張袁媛

摘 要:培養(yǎng)基是微生物檢驗中不可或缺的關(guān)鍵部分,培養(yǎng)基質(zhì)量的優(yōu)劣直接影響整個微生物檢驗的質(zhì)量。現(xiàn)階段,由于我國在微生物檢驗培養(yǎng)基的質(zhì)量方面還沒有形成一個較為統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn),這在一定程度上影響了檢驗結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。為此,必須采取有效的措施提高培養(yǎng)基的質(zhì)量,進(jìn)而確保微生物檢測質(zhì)量。基于此點,本文就提高微生物檢驗培養(yǎng)基質(zhì)量的相關(guān)研究進(jìn)行淺談。

關(guān)鍵詞:微生物檢驗培養(yǎng)基質(zhì)量配制

中圖分類號:TS207.4 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:1674-098X(2012)07(c)-0001-01

1 提高檢驗人員綜合素質(zhì)

微生物檢驗培養(yǎng)基質(zhì)量與檢驗人員的素質(zhì)息息相關(guān),并對其素質(zhì)提出了高要求。首先,檢驗人員必須接受過微生物檢驗方面的專業(yè)基礎(chǔ)教育,具備全面的理論知識和實踐技能,擁有較強的主觀判斷分析能力,在崗前培訓(xùn)合格的基礎(chǔ)上方可上崗操作;其次,檢驗人員應(yīng)當(dāng)定期參加培訓(xùn)、進(jìn)修學(xué)習(xí)、學(xué)術(shù)交流等活動,積極學(xué)習(xí)質(zhì)量保證體系、計量學(xué)等與微生物檢驗相關(guān)的學(xué)科領(lǐng)域知識,不斷更新自身的知識體系。檢驗人員還應(yīng)當(dāng)掌握國家最新的微生物檢驗方法和標(biāo)準(zhǔn),參與編制檢測程序和儀器操作程序,參與各類盲樣測試和水平測試,增強實驗室的檢測能力,以滿足微生物檢測對檢驗人員提出的高要求;再次,應(yīng)強化實驗室內(nèi)部管理,落實定期考核制度,實驗室主管人員應(yīng)對檢驗人員的知識水平、檢驗技能和標(biāo)準(zhǔn)熟練程度進(jìn)行全面考核,結(jié)合檢驗人員的工作態(tài)度和工作責(zé)任感考評,將其作為評價檢驗人員綜合素質(zhì)的重要依據(jù)。

2 嚴(yán)把培養(yǎng)基的購入關(guān)和驗收關(guān)

在培養(yǎng)基的購入階段,應(yīng)確保微生物檢驗中所使用的干粉培養(yǎng)基、試劑和藥物等,必須優(yōu)選專業(yè)、誠信、服務(wù)優(yōu)質(zhì)的生產(chǎn)廠家作為供應(yīng)商。在確認(rèn)該生產(chǎn)廠家通過了質(zhì)量管理體系認(rèn)證的基礎(chǔ)上購入培養(yǎng)基,認(rèn)真檢測商品質(zhì)量,使其符合國家規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。此外,培養(yǎng)基還應(yīng)當(dāng)具備齊全的信息資料,如培養(yǎng)基的生產(chǎn)編號、具體名稱、成分清單、儲存條件、使用前的pH值、有效期等,以便于使用培養(yǎng)基時能夠準(zhǔn)確記錄數(shù)據(jù)、比較分析數(shù)據(jù);在培養(yǎng)基的驗收階段,實驗室應(yīng)當(dāng)配備專人檢驗商品質(zhì)量,認(rèn)真核對生產(chǎn)廠家的相關(guān)商品資料信息,查看培養(yǎng)基的規(guī)格數(shù)量、生產(chǎn)批號、商品名稱、保質(zhì)期、外觀質(zhì)感是否在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)。檢驗驗收人員必須對每一批次的商品均進(jìn)行嚴(yán)格的培養(yǎng)基質(zhì)量檢測工作,嚴(yán)禁未經(jīng)驗收合格的培養(yǎng)基進(jìn)入實驗室中使用。

3 提高培養(yǎng)基的配制質(zhì)量

在進(jìn)行培養(yǎng)基配制的過程中,為了有效地提高培養(yǎng)基的質(zhì)量,應(yīng)采取如下措施:其一,必須使用清潔、干凈的玻璃容器作為培養(yǎng)基配制容器,嚴(yán)禁使用金屬類容器,并確保玻璃容器的體積應(yīng)大于復(fù)水后培養(yǎng)基體積的2倍以上。在培養(yǎng)基水化時為了防止離子混入培養(yǎng)基中,應(yīng)當(dāng)杜絕使用鐵鍋或銅鍋,以確保微生物正常生長。同時,若使用新玻璃瓶,應(yīng)防止其在加熱的過程中產(chǎn)生堿性物質(zhì),從而導(dǎo)致培養(yǎng)基的pH值變化;其二,培養(yǎng)基的配制用水應(yīng)盡可能選擇蒸餾水或是符合要求的水,這樣有助于排除測試條件下影響及抑制微生物生長的物質(zhì)。嚴(yán)禁使用受污染的去離子水和自來水,其原因在于即使去離子水經(jīng)過除菌過濾,也必然含有影響微生物生長的物質(zhì),而自來水中含有抗菌物質(zhì),如氯等。在進(jìn)行培養(yǎng)基水化時,應(yīng)當(dāng)在玻璃容器中逐漸加入1/3的水量,經(jīng)過震搖后,繼續(xù)加入剩余水量,利用水的沖力將附著于玻璃容器壁的培養(yǎng)基粉沖入水中;其三,培養(yǎng)基稱重時必須使用專用角匙,以防止因交叉污染而造成檢驗結(jié)果不準(zhǔn)確。由于培養(yǎng)基具有易潮性,在吸潮后會導(dǎo)致其自身酸化,從而對培養(yǎng)基的pH值產(chǎn)生影響,所以應(yīng)選擇在濕度較低的實驗室取培養(yǎng)基進(jìn)行稱重。稱重時切忌不能吸入粉末,尤其是選擇性培養(yǎng)基,干粉培養(yǎng)基必須遵循生產(chǎn)廠家的說明資料進(jìn)行準(zhǔn)確配置;其四,當(dāng)培養(yǎng)基完全溶解冷卻之后,應(yīng)當(dāng)對其進(jìn)行pH值測定,如有必要時可做適當(dāng)調(diào)整。通常情況下,使用個別成分制備而成的培養(yǎng)基,除有特殊要求外,培養(yǎng)基經(jīng)過滅菌處理以后并冷卻至25℃時,其pH值的變化范圍不允許超過0.2個單位。在進(jìn)行調(diào)整時,可采用濃度為40g/L的氫氧化鈉溶液或濃度為36.5g/L的鹽酸溶液;其五,如果對試驗結(jié)果有所懷疑時,那么可以在相同的條件下,對新舊批號的培養(yǎng)基進(jìn)行同時試驗比對,以此來找出原因;其六,對于一些生化鑒定中常用的培養(yǎng)基以及用于選擇性鑒定的培養(yǎng)基,必須嚴(yán)格遵照規(guī)定的方法進(jìn)行配制,以確保培養(yǎng)基質(zhì)量符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求。同時,在培養(yǎng)基配置完成后,應(yīng)對其外觀進(jìn)行檢查,看培養(yǎng)基的顏色是否正常,若是液體培養(yǎng)基應(yīng)檢查其是否澄清,有無沉淀及渾濁。

4 做好培養(yǎng)基的滅菌和保存

培養(yǎng)基在配制完成后,必須嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求的溫度和時間對其進(jìn)行滅菌處理,應(yīng)盡可能做到既確保滅菌效果又不損傷培養(yǎng)基的有效成分。需要注意的是,采用的滅菌程序應(yīng)經(jīng)過嚴(yán)格的化學(xué)及生物驗證。培養(yǎng)基在經(jīng)過滅菌處理以后,斜面固體類的培養(yǎng)基應(yīng)當(dāng)擺放成斜面,其長度應(yīng)控制在試管長度的1/2處左右;如果配制的是半固體狀培養(yǎng)基,那么應(yīng)使其垂直并冷凝成半固體狀的深層瓊脂,當(dāng)培養(yǎng)基完全凝固以后,應(yīng)在試管上注明培養(yǎng)基的配制日期及名稱,然后將其放置在避光、干燥及冷藏處進(jìn)行保存待用。除有標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定及特殊要求外,一般的基礎(chǔ)營養(yǎng)培養(yǎng)基可存放在4℃的冰箱內(nèi),保存的最長期限不得超過90天,若是在溫度為20℃以下的室內(nèi),最長保存期限不得超過30天,這樣能夠確保培養(yǎng)基的成分不發(fā)生改變。此外,對于生化鑒定及選擇性分離鑒定這兩種培養(yǎng)基,必須嚴(yán)格遵照產(chǎn)品說明進(jìn)行使用,如無特殊情況,應(yīng)盡量當(dāng)天配制當(dāng)天使用,在避光、冷藏處最長保存時間不得超過3天。

5 結(jié)語

總而言之,微生物檢驗是一項較為復(fù)雜且系統(tǒng)的工作,影響檢驗結(jié)果的因素相對較多,其中培養(yǎng)基的質(zhì)量所占的比重最大。為了能夠進(jìn)一步提高微生物的檢驗質(zhì)量,要求檢驗人員應(yīng)采取積極有效地措施,不斷提高培養(yǎng)基的整體質(zhì)量。只有這樣,才能真正確保微生物檢測結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。

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