潘佳秋，姜飛飛，劉 靜

有研究者指出脂代謝異常是2型糖尿病 (T2DM)的原發(fā)性病理生理事件，常先于T2DM發(fā)生數(shù)年前就存在，且在T2DM發(fā)生、發(fā)展中起著主導(dǎo)作用，會影響機體能量的平衡，進而引發(fā)肥胖和胰島素抵抗。2004年Zimmermann等［1］報道了一種新的脂肪酶，命名為脂肪甘油三酯脂酶 (adipose trigl-gceride lipase，ATGL)［2］。ATGL是脂肪組織中參與脂肪分解的酶，有研究表明它在啟動脂肪細胞脂肪動員過程中起重要作用。抵抗素 (resistin)是新近發(fā)現(xiàn)的一種脂肪細胞分泌的多肽類激素，具有升高血糖、抗胰島素的作用。鑒于目前有關(guān)兩種脂肪因子之間的相互關(guān)系及其在T2DM患者胰島素抵抗發(fā)生中的作用研究不多，本研究對此進行初步探討。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2009年10月—2010年6月佳木斯大學(xué)第一附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科初診T2DM患者55例 (T2DM組)，其中男28例，女27例;平均年齡 (51.5±13.3)歲;平均病程3個月。病例入選標準為:(1)符合1999年世界衛(wèi)生組織(WHO)糖尿病診斷標準;(2)起病年齡＞25歲;(3)入組前均未使用任何降糖及降脂藥物治療，從入組到隨訪結(jié)束無嚴重急性感染及糖尿病急性并發(fā)癥。排除:使用地塞米松治療、急性肺炎、肺膿腫、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等影響ATGL、抵抗素水平測定的因素。另選取同期在我院健康體檢者30例為正常對照組，其中男16例，女14例;平均年齡 (46.9±14.3)歲。

1.2 方法

1.2.1 臨床資料收集 所有受檢者禁食10 h后于次日清晨空腹采集肘靜脈血5 ml，離心分離血清，測定血糖、血脂、胰島素等。另取一份血離心后存入－40℃冰箱用于血清ATGL、抵抗素水平的測定。同時測量身高、體質(zhì)量，計算體質(zhì)指數(shù)(BMI)。

1.2.2 檢測方法 空腹血糖 (FPG)、血脂等用酶法在日本OLYMPUS公司Au－2700全自動生化分析儀上進行檢測。用電化學(xué)發(fā)光免疫法測定血清空腹胰島素 (FINS)，試劑盒購自德國羅氏公司，批內(nèi) CV＜2.0%，批間 CV＜2.5%。采用ELISA法測定血清ATGL、抵抗素水平，人類抵抗素試劑盒為美國adipobioscience公司生產(chǎn)，均由北京愛迪博生物科技有限公司提供，批內(nèi)CV＜4%，批間CV＜8%。胰島素抵抗指數(shù)(HOMA－IR)計算公式:HOMA－IR=FPG×FINS/22.5;胰島素敏感性指數(shù) (ISI) =1/〔log(I。) +log(G。)〕，G。為FPG，I。為FINS;公式中FPG單位均為mmol/L，F(xiàn)INS單位均為mU/L。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計分析軟件對結(jié)果進行處理。正態(tài)分布的計量資料以表示;ATGL為偏態(tài)分布，進行自然對數(shù)轉(zhuǎn)換后再進行統(tǒng)計學(xué)分析。兩組均數(shù)間的比較采用t檢驗。單因素相關(guān)分析采用Pearson相關(guān)分析。指標間的關(guān)系判定采用多元線性逐步回歸分析。p＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 觀察指標比較 T2DM組患者總膽固醇 (TC)、低密度脂蛋白 (LDL)、FINS水平與正常對照組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義 (P＞0.05);而兩組受檢者BMI、三酰甘油 (TG)、高密度脂蛋白 (HDL)、ATGL、FPG、HOMA－IR、抵抗素、ISI比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (p＜0.05，見表1)。

2.2 ATGL、抵抗素與各觀察指標的Pearson相關(guān)分析 結(jié)果顯示，ATGL與 ISI呈正相關(guān) (p＜0.01)，而與 FPG、BMI、HOMA－IR、抵抗素呈負相關(guān) (p＜0.05);血清抵抗素與FPG、BMI、HOMA－IR呈正相關(guān) (p＜0.05)，而與ISI呈負相關(guān) (p＜0.01，見表2)。

表1 T2DM組與正常對照組觀察指標比較Table 1 Comparison of clinical data between the T2DM and NC groups

表1 T2DM組與正常對照組觀察指標比較Table 1 Comparison of clinical data between the T2DM and NC groups

注:BMI=體質(zhì)指數(shù)，TG=三酰甘油，TC=總膽固醇，HDL=高密度脂蛋白，LDL=低密度脂蛋白，ATGL=脂肪甘油三酯脂酶，F(xiàn)PG=空腹血糖，F(xiàn)INS=空腹胰島素，HOMA－IR=胰島素抵抗指數(shù)，ISI=胰島素敏感性指數(shù)

組別 例數(shù) BMI(kg/m2) TG(mmol/L) TC(mmol/L) HDL(mmol/L) LDL(mmol/L)T2DM組 55 25.0±3.1 23.52±10.60 5.91±2.23 1.47±0.94 3.03±1.02正常對照組 30 20.8±1.2 21.22± 0.42 4.87±1.23 1.22±0.19 2.98±0.95 t 值6.799 3.801 2.743 1.922 0.232 P值 0.000 0.000 0.607 0.040 0.817組別 ATGL(μg/L) FPG(mmol/L) FINS(mU/L) HOMA－IR 抵抗素 (μg/L) ISI T2DM組 23.59±3.94 12.59±4.23 11.42±6.89 5.52±2.54 8.97±5.73 0.49±0.05正常對照組 31.20±2.05 5.66±2.40 4.14±2.04 1.01±0.87 7.41±1.88 0.78±0.11 t 值 －11.70 9.637 7.372 11.735 13.7±5.4 0.537 P值0.000 0.000 0.463 0.000 0.000 0.000

表2 ATGL及抵抗素與其他因素的Pearson相關(guān)分析Table 2 Single－factor correlation analysis of ATGL，resistin and other factors

2.3 ATGL和抵抗素與觀察指標的多元回歸分析 分別以ATGL和抵抗素為因變量，以 BMI、TG、TC、FPG、HDL、FINS、HOMA－IR為自變量，進行多元逐步回歸分析。結(jié)果顯示，HOMA－IR和ISI最后進入回歸方程 (r值分別為2.85和－2.85，P均＜0.05)，常數(shù)項為零。

3 討論

胰島素抵抗是多種疾病的共同發(fā)病基礎(chǔ)，如T2DM、肥胖癥、高血壓、冠心病等，它們既各自獨立又相互聯(lián)系，這個內(nèi)在的聯(lián)系就是胰島素抵抗及其所致糖、脂代謝紊亂［3］。本研究結(jié)果顯示:T2DM患者血清ATGL水平較健康者顯著降低，而血清抵抗素水平則較健康者顯著升高。同時發(fā)現(xiàn)T2DM患者BMI、HOMA－IR較健康者顯著升高，ISI較健康者顯著下降。ATGL的主要作用是水解TG成甘油二酯和游離脂肪酸(FFA)，是脂肪代謝的關(guān)鍵酶，且胰島素作為脂解作用的主要抑制劑，在近年來ATGL的研究中也越來越受到關(guān)注。抵抗素是一種由脂肪細胞和巨噬細胞分泌的多肽類激素，最近Pagano等［4］證實了人脂肪細胞中抵抗素表達的存在。動物研究表明:胰島素下調(diào)ATGL在3T3－L1細胞中的表達，在糖尿?。逝帜Ｐ托∈?(ob/ob和db/db)中ATGL的表達下降了50%，提示在胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下ATGL的表達降低［5］;而在肥胖狀態(tài)下，脂肪組織中的抵抗素表達增加。

關(guān)于抵抗素與肥胖的關(guān)系，Kim等［6］發(fā)現(xiàn)抵抗素可以抑制前體脂肪細胞系3T3－L1向成熟脂肪細胞的分化，在無抵抗素的培養(yǎng)基中3T3－L1可以分化為含有大量脂肪的成熟脂肪細胞，在加入抵抗素的培養(yǎng)基中前體脂肪細胞并未出現(xiàn)廣泛的脂肪轉(zhuǎn)化，同時這些脂肪細胞標志物的表達，如過氧化物酶體增殖物激活受體、脂肪酸合成酶等比無抵抗素的對照組低80%。而本研究選取的是初診T2DM患者，從BMI上看，大多數(shù)患者存在肥胖。本研究結(jié)果顯示:T2DM患者血清ATGL水平與抵抗素呈負相關(guān)，分析其原因可能為T2DM患者出現(xiàn)高TG血癥的同時常伴有 FFA 水平的增高［7］，Palanivel等［8］證實抵抗素可降低脂肪酸的攝取和骨骼肌的代謝，尤其是通過一磷酸腺苷 (AMP)活性蛋白酶的靶向作用。抵抗素在肝臟和骨骼肌中通過減低胰島素功能而影響葡萄糖代謝。本研究結(jié)果顯示:血清ATGL、抵抗素的水平變化可能與改善胰島素抵抗有關(guān)。胰島素抵抗時會影響胰島素信號傳遞系統(tǒng)，從而還會使肝糖代謝異常，導(dǎo)致FFA升高。有研究指出，肥胖人群胰島素抵抗和高胰島素血癥的程度，成為獨立影響ATGL蛋白和mRNA表達水平的因素［9］。人抵抗素作用于肝臟，減弱胰島素的肝糖輸出作用;作用于骨骼肌，降低葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4的活性;作用于脂肪細胞，調(diào)節(jié)脂肪細胞的分化、增殖和能量代謝。抵抗素的生物學(xué)作用主要是對抗胰島素的作用，引起胰島素抵抗。這也進一步提示ATGL、抵抗素在胰島素抵抗的形成中具有重要作用，且在以胰島素抵抗為基礎(chǔ)的糖尿病、代謝綜合征等的發(fā)生、發(fā)展中有重要影響。

總之，本研究初步揭示ATGL、抵抗素可能在胰島素抵抗和糖尿病的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮著一定作用。但ATGL的確切生理功能并不十分清楚，值得進一步研究。

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2 Villena JA，Roy S，Sarkadi－ Nagy E，et al.Desnutrin，an adipocyte gene encoding a novel patatin domain－containing protein，is induced by fasting and glucocorticoids:ectopic expression of desnutrin increases triglyceride hydrolysis［J］ .J Biol Chem，2004，279(45):47066 －47075.

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6 Kim KH，Lee K，Moon YS，et al.A cysteine－rich adipose tissuespecific secretory factor inhibits adipocyte differentiation ［J］ .J Biol Chem，2001，276(14):11252－11256.

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8 Palanivel R，Sweeney G.Regulation of fatty acid uptake and metabolism in L6 skeletal muscle cells by resistin ［J］ .FEBS Lett，2005，579(22):5049－5054.

9 Villena JA，Roy S，Sarkadi－ Nagy E，et al.Desnutrin，an adipocyte gene encoding a novel patatin domain－containing protein，is induced by fasting and glucocorticoids:ectopic expression of desnutrin increases triglyceride hydrolysis［J］ .J Biol Chem，2004，279(45):47066 －47075.