劉麗芳,竇逾常,于紅霞

(1.長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院 神經(jīng)內(nèi)科，吉林 長春 130021；2.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 中醫(yī)科，吉林 長春 130033；3.空軍航空大學(xué)門診部，吉林 長春 130000)

傳統(tǒng)的脂質(zhì)浸潤學(xué)說和損傷反應(yīng)學(xué)說認為動脈粥樣硬化的形成與高血壓、高血脂、糖尿病和吸煙等因素相關(guān)，并且是缺血性腦卒中發(fā)病的主要病因。我們發(fā)現(xiàn)Hp感染與缺血性腦卒中有一定的相關(guān)性[1]，Hp感染及相關(guān)基因是否參與了不同證型頸動脈粥樣硬化的形成尚未清楚，為此本文對此進行研究，為動脈粥樣硬化的防治提供科學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 治療組103例均為2009年2月-2011年8月長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的缺血性腦卒中合并頸動脈粥樣硬化患者，男65例，女38例，年齡54～78，平均年齡(63.3±10.1)歲，均為48 h之內(nèi)發(fā)病患者。對照組為同期年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)、居住環(huán)境和生活習(xí)慣的頻數(shù)相匹的健康體檢合并頸動脈粥樣硬化者136例，男85例，女51例，年齡52～79，平均年齡(62.5±11.4)歲。觀察對象4周內(nèi)均未接受過抗生素治療。

診斷標準符合國家中醫(yī)藥管理局制定的《中風(fēng)病診斷療效評定標準》(試行)和中華醫(yī)學(xué)會修訂的《各類腦血管疾病診斷要點》。頸動脈內(nèi)膜中層厚度(IMT)的檢測結(jié)果作為頸動脈粥樣硬化的判定標準，采用飛利浦IU-22型彩色多普勒對頸內(nèi)外動脈分叉處及其上、下1.0～1.5 cm的范圍內(nèi)進行檢測，以1.0 mm≤IMT<1.5 mm為頸動脈硬化病變期；IMT≥1.5 mm，且增厚的內(nèi)膜向血管腔內(nèi)凸出確定為有斑塊形成。參照國家中醫(yī)藥管理局制定的《中醫(yī)病證診斷療效標準》，將頸動脈粥樣硬化辨證為精髓虧虛證、痰濁內(nèi)阻證、氣血滯瘀證、氣血兩虛型。

1.2 實驗方法

1.2.1 血清抗-Hp-IgG、抗-Hp CagA-IgG及抗-Hp VacA-IgG的檢測 研究對象均以間接酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定抗-Hp-IgG來判斷Hp感染率，試劑由鄭州華美生物工程公司提供；對抗-Hp-IgG陽性血清均以免疫印記法(Weston-Blotting)測定抗-Hp CagA-IgG和抗-Hp VacA-IgG，判定Hp不同毒力亞型感染率，試劑由上海元谷科技發(fā)展有限公司提供。

1.2.2 動脈粥樣斑塊螺桿菌16SrRNA和Hp CagA、VacA和glmM基因檢測 對6例CagA+VacA+菌株感染的患者，經(jīng)頸動脈內(nèi)膜切除術(shù)獲得的動脈粥樣斑塊,用3S柱提取法，以Hp的SS1菌株為陽性對照,去離子水代替模板作為陰性對照，進行PCR方法擴增，將擴增產(chǎn)物進行凝膠電泳、DNA測序分析。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 樣本均數(shù)的比較采用t檢驗,率的比較采用χ2檢驗和Fisher精確檢驗；并用條件logistic回歸進行多因素分析；所有統(tǒng)計分析用SPSS 16.0軟件完成。

2 結(jié)果

2.1 2組及不同證型患者血清抗-Hp-IgG、抗-Hp CagA-IgG及抗-Hp VacA-IgG的檢測結(jié)果比較 見表1。

表1 2組及不同證型患者血清抗HP-IgG、抗-Hp CagA-IgG及抗Hp-VacA-IgG檢測結(jié)果比較 例(%)

表1結(jié)果顯示頸動脈粥樣硬化組Hp感染率(63.1%)明顯高于健康對照組(47.1%)(P<0.05)；CagA+VacA+感染率(34.0%)明顯高于CagA-VacA-(13.6%)和CagA+/VacA+(15.5%)(P<0.05)，其中痰濁內(nèi)阻證CagA+VacA+感染率(50.0%)優(yōu)勢更加明顯(P<0.05)。

2.2 2組動脈粥樣斑塊螺桿菌16SrRNA和HpCagA、VacA和glmM基因檢測 對6例CagA+VacA+菌株感染的患者的動脈粥樣斑塊，用3S柱提取法,經(jīng)進行PCR方法擴增，將擴增產(chǎn)物進行凝膠電泳、DNA測序分析，結(jié)果顯示均陰性。

3 討論

近年來，由于對Hp感染和動脈粥樣硬化的相關(guān)性認識存在著爭議[2-3]，研究者一直致力于在動脈粥樣斑塊組織中尋找Hp-DNA，但未得到有力和可信的證據(jù)[4]。結(jié)合以前的研究，對不同證型頸動脈粥樣硬化患者Hp感染狀況及相關(guān)基因進行了分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)痰濁內(nèi)阻證型頸動脈粥樣硬化患者是Hp感染的主要證候，且CagA+VacA+感染率具有更顯著的優(yōu)勢；雖然未檢出螺桿菌16SrRNA、Hp CagA、VacA和glmM相關(guān)基因，但不能否認此相關(guān)性。

中醫(yī)學(xué)認為，動脈粥樣硬化和毒邪、痰濁、血瘀密切相關(guān)。外感邪毒，內(nèi)傷脾胃，轉(zhuǎn)輸失利，津液不行，痰瘀相關(guān)，痰濁內(nèi)生，阻于脈絡(luò)，血行不暢，痰瘀互結(jié)，郁久腐化，漸而形成毒、痰、瘀相互交結(jié)之病機，故以痰濁內(nèi)阻證型為主要癥候。Hp和動脈硬化形成的機制可能是：1)Hp感染時常引起全身或局部血管炎癥反應(yīng)，或促進TNF-α、IL-1、6、8及細胞間黏附因子以及E-選擇素水平升高,誘導(dǎo)單核細胞黏附到血管內(nèi)皮、趨化白細胞聚集并損傷血管內(nèi)皮,加重局部炎癥反應(yīng)導(dǎo)致動脈粥樣硬化血栓的形成[5]。2)Hp作為外源性抗原可增強動脈局部免疫應(yīng)答，激活局部的免疫反應(yīng)，誘導(dǎo)動脈內(nèi)膜損傷，或通過增高氧自由基水平來介導(dǎo)免疫機制；尤其CagA陽性菌株可通過加重免疫炎癥反應(yīng)，參與早期動脈粥樣硬化的形成，或通過抗原模擬與血管壁的表面抗原發(fā)生交叉反應(yīng)誘導(dǎo)血管損傷，在動脈粥樣硬化機制中起重要作用[6]。3)Hp感染的低度炎癥可誘導(dǎo)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化,引起低密度脂蛋白升高和高密度脂蛋白下降，導(dǎo)致血小板持續(xù)激活和不可逆性聚集，促進血栓形成[7]。

本研究通過對不同證型頸動脈粥樣硬化患者Hp感染狀況及相關(guān)基因的分析，Hp感染有可能通過誘導(dǎo)免疫和炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致脂質(zhì)代謝紊亂，促進動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展。Hp感染可能是痰濁內(nèi)阻證型頸動脈粥樣硬化患者的危險因素，其中CagA+VacA+優(yōu)勢顯著。

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