李夏林 覃曉

納他霉素（Natamycin）又稱游鏈霉素（Pimaricin），是一種多烯烴大環(huán)內酯類抗生素，能有效抑制霉菌和酵母菌的生長，阻止絲狀真菌中黃曲霉毒素的形成。1996年我國食品添加劑委員會對納他霉素進行評價并建議批準使用，現(xiàn)已列入食品添加劑使用標準。根據(jù)我國《食品添加劑使用標準》的規(guī)定，果蔬汁（漿）中納他霉素的最大使用量為0.3g/kg。本文參照《食品中納他霉素的測定 液相色譜法》，對果汁飲料中納他霉素的測定進行了方法學考察，以供相關檢測人員參考。

SHIMADZU LC-20A全自動液相色譜儀（島津制作所），METTLER XS105DU電子分析天平(梅特勒-托利多儀器上海有限公司)，KQ-500DE型數(shù)控超聲清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；納他霉素對照品（批號：00105、含量：89.0%，以無水物計97.0%、德國Dr、上海安普科學儀器有限公司）；統(tǒng)一鮮橙多（批號：2011-10-17，廣州統(tǒng)一企業(yè)有限公司）；甲醇為色譜純；冰乙酸為優(yōu)級純。備溶液，備用。

（2）樣品溶液的制備：精密量取鮮橙多供試樣10mL,置50mL錐形瓶中，加入甲醇30mL,超聲提取30min，提取液依次過0.45μm和0.22μm的濾膜，取濾液備用。

3.方法的專屬性

取溶劑甲醇、樣品溶液、加標樣品溶液與對照品溶液，按上述色譜條件，分別依法注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結果：溶劑甲醇對納他霉素測定無干擾，樣品未檢出納他霉素，

其內源性物質對納他霉素測定無干擾，加標樣品與對照品在

相同時間位置上檢出納他霉素峰（見圖1）。

4.校準曲線和檢出限、定量限

取2（1）項的標準儲備液，甲醇分別稀釋制成納他霉素質量濃度為10μg/mL、5μg/mL、2μg/mL、1μg/mL、0.5μg/mL、0.25μg/mL的系列標準溶液，各取10μL，按上述色譜條件，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積為縱坐標（Y），與其對應的濃度為橫坐標（X）繪制校準曲線，計算回歸方程為：Y=58962X-5640，相關系數(shù)r=0.99998。顯示納他霉素的質量濃度在0.25～10μg/mL范圍內具有良好的線性關系。在此色譜條件下，分別以信噪比（S/N）為3∶1時，相應的最低檢出濃度0.1515μg/mL為方法檢出限。以信噪比（S/N）為10∶1時，相應的最低檢出濃度0.5051μg/mL為方法定量限。5.回收率和精密度

分別取統(tǒng)一鮮橙多樣品10mL置50mL錐形瓶中，各加入3個濃度水平的納他霉素對照品溶液（每個濃度做3個平行樣，每個樣注樣2次），按照2（2）項的方法處理后，在上述色譜條件下，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，根據(jù)測定成分的峰面積，代入回歸方程計算納他霉素的含量和回收率，結果見表1。

從表1可看出，該方法的平均回收率為97.3%～107.0%，相對標準差（RSD）（n=6）為0.4%～1.0%，其準確性和精密度均能滿足方法確認的技術要求。

6.樣品測定

取統(tǒng)一鮮橙多平行樣2份，按2（2）方法處理后，分別取濾液 10μL按2.1項下色譜條件，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。根據(jù)測定成分的峰面積，代入回歸方程計算納他霉素的含量。結果樣品色譜圖在與對照品色譜圖相應的位置上均無峰出現(xiàn)，即在該實驗條件下未檢出納他霉素。