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        中國甜櫻桃病毒病及其檢測技術(shù)研究進展

        2012-04-29 00:44:03王文文宗曉娟陳立偉王甲威魏海蓉徐麗嚴雪瑞劉慶忠
        湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2012年18期
        關(guān)鍵詞:甜櫻桃檢測技術(shù)特性

        王文文 宗曉娟 陳立偉 王甲威 魏海蓉 徐麗 嚴雪瑞 劉慶忠

        摘要:綜述了近年來中國對甜櫻桃(Prunus avium L.)病毒病及其檢測技術(shù)的相關(guān)報道,介紹了中國甜櫻桃上常見病毒的種類、危害及特性,主要包括:李屬壞死環(huán)斑病毒(PNRSV)、李矮縮病毒(PDV)、蘋果褪綠葉斑病毒(ACLSV)、櫻桃銼葉病毒(CRLV)、櫻桃病毒A(CVA)、櫻桃綠環(huán)斑駁病毒(CGRMV)、櫻桃小果病毒(LChV);闡述了甜櫻桃病毒檢測中所用的方法、技術(shù),包括指示植物法(生物學(xué)鑒定法)、電子顯微鏡技術(shù)、血清學(xué)方法、分子生物學(xué)技術(shù)方法等。

        關(guān)鍵詞:甜櫻桃(Prunus avium L.);病毒;特性;檢測技術(shù)

        中圖分類號:S662.5;S436.629文獻標識碼:A文章編號:0439-8114(2012)18-3929-05

        Advances in Sweet Cherry Viruses and Detection Technology in China

        WANG Wen-wen1,ZONG Xiao-juan2,3,CHEN Li-wei1,WANG Jia-wei2,3,WEI Hai-rong2,3,XU Li2,3,

        YAN Xue-rui1,LIU Qing-zhong2,3

        (1. College of Plant Protection,Shenyang Agricultural University, Shenyang 110866,China; 2. Shandong Institute of Pomology, Taian 271000,Shandong,China; 3. Shandong Key Laboratory of Pomology Biological Technology, Taian 271000, Shandong,China)

        Abstract: The recent virus disease research on sweet cherry in China was reviewed, the species of the main sweet cherry viruses identified and the characteristics of these viruses were introduced. These viruses included Prunus necrotic ringspot virus, Prunus dwarf virus, Apple chlorotic leaf spot virus, Cherry rasp leaf virus, Cherry virus A, Cherry green ring mottle virus,Little cherry virus. The detection technologies were also described, including indicator plant,electron microscopy,serological method and molecular biological techniques.

        Key words: sweet cherry(Prunus avium L.); virus; characteristics; detection technology

        甜櫻桃(Prunus avium L.)又名大櫻桃,屬薔薇科李屬櫻亞屬植物,原產(chǎn)于歐洲黑海沿岸和亞洲西部[1],于20世紀90年代初引入中國,因其經(jīng)濟效益高、管理簡單,成為中國近年來果樹產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整的重要樹種。2007年中國甜櫻桃栽培面積約9.7萬hm2,產(chǎn)量40萬t左右,主要集中在環(huán)渤海灣的遼寧、山東一帶[2]。甜櫻桃果實酸甜可口,且營養(yǎng)豐富,還有很高的醫(yī)用價值,被譽為“果中珍品”[3]。近年來隨著無性繁殖代數(shù)的越來越多,病毒病逐漸成為影響甜櫻桃產(chǎn)量和質(zhì)量的關(guān)鍵因素[1]。

        據(jù)國外報道,目前核果類病毒中櫻屬病毒主要有68種,其中可以侵染甜櫻桃的病毒約有34種,比較常見的甜櫻桃病毒主要有20種[1]。中國自開展甜櫻桃病毒病的研究以來,已經(jīng)先后檢測并報道了7種病毒,分別是李屬壞死環(huán)斑病毒(PNRSV)[4,5]、李矮縮病毒(PDV)[6]、蘋果褪綠葉斑病毒(ACLSV)[6]、櫻桃銼葉病毒(CRLV)[7]、櫻桃病毒A(CVA)[8]、櫻桃綠環(huán)斑駁病毒(CGRMV)[9]、櫻桃小果病毒-2(LChV-2)[10]。目前已初步明確了中國甜櫻桃主產(chǎn)區(qū)病毒病的種類、危害,并在病毒檢測方面取得了一定的進展,本研究結(jié)合自己的研究成果,綜述了中國甜櫻桃病毒病及其檢測技術(shù)的研究進展,期望為今后甜櫻桃病毒病的研究提供參考。

        1甜櫻桃主要病毒、危害及特性

        1.1李屬壞死環(huán)斑病毒(Prunus necrotic ringspot virus,PNRSV)

        PNRSV是1932年由Valleau[11]在李和桃樹上首次發(fā)現(xiàn)的,它可以引起環(huán)斑病害,隨后在世界范圍內(nèi)廣泛傳播。該病毒主要侵染歐洲甜櫻桃、酸櫻桃(P. cerasus)、桃(P. persia)、蘋果(Malus sylvestris)、杏(P. armeniaca)和洋李(P. domistica)等李屬和薔薇屬植物[12],寄主多達180多種植物。

        PNRSV是分布最廣、經(jīng)濟上危害最嚴重的李屬病毒。常見的危害癥狀包括壞死環(huán)斑、碎葉、帶狀葉、粗花葉,有時還會產(chǎn)生耳突,病葉出現(xiàn)壞死斑,中間部分壞死、脫落形成穿孔。該病毒主要通過種子、花粉、線蟲等傳播,也可以通過機械調(diào)運進行遠距離傳播[1]。PNRSV對大櫻桃危害嚴重,各國對其非常重視,1992年中國將其列為入境檢疫危險性有害生物[13]。

        PNRSV屬于雀麥花葉病毒科(Bromoviridae),等軸不穩(wěn)環(huán)斑病毒屬(Ilarvirus)成員。病毒粒體球形,直徑約為23 nm,線形正義ssRNA分子,三分體基因組(RNA1、RNA2、RNA3)。其中,RNA1和RNA2為單順反子,分別編碼病毒的復(fù)制酶蛋白P1和P2,RNA3為雙順反子,編碼病毒的運動蛋白(MP 或者ORF3a),亞基因組RNA4參與病毒的外殼蛋白(CP或者ORF3b)的表達。2001年Terlizzi等[14]又發(fā)現(xiàn)PNRSV病毒粒子里還包含有RNA5。根據(jù)血清學(xué)反應(yīng),將PNRSV分為3種血清型,即CH3、CH9、CH30[15]和2種致病型M和R[11](溫和致病型和皺縮花葉病型)。按照分子生物學(xué)及其序列同源性分析,PNRSV又可分為組I(PV32)、組Ⅱ(PV96)和組Ⅲ(PE5)[13-15]3組,其中,皺縮花葉病型株系分在組I;溫和致病型株系分在組Ⅱ;組III中的株系既有溫和致病型的株系也有引起嚴重癥狀的類型[16]。

        1996年Zhou等[4]利用血清學(xué)試劑盒在中國首次報道了PNRSV的發(fā)生;同年李青等[5]利用ELISA法對北京地區(qū)的桃、櫻桃上PNRSV的發(fā)生情況進行了檢測;1998年阮小鳳等[6]對甜櫻桃上PNRSV等病毒感染情況進行ELISA檢測,PNRSV感染率為21.4%。2000年侯義龍[17]率先在國內(nèi)建立起李屬植物PNRSV及PDV的RT-PCR分子檢測體系;代紅艷等[18]完成了甜櫻桃莖尖組培苗中PNRSV的RT-PCR檢測。2005年李明福等[19]在北京甜櫻桃上發(fā)現(xiàn)了PNRSV。2011年本課題組在借鑒前人的基礎(chǔ)上,開發(fā)了新的PNRSV的RT-PCR檢測方法,并對山東地區(qū)甜櫻桃常見病毒的發(fā)生情況進行調(diào)查檢測[13],其中PNRSV感染率為38%(此結(jié)果未發(fā)表)。

        1.2李矮縮病毒(Prunus dwarf virus,PDV)

        1936年由Thomas[20]首次報道,分布在歐洲、美洲、日本、澳大利亞和新西蘭等李屬果樹種植區(qū)。主要侵染歐洲甜櫻桃、洋李、桃、圓葉櫻桃(P.mahaleb)、櫻花(P. serrulata)、梨(Pyrus domestica)等植物。

        PDV可引起櫻桃黃花葉病、櫻桃褪綠環(huán)斑病,與PNRSV侵染植物的癥狀相似,葉片細長畸形、產(chǎn)生褪綠壞死環(huán)斑、黃化花葉等癥狀。PDV與PNRSV

        2種病毒常常造成復(fù)合侵染,從而造成更嚴重的危害。PDV主要通過嫁接、種子、花粉傳播[1]。

        PDV為雀麥花葉病毒科等軸不穩(wěn)環(huán)斑病毒屬成員。球狀病毒粒子,直徑約為22 nm[21]?;蚪M有3條正義ssRNA,RNA1和RNA2編碼病毒轉(zhuǎn)錄和復(fù)制的蛋白,RNA3編碼MP和CP蛋白,CP蛋白由RNA4表達,RNA4和RNA3一起被包裹。

        PDV在全世界普遍發(fā)生,為中國入境檢疫危險性有害生物。在國內(nèi),1996年李青等[5]首次報道甜櫻桃感染有PDV。2000年侯義龍[17]應(yīng)用RT-PCR方法在國內(nèi)建立起PDV的分子生物學(xué)檢測體系,2005年在北京、大連地區(qū)的桃、櫻桃及櫻桃組培苗中檢測到PNRSV、PDV[22,23]。2009年趙世恒等[24]再次從北京懷柔地區(qū)檢測到PDV。2011年宗曉娟等[25]建立了新的PDV的RT-PCR檢測方法,在山東地區(qū)甜櫻桃果園中檢測到甜櫻桃的PDV感病植株。

        1.3蘋果褪綠葉斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)

        在中國ACLSV發(fā)生普遍,對蘋果、甜櫻桃等造成嚴重影響,感染病毒后會使其生長量減少16%~36%,產(chǎn)量降低16%~60%,極大地危害果品產(chǎn)量和質(zhì)量。ACLSV可以單獨感染,也可以與其他病毒復(fù)合感染果樹,引起果樹衰退病,苗木及嫁接的根、新梢、葉、花、果均表現(xiàn)出癥狀。例如,ACLSV可以和PNRSV協(xié)同侵染,會造成櫻桃壞死線紋病,染病葉片上出現(xiàn)呈帶狀的褪綠斑最終壞死。ACLSV可以經(jīng)機械傳播、嫁接傳播或通過無性繁殖材料傳播,也可通過種子傳播[1]。

        ACLSV為纖毛病毒屬(Trichovirus)重要成員之一,其病毒粒體呈彎曲的線狀,病毒粒子為螺旋對稱結(jié)構(gòu),長約720 nm,直徑約12 nm,病毒為線形正義ssRNA,長約7 555 nt。單分體基因組RNA含有3個部分重疊的開放讀碼框(ORFs),最大的ORF編碼復(fù)制酶(216.5 kDa),其余2個可能編碼移動蛋白(50.4 kDa)和外殼蛋白(21.4 kDa)[26,27]。

        洪霓等[28]利用蘋果分離株制備的ACLSV抗血清對田間果樹樣品進行檢測,結(jié)果成功檢測出桃樹和梨樹上的ACLSV。早期阮小鳳等[6]利用ELISA法對陜西甜櫻桃病毒病發(fā)生情況進行調(diào)查,發(fā)現(xiàn)PNRSV、PDV、ACLSV發(fā)生率較高,李春敏等[29]對昌黎甜櫻桃上的蘋果褪綠葉斑病毒進行PAS-ELISA檢測, 14株甜櫻桃樹上蘋果褪綠葉斑病毒感染率為47.1%。2000年侯義龍[17]建立了包括ACLSV在內(nèi)的主要果樹病毒的RT-PCR檢測體系,并對其進行了系統(tǒng)研究。

        1.4櫻桃銼葉病毒(Cherry rasp leaf virus,CRLV)

        Bodine等[30]首次在野生櫻桃上發(fā)現(xiàn)該病毒。櫻桃銼葉病的癥狀是多樣性的,正常葉的葉面為左右對稱,葉片呈橢圓形,病葉表現(xiàn)明顯的葉緣皺縮,嚴重的缺刻現(xiàn)象,形狀變得極不規(guī)則。在田間條件下,侵染還會誘發(fā)其他癥狀,包括:小葉、節(jié)間斷縮、失綠黃化、葉脈白化、果實小、葉片背面突起等。對中國櫻桃實生砧的5年生甜櫻桃的衰弱癥狀檢查發(fā)現(xiàn),枝條韌皮部和形成層發(fā)生褐變,短枝很快枯死,大枝逐步死亡,最后整株枯死[7]。CRLV自然寄主有歐洲甜櫻桃、圓葉櫻桃和蘋果等,觀賞性櫻花可作為銼葉病毒的中間寄主,在甜櫻桃栽培區(qū)不宜種植。主要通過線蟲傳播(Xiphinema americana),也可經(jīng)嫁接、花粉、昆蟲和螨類傳播,包括葉螨、葉蟬等[31,32]。

        CRLV屬于豇豆花葉病毒科線蟲多面體病毒屬(Comviridae nepovrius)。病毒粒子二十面體,呈等軸對稱結(jié)構(gòu),直徑約30 nm。二分體基因組,RNA1長6 992 nt,RNA2長3 274 nt[32]。2002年譚海東等[7]通過電鏡觀察和紫外分光光度計的檢測方法,首次報道了櫻桃銼葉病在中國的發(fā)生情況,并提純到該病毒。

        1.5櫻桃病毒A(Cherry virus A,CVA)

        CVA是1995年由Jelkmann[33]在克隆LChV的cDNA?xí)r意外發(fā)現(xiàn)的,會與LChV復(fù)合發(fā)生,但并不影響LChV的癥狀的表達[34]。CVA最初僅在英國發(fā)生,后來陸續(xù)傳播到德國、加拿大和波蘭等地[35]。CVA主要侵染歐洲甜櫻桃、酸櫻桃和杏等李屬植物。CVA作為一種典型的潛隱性病毒,寄主無明顯癥狀,可通過嫁接傳播。

        CVA屬于發(fā)形病毒屬(Capillovirus),病毒呈彎曲線狀,長640~700 nm。基因組RNA含有2個開放性閱讀框(ORFs),其中ORF1編碼包含著復(fù)制酶蛋白的多聚蛋白,約為266 kDa。ORF2可能編碼病毒的運動蛋白,約為52 kDa[1]。

        2009年在云南昆明的甜櫻桃樣品上檢測發(fā)現(xiàn)到CVA[8],這是該病毒在中國甜櫻桃上的首次報道。2010年在北京等地的甜櫻桃果樹上也發(fā)現(xiàn)CVA的存在[36],發(fā)生較為普遍。2011年本課題組在山東地區(qū)病毒病的調(diào)查中,發(fā)現(xiàn)CVA感染率約為60%(此結(jié)果未發(fā)表)。

        1.6櫻桃小果病毒(Little cherry virus,LChV)

        櫻桃小果病嚴重危害歐洲甜櫻桃和酸櫻桃,發(fā)生普遍,最初發(fā)現(xiàn)于加拿大英屬哥倫比亞東部[37],在歐洲大部分地區(qū)和北美均有相關(guān)病例報道。2004年波蘭首次報道發(fā)現(xiàn)了LChV-1[35]。

        LChV引起櫻桃小果病癥狀復(fù)雜多變,表現(xiàn)程度常依季節(jié)、地區(qū)和果園的不同有很大的差異。典型癥狀有葉片邊緣輕微卷曲,發(fā)病葉片在夏末和秋季變?yōu)榧t色或青銅色[37],侵染果實會使其不能完全成熟,著色不完全,產(chǎn)生斑點,果實小,畸形,收獲時只有正常果實的1/2 ~1/3大小。受影響的果實呈現(xiàn)暗紅色、三角狀,口味下降,果實成熟過晚,據(jù)報道更易侵害具有暗紅色果實的栽培品種 [38]。LChV通過汁液和昆蟲介體傳播,1986年在加拿大發(fā)現(xiàn)新的傳播介體為蘋果粉蚧(Phenacoccus aceris)[39]。

        櫻桃小果病主要與2個分離物LChV-1、LChV-2有關(guān),都為長線形病毒科(Closteroviridae)長線形病毒屬(Closteriovirus),單分體基因組,病毒核酸為單分子線形正義ssRNA。病毒粒子呈彎曲的長線型,螺旋對稱結(jié)構(gòu),長1 250~2 000 nm,寬12 nm[40]。

        櫻桃小果病的病原研究進展很慢,直到1997年LChV的全序列被測出[40],對LChV 的研究才有了突破性的進展。2011年中國首次在云南昆明櫻花和甜櫻桃中發(fā)現(xiàn)LChV-2[10],這是LChV-2在中國的首次系統(tǒng)報道。中國至今未有LChV-1和LChV-2在甜櫻桃上共同侵染的報道。

        1.7櫻桃綠環(huán)斑駁病毒(Cherry green ring mottle virus,CGRMV)

        1937年在美國密歇根州的酸櫻桃上首次發(fā)現(xiàn)了CGRMV,可侵染幾種李屬植物,包括酸櫻桃、甜櫻桃、櫻花、桃、杏。該病毒在北美、歐洲、新西蘭、非洲和亞洲等地區(qū)分布極廣[41]。

        CGRMV屬于凹陷病毒屬(Foveavirus),是單分子線形正義ssRNA,無DNA階段,其基因組長8 372 nt,除3′端pol(A)尾巴外,含5個開放閱讀框架(ORFs)[41]。ORF1編碼依賴RNA的RNA聚合酶;ORF2是1個三基因框,編碼解旋酶;ORF3編碼衣殼蛋白;其余2個的作用還未確定[42]。Zagula等[43]分離出1個CGRMV墨西哥分離物,得知病毒粒子長約1 000~2 000 nm,直徑5~6 nm,有1個2.5×106 Da的ssRNA,25 kDa衣殼蛋白。

        CGRMV感染酸櫻桃導(dǎo)致葉片黃化、次脈周圍暗色斑駁等癥狀,但在甜櫻桃及其他李屬作物上為潛隱性病毒,侵染后通常無癥狀。Zhang等[42]從美國密歇根州的酸櫻桃中檢測到CGRMV;Isogai等[44]在日本甜櫻桃上報道了CGRMV;Komorowska[45]等從波蘭甜櫻桃、Sipahioglu等[46]從土耳其甜櫻桃中分離到病毒分離株;2011年我國首次利用RT-PCR檢測技術(shù)在甜櫻桃等李屬植物中發(fā)現(xiàn)了CGRMV[9]。

        2甜櫻桃病毒檢測技術(shù)

        2.1指示植物檢測法

        草本指示植物法:該方法一般采用汁液接種法。昆諾藜、煙草可作為李屬植物病毒常用指示植物[47]。中國利用黃瓜、南瓜和美麗豬屎豆作為草本指示植物,對PDV、PNRSV在不同指示植物上的癥狀表現(xiàn)進行了檢測和研究,并首次利用生物學(xué)方法檢測出PDV[48,49];木本指示植物法:目前國際上通過的用于田間鑒定的指示植物有5種[50],分別為山櫻桃的Shirofugen和Kwanzan,甜櫻桃的濱庫(Bing)、賽姆(Sam)、凱彌戴柯斯(Cannidex)。根據(jù)指示植物和所鑒定病毒對溫度的要求,在控制溫度的溫室條件下也可進行鑒定。常用的標準李屬指示植物有桃GF305、Elberta、山櫻桃Shirofugen[51]。

        2.2電子顯微鏡技術(shù)

        電子顯微鏡能直接觀察到病毒粒子的形態(tài)特征,可將病毒提純后對病毒粒體直接觀察。在電子顯微鏡檢測的基礎(chǔ)上,又發(fā)展起來的免疫吸附電鏡技術(shù)和膠體金免疫電鏡技術(shù),使病毒檢測的靈敏性和直觀性大幅度提高。但由于果樹病毒濃度低,分布不均勻,因此電鏡在果樹病毒檢測中應(yīng)用較少。

        2.3酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)

        目前,在植物病毒的檢測上應(yīng)用最廣泛的檢測方法是酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。此方法通過抗原—抗體的特異性識別反應(yīng)來進行檢測。最早ELISA為直接雙抗體夾心法(DAS-ELISA)。應(yīng)用該技術(shù)已成功檢測出ACLSV[5]、PNRSV[5,6]、PDV[6]。后來又出現(xiàn)了A蛋白夾心-ELISA法(PAS-ELISA)[52]和間接雙抗體夾心法[50],其準確率比DAS-ELISA 高。雖然酶聯(lián)免疫吸附法精確度較高,但有一定的局限性。例如,在某些情況下有的病毒缺乏外殼蛋白,而類病毒則沒有外殼蛋白,無法運用酶聯(lián)免疫法檢測;受病毒系統(tǒng)和復(fù)合侵染的木本植物,無法完成純化病毒和制備抗血清;寄主植物中低濃度的病毒也無法檢測。

        2.4分子生物學(xué)技術(shù)

        分子生物學(xué)技術(shù)是通過檢測病毒核酸(DNA、RNA)來證實病毒的存在。此技術(shù)比ELISA靈敏度高,特異性強、快速,可用于大量樣品的檢測,適應(yīng)范圍廣,其應(yīng)用對象為RNA病毒、DNA病毒及類病毒。目前,常用的分子生物學(xué)技術(shù)主要包括核酸分子雜交技術(shù)、多聚酶鏈式反應(yīng)技術(shù)(PCR)、雙鏈RNA電泳技術(shù)(dsRNA)等。國外許多學(xué)者采用PCR技術(shù)檢測果樹病毒,并取得了很好的效果。新發(fā)展的RT-PCR技術(shù)是以PCR技術(shù)為基礎(chǔ)衍生出的病毒檢測方法,可以檢測fg(10-15)數(shù)量級的植物病毒及大規(guī)模的樣品[8-10,17-19]。近年來,在RT-PCR基礎(chǔ)上又發(fā)展了IC-RT-PCR和多重IC-RT-PCR,實時熒光定量PCR等,目前應(yīng)用較多的是RT-PCR檢測技術(shù)。2000年侯義龍[17]應(yīng)用RT-PCR 技術(shù)檢測出ACLSV、PNRSV、ASGV及ASPV 4種病毒,同時調(diào)查發(fā)現(xiàn)8年生甜櫻桃品種巨紅ACLSV感染率高達88%,PNRSV感染率為76%。實時熒光定量PCR技術(shù)也將進一步用于果樹病毒的研究中。分子生物學(xué)技術(shù)在病毒檢測上的應(yīng)用將會有更廣闊的前景。

        3存在的問題與展望

        1)在當今技術(shù)水平下,對于甜櫻桃病毒病的防治尚無有效的化學(xué)藥劑,建立快速有效的檢測方法,加強病毒檢疫檢驗是防治病毒病的惟一途徑。目前分子生物學(xué)方法特別是核酸分子雜交技術(shù)、雙鏈RNA(dsRNA)電泳技術(shù)、聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)的發(fā)展和應(yīng)用極大地推動了甜櫻桃病毒病的檢測和研究。近年來,在PCR基礎(chǔ)上又出現(xiàn)了免疫捕捉PCR(IC-PCR)技術(shù)、實時熒光PCR(Real-time PCR)技術(shù)等,快速、精確的檢測技術(shù)有待進一步發(fā)展與應(yīng)用于中國甜櫻桃產(chǎn)業(yè)中。

        2)目前國際上已確定的櫻桃病毒病有34種,而中國有報道的侵染甜櫻桃的病毒僅有7種,中國對甜櫻桃病毒病病原的研究還不夠全面。有必要對中國的甜櫻桃病毒病的株系種類、分布和危害進行詳細的調(diào)查。明確中國甜櫻桃病毒病的種類、發(fā)生和分布情況,進一步為田間甜櫻桃病毒病的檢測和防治提供依據(jù)。

        3)近幾年隨著甜櫻桃苗木引種和調(diào)運,甜櫻桃新病毒病隨著苗木傳入國內(nèi),并在國內(nèi)各地區(qū)逐漸發(fā)生,凸顯了苗木病毒檢疫存在的問題。應(yīng)該加大苗木進出口檢疫監(jiān)管力度,加強苗木國內(nèi)調(diào)運檢測檢驗工作,嚴格控制有害病毒廣泛傳播。

        4)加強果樹脫毒與無病毒苗木繁殖,建立無病毒苗木良種繁育體系,是保證甜櫻桃產(chǎn)量和提高品質(zhì)的基本措施。

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        收稿日期:2012-02-03

        基金項目:農(nóng)業(yè)部“948”項目(2011-Z40);國家公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(200903019);山東省農(nóng)業(yè)良種工程[魯農(nóng)良種字(2010)6號]

        作者簡介:王文文(1986-),女,山東濟寧人,在讀碩士研究生,研究方向為園藝植物病理學(xué),(電話)15954762581(電子信箱)wangwenwenB@126.com;

        通訊作者,嚴雪瑞,副教授,博士,主要從事小漿果病蟲害研究,(電子信箱)zbyxr@126.com;劉慶忠,研究員,主要從事果樹生物技術(shù)

        與資源育種研究,(電子信箱)qzliu@sdip.cn。

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