陳 浩 茍滿枝 劉 航 徐 健

1.樂(lè)山市食品藥品檢驗(yàn)所，四川 樂(lè)山 614000;2.宜賓市食品藥品檢驗(yàn)所，四川 宜賓 644000

樟科樟屬植物銀葉桂Cinnamomum mairei Levl.分布于我國(guó)云南東北部、四川西部等地。為《四川省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》2010年版所載“官桂”來(lái)源，藥用部位干燥樹(shù)皮。有散寒止痛之功。本文根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道及藥效學(xué)研究結(jié)果，采用高效液相色譜法對(duì)銀葉桂中含有的桂皮醛進(jìn)行了含量測(cè)定研究，為進(jìn)一步建立官桂藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

美國(guó)Agilent1100液相色譜儀;桂皮醛對(duì)照品為中國(guó)藥品生物制品檢定所提供 (批號(hào)110710－201016，98.6%，含量測(cè)定用);銀葉桂樣品分別采自宜賓市宜賓縣、屏山縣、長(zhǎng)寧縣，購(gòu)自樂(lè)山市中藥材公司、樂(lè)山市龍馬藥業(yè)、成都中藥材市場(chǎng);乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其它試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱Diamonsil C18(250×4.6mm)5μm;流動(dòng)相乙腈－水 (35∶65)，檢測(cè)波長(zhǎng)為290nm，柱溫為35℃，流速為1.0ml/min。對(duì)照品及樣品的HPLC圖見(jiàn)圖1。

2.2 供試品溶液的制備 取樣品粉末 (過(guò)三號(hào)篩)約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理 (功率350W，頻率35kHz)10分鐘，放置過(guò)夜，同法超聲處理一次，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.3 線性范圍的考察 精密稱取桂皮醛對(duì)照品 (含量98.6%)48.11mg，置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，再精密量取10ml置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液;精密量取貯備液1.0、2.0、5.0、10.0、50.0ml，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。精密吸取上述對(duì)照品溶液及貯備液各10μl，注入高效液相色譜儀分別進(jìn)行測(cè)定。以進(jìn)樣量 (μg)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程為Y=11794x+22.813，r=0.9999，結(jié)果表明桂皮醛在0.009487～0.9487μg與峰面積線性關(guān)系良好。

2.4 精密度試驗(yàn) 精密量吸取桂皮醛對(duì)照品溶液10μl，連續(xù)進(jìn)樣5次，結(jié)果桂皮醛峰面積的RSD為0.21%。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密量吸取供試品溶液10μl，分別于0，4，8，12，24h按上述色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算RSD為0.52%。結(jié)果表明供試品溶液中桂皮醛在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn) 精密稱取銀葉桂藥材同批號(hào)樣品 (宜賓長(zhǎng)寧)6份，每份約0.5g，按前述供試品制備方法及色譜條件進(jìn)行桂皮醛含量測(cè)定，測(cè)得桂皮醛平均含量 (按干燥品計(jì)算)為0.38%，RSD為1.52%。

2.7 回收率試驗(yàn) 精密吸取濃度為0.9487mg/ml的對(duì)照品溶液1.0ml，共6份，分別置50ml錐形瓶中。取已知含量的樣品 (宜賓長(zhǎng)寧，HPLC法測(cè)定含量為0.38%)6份，每份約0.25g，精密稱定，置上述錐形瓶中，按擬定方法進(jìn)行供試品溶液制備和桂皮醛含量測(cè)定 (按干燥品計(jì)算)，結(jié)果見(jiàn)表1。

以上試驗(yàn)結(jié)果表明，該方法準(zhǔn)確度良好。

2.8 樣品測(cè)定

按正文含量測(cè)定方法測(cè)定6批樣品中桂皮醛含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 回收率測(cè)定結(jié)果

表2 樣品的含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1 色譜條件的選擇

3.1.1 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇 采用甲醇作溶劑制備桂皮醛對(duì)照品溶液，在200～500nm波長(zhǎng)下掃描其光譜圖，結(jié)果在290nm波長(zhǎng)處有最大吸收，故測(cè)定波長(zhǎng)選定為290nm。

3.1.2 流動(dòng)相的選擇 采用流動(dòng)相乙腈－水 (35:65)對(duì)本品供試品溶液進(jìn)行系統(tǒng)適用性考察，結(jié)果在該流動(dòng)相下，本品桂皮醛峰形對(duì)稱，理論板數(shù)6000，分離度符合要求。因此選定流動(dòng)相乙腈－水 (35:65)作為測(cè)定流動(dòng)相。

3.2 提取方法及時(shí)間的考察

取本品粉末0.5g，3份為一組，精密稱定，置錐形瓶中，每組分別精密加入甲醇25ml、乙醇25ml，稱定重量，分別采用:1、超聲處理10min，再稱定重量，用所加溶劑補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，即得;2、超聲處理10min，放置過(guò)夜，同法超聲處理一次，再稱定重量，用所加溶劑補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，即得。進(jìn)樣量10μl，按上述選定的色譜條件實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明:采用甲醇超聲處理10min，靜置過(guò)夜再超聲處理10min優(yōu)于其它方法。因此選定本文提取方法。

3.3 本實(shí)驗(yàn)建立的銀葉桂藥材中測(cè)定桂皮醛的高效液相色譜法，具操作性、穩(wěn)定性及代表性。測(cè)定了銀葉桂多批次藥材中桂皮醛含量，為官桂藥材質(zhì)量控制提供了依據(jù)。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典［S］.一部.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010.

［2］中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì).中國(guó)植物志［M］.北京:科學(xué)出版社，1983.

［3］肖培根.新編中藥志［M］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2002.