趙忠嬋，劉洪莉（陜西省旬陽(yáng)縣醫(yī)院檢驗(yàn)科 725700）

據(jù)估計(jì)，全球現(xiàn)有3億乙型肝炎病毒（HBV）攜帶者，我國(guó)為高發(fā)區(qū)，約有1億人為HBV攜帶者。乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）是HBV S基因含226個(gè)氨基酸的HBV外膜蛋白，常與Dane顆粒并存。臨床工作中，把HBsAg作為乙肝病毒感染和診斷乙型肝炎的指標(biāo)。健康人群中HBsAg陽(yáng)性率為10%，HBsAg作為HBV血清學(xué)標(biāo)志物為臨床診斷乙肝提供重要的科學(xué)依據(jù)［1］。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）是目前公認(rèn)的HBV血清標(biāo)志物檢測(cè)方法，但試劑盒的選擇是影響檢測(cè)質(zhì)量的重要因素［2］。現(xiàn)對(duì)本院ELISA兩種不同廠(chǎng)家試劑檢測(cè)HBsAg結(jié)果進(jìn)行分析，報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 收集本院2011年5～11月HBsAg陽(yáng)性血清標(biāo)本50份，所有標(biāo)本均無(wú)溶血、脂血及黃疸的纖維蛋白（S／CO值在1.010～24.010），置于－20℃冰箱保存。

1.2 儀器 使用深圳雷杜RT－6000酶標(biāo)儀，深圳雷杜RT－3000全自動(dòng)洗板機(jī)，37℃恒溫水浴箱，微量可調(diào)加樣器。

1.3 試劑 由英科新創(chuàng)（廈門(mén)）科技有限公司和上?？迫A科技有限公司提供；室內(nèi)質(zhì)控由陜西省臨檢中心提供。

1.4 方法 HBsAg檢測(cè)分別由ELISA中兩種不同廠(chǎng)家試劑［英科新創(chuàng)（廈門(mén)）試劑，上海科華試劑］進(jìn)行檢測(cè)。嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，熟悉ELISA法檢測(cè)中的各種影響因素，并認(rèn)真對(duì)待，嚴(yán)格進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控。

2 結(jié) 果

室內(nèi)質(zhì)控在控的情況下，同一份標(biāo)本，以上兩種試劑檢測(cè)結(jié)果，英科新創(chuàng)（廈門(mén)）試劑檢測(cè)結(jié)果S／CO值高于上?？迫A試劑。高S／CO值的結(jié)果定性判斷無(wú)差異，而低S／CO值即臨界狀態(tài)的結(jié)果定性有差異。以上50份血清：經(jīng)英科新創(chuàng)（廈門(mén)）試劑再次檢測(cè)陽(yáng)性有50份；經(jīng)上?？迫A試劑檢測(cè)陽(yáng)性有46份。其中經(jīng)英科新創(chuàng)（廈門(mén)）試劑檢測(cè)S／CO值在1.010～2.500的4份標(biāo)本，上?？迫A試劑檢測(cè)為陰性。

3 討 論

ELISA基本原理是，包被抗原或抗體后，通過(guò)抗原抗體反應(yīng)使酶標(biāo)抗體結(jié)合到載體上，使結(jié)合的酶標(biāo)抗體和游離的酶標(biāo)抗體分離，洗去游離的酶標(biāo)抗體，加入底物顯色，根據(jù)顏色深淺定性或定量［3］。由于不同試劑HBsAg檢測(cè)結(jié)果不同，常引起醫(yī)療糾紛及臨床醫(yī)生的誤解。在工作中，優(yōu)質(zhì)試劑是保證檢驗(yàn)質(zhì)量的物質(zhì)基礎(chǔ)［4］。資料顯示不同廠(chǎng)家試劑的特異性和敏感性分別為84.4%～99.3%，78%～89%，存在較大差異［5］。在臨床工作中，應(yīng)選擇國(guó)家醫(yī)藥監(jiān)督局注冊(cè)批準(zhǔn)，批檢合格，靈敏度適中的試劑，并應(yīng)對(duì)不同廠(chǎng)家試劑檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比對(duì)分析，選擇臨床評(píng)價(jià)優(yōu)良的試劑，避免造成假陽(yáng)性或假陰性。在檢測(cè)中從標(biāo)本的采集、離心、貯存、試劑存放以及儀器的維護(hù)﹑操作過(guò)程等都嚴(yán)格按照操作要求進(jìn)行，嚴(yán)格進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控，積極參加省級(jí)及國(guó)家衛(wèi)生部的室間質(zhì)評(píng)，不斷分析總結(jié)質(zhì)評(píng)結(jié)果，努力提高檢驗(yàn)質(zhì)量。

以上兩種試劑檢測(cè)結(jié)果比較，英科新創(chuàng)（廈門(mén)）試劑檢測(cè)結(jié)果S／CO值高于上海科華試劑。其中英科新創(chuàng)（廈門(mén)）試劑檢測(cè)為陽(yáng)性S／CO值在1.010～2.500的4份標(biāo)本，上?？迫A實(shí)際檢測(cè)為陰性。ELISA操作影響因素繁多，因此在判斷同一份標(biāo)本（不包括溶血、脂血、黃疸及非抗凝標(biāo)本），兩種試劑檢測(cè)結(jié)果不同時(shí)，本室通過(guò)定性和定量比較，這些標(biāo)本大多數(shù)為臨界狀態(tài)的標(biāo)本。對(duì)于這些標(biāo)本，一定要用不同廠(chǎng)家、不同批號(hào)試劑反復(fù)進(jìn)行檢測(cè)，仔細(xì)對(duì)照分析原因，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果設(shè)立適合本實(shí)驗(yàn)室的灰區(qū)和弱陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)。必要時(shí)建議患者進(jìn)行HB－s Ag定量檢測(cè)或定期復(fù)檢。并對(duì)結(jié)果有必要的說(shuō)明，如“結(jié)果已復(fù)查，建議定期復(fù)查或定量檢測(cè)”。對(duì)結(jié)果的解釋?xiě)?yīng)結(jié)合臨床及其實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行綜合分析，以免絕對(duì)化。

同時(shí)，工作人員應(yīng)努力學(xué)習(xí)新技術(shù)新理論，努力提高業(yè)務(wù)技術(shù)水平，認(rèn)真對(duì)待試驗(yàn)中的影響因素。在工作中，熟悉產(chǎn)品性能，不斷的分析總結(jié)。努力為臨床提供正確、可靠的結(jié)果，而不能隨意出具檢驗(yàn)報(bào)告，以免延誤患者病情，引起醫(yī)患矛盾或醫(yī)療糾紛。

［1］任力，黃連貴，胡悅，等.湖北松滋地區(qū)乙型肝炎病毒感染狀況調(diào)查［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2007，4（3）：188－189.

［2］楊柏青.3種方法檢測(cè)乙型肝炎表面抗原1例［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2007，4（3）：224.

［3］楊廷彬.免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗(yàn)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1998：129.

［4］雷秋香.ELISA法對(duì)HIV抗體的檢測(cè)［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2007，4（3）：封3.

［5］黃道連.ELISA法檢測(cè)乙型肝炎兩對(duì)半影響因素分析與對(duì)策［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2007，4（8）：758.