、氟硅唑1％水乳劑母液(100g)和制備配方：原藥1g，環(huán)己酮2g，正丁醇1g，1602^#1.5g，AEO-60.5g，余量加去離子水補(bǔ)至100g。

己唑醇、戊唑醇、醚菌酯、甲基硫菌靈、福美鋅、代森聯(lián)1％水懸浮劑母液(100g)配制：原藥1g，黃原膠0.2g，1602^#20.0g，500^#1.0g，余量加去離子水補(bǔ)至100g，濕法研磨1h即得1％水懸浮劑母液。經(jīng)測(cè)定所得懸浮劑的平均粒徑在5.0～7.5μm之間，懸浮率均在92％以上，符合農(nóng)藥懸浮劑的要求，以上藥劑均現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.3.2藥劑對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用

采用菌絲生長(zhǎng)速率法進(jìn)行測(cè)定。將供試藥劑分別用去離子水稀釋成系列濃度，按培養(yǎng)基與藥液體積比9：1的比例加入到已融化并冷卻至50℃左右的PDA培養(yǎng)基中，充分搖勻后迅速倒入滅菌的直徑為9cm培養(yǎng)皿中，制成系列濃度的含藥平板，以加入等體積的無(wú)菌水的PDA平板為對(duì)照。用直徑為8mm的打孔器截取在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)3天的病菌菌餅，把菌餅反接到含藥平板中央，每處理重復(fù)3次，置于28℃下培養(yǎng)5d，用十字交叉法測(cè)量各處理茵落直徑，每個(gè)菌落按十字交叉法測(cè)量2次，以其平均值代表菌落的大小，計(jì)算抑制率。通過(guò)DPS分析軟件求出藥劑的毒力回歸曲線、EC₅₀值及EC₉₀值。

2.結(jié)果與分析

由表1結(jié)果可知，供試5種三唑類殺菌劑對(duì)蘋(píng)果炭疽病菌具有較高的抑菌活性，尤以戊唑醇和己唑醇毒力最高，EC₅₀值分別為0.3385和0.4110μg/ml；其次是氟硅唑、苯醚甲環(huán)唑、腈菌唑，EC₅₀值分別為0.4625、0.6423、2.1603μg/ml；甲基硫菌靈對(duì)蘋(píng)果炭疽病菌毒力EC₅₀值為1.9008μg/ml，與腈菌唑毒力水平相當(dāng)，這表明甲基硫菌靈對(duì)該病菌具有兼治作用；而福美鋅的毒力EC₅₀值為6.2115μg/ml，EC₉₀值為13.8962μg/m]，明顯低于甲基硫茵靈和5種三唑類殺菌劑；醚菌酯和代森聯(lián)對(duì)該病菌的毒力作用則更低，顯著低于其他藥劑。

3.討論

蘋(píng)果炭疽病菌目前最主要的防治措施仍然是化學(xué)防治。筆者測(cè)定了9種殺菌劑對(duì)蘋(píng)果炭疽病菌的抑制活性，為蘋(píng)果炭疽病防治藥劑的篩選提供了理論依據(jù)。

本研究顯示供試病菌對(duì)幾種三唑類殺菌劑己唑醇、氟硅唑、戊唑醇、腈菌唑、苯醚甲環(huán)唑等均具有較高的敏感性，表明該類藥劑對(duì)蘋(píng)果炭疽病有一定的兼治作用，且由于此類藥劑有內(nèi)吸活性，因此可以彌補(bǔ)保護(hù)劑以及常規(guī)藥劑治療活性的不足，具有較大的應(yīng)用潛力。但三唑類殺菌劑由于作用位點(diǎn)相對(duì)單一，存在一定的抗藥性風(fēng)險(xiǎn)Ⅲ。因此，有必要開(kāi)展與作用機(jī)制不同的其他類型的殺菌劑混用、混配或交替使用的技術(shù)研究，以延緩此類藥劑抗性的產(chǎn)生。

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