董興高

湖北民族學(xué)院醫(yī)學(xué)院，湖北 恩施 445000

牛王刺為豆科植物云實(shí)Caesalpinia decapetala(Roth)Alston［Reichrdia decapetala Roth;Caesalpinia sepiaria Roxb.］的干燥根。為恩施常用民族藥物，味辛性溫。具祛風(fēng)除濕，散瘀止痛，解毒消腫功效［1－2］。我們前期研究已證實(shí)牛王刺具有明顯的鎮(zhèn)痛、抗炎作用［3－4］。本實(shí)驗(yàn)觀察了牛王刺對(duì)正常小鼠腸系膜微循環(huán)細(xì)動(dòng)、靜脈血管口徑以及毛細(xì)血管開放量情況的影響，探討其活血作用的機(jī)制，為開發(fā)利用牛王刺提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 藥材 牛王刺由湖北咸豐縣中醫(yī)院提供。

1.2 動(dòng)物 ICR昆明小鼠，體重18～22g，雌雄兼用，由湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供，合格證號(hào):SCKK2003－0005。

1.3 試劑 烏拉坦溶液由本院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心提供，乙醇為分析純。

1.4 供試液的制備 取供試藥材適量，用50%乙醇超聲提取2次，每次45分鐘，合并，回收乙醇，濾過(guò)，將濾液濃縮配制成1g/ml(按生藥材計(jì)算)的水溶液，備用。

1.5 儀器 CQ－250超聲波清洗器 (上海弘興超聲電子儀器有限公司)，X52－H光學(xué)顯微鏡 (成都泰盟科技有限公司提供)，TK－C721EC彩色攝象機(jī) (北京杰偉世音頻設(shè)備有限公司組裝)，HW－2000微循環(huán)數(shù)字恒溫儀 (成都泰盟科技有限公司生產(chǎn))，BI2000圖象分析系統(tǒng) (成都泰盟科技有限公司生產(chǎn))等。

1.6 小鼠腸系膜微循環(huán)的測(cè)定 選取小鼠10只，按照每只0.5ml牛王刺提取液的標(biāo)準(zhǔn)灌胃后，按0.7ml/100g標(biāo)準(zhǔn)肌注烏拉坦溶液麻醉，沿小鼠腹部中線用手術(shù)剪刀切開，置顯微鏡載物臺(tái)上并固定，調(diào)節(jié)顯微鏡，在回盲部分別選取10～20μm之間的細(xì)動(dòng)脈和20～30μm之間的細(xì)靜脈各一支，用100倍鏡進(jìn)行觀察，用顯微測(cè)微尺分別測(cè)定給藥后10min、20min、30min、60min小鼠腸系膜微循環(huán)細(xì)動(dòng)脈(A)及細(xì)靜脈 (V)的口徑。同時(shí)記錄給藥后10min、20min、30min、60min毛細(xì)血管開放數(shù)量 (毛細(xì)血管網(wǎng)交點(diǎn)記數(shù)法)，以判斷微循環(huán)改善情況［5］。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 以平均值±SD表示，配對(duì)t檢驗(yàn)，由spss11.5系統(tǒng)完成。

2 結(jié)果

2.1 牛王刺對(duì)小鼠腸系膜微血管口徑的影響 給藥后小鼠腸系膜微循環(huán)細(xì)動(dòng)、靜脈口徑在60min內(nèi)呈增大狀態(tài)，30min時(shí)為作用高峰，60min仍然有擴(kuò)張作用，與10min時(shí)作用強(qiáng)度相似，與給藥前相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (表1～2)，表現(xiàn)出快速而持久的擴(kuò)張血管的作用，從而改善局部的微循環(huán)。

表1 牛王刺對(duì)正常小鼠腸系膜細(xì)動(dòng)脈口徑的影響(±SD，n=10)

表1 牛王刺對(duì)正常小鼠腸系膜細(xì)動(dòng)脈口徑的影響(±SD，n=10)

注:與給藥前相比，＊＊p＜0.01。

給藥前A口徑(m)給藥后A口徑 (m)10min(增加值)20min(增加值)30min(增加值)60min(增加值)15.4 ±1.43 16.7 ±1.53＊＊(1.30±0.840)18.3 ±1.57＊＊(2.60±0.673)19.3 ±1.70＊＊(3.90±0.735)16.6 ±1.48＊＊(1.20±0.630)

表2 牛王刺對(duì)正常小鼠腸系膜細(xì)靜脈口徑的影響 (±SD，n=10)

表2 牛王刺對(duì)正常小鼠腸系膜細(xì)靜脈口徑的影響 (±SD，n=10)

注:與給藥前相比，*p＜0.05，＊＊p＜0.01。

給藥前V口徑(m)給藥后V口徑 (m)10min(增加值)20min(增加值)30min(增加值)60min(增加值)25.5±2.20 26.7±2.40*(1.20±1.220)27.9 ±2.41＊＊(2.40±0.962)28.8 ±2.74＊＊(3.30±0.820)26.5 ±1.95＊＊(1.00±0.941)

2.2 牛王刺對(duì)小鼠毛細(xì)血管開放量的影響 給藥后小鼠腸系膜血流速度加快，毛細(xì)血管開放數(shù)量增多，在30min時(shí)達(dá)到高峰，60min時(shí)仍然有較好的作用，作用強(qiáng)度與10min時(shí)相似，與給藥前相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (表3)。

表3 牛王刺對(duì)正常小鼠腸系膜毛細(xì)血管開放量的影響 (±SD，n=10)

表3 牛王刺對(duì)正常小鼠腸系膜毛細(xì)血管開放量的影響 (±SD，n=10)

注:與給藥前相比，＊＊p＜0.01。

給藥后 (個(gè)/mm2)給藥前(個(gè)/mm2)10min(增加值)20min(增加值)30min(增加值)60min(增加值)4.7 ±0.68 5.7±1.20＊＊(1.0±0.65)6.8 ±1.23＊＊(2.1±0.62)8.2 ±1.12＊＊(3.5±0.68)5.5 ±0.95＊＊(0.8±0.46)

3 討論

本實(shí)驗(yàn)采用活體腸系膜微循環(huán)觀察法，檢測(cè)了牛王刺對(duì)小鼠腸系膜微循環(huán)的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明牛王刺對(duì)小鼠腸系膜細(xì)動(dòng)脈和細(xì)靜脈口徑均具有不同程度的擴(kuò)張作用，能增加微毛細(xì)血管的開放數(shù)量，作用迅速持久。另外，在實(shí)驗(yàn)中觀察到在給藥后10～15min，伴隨著毛細(xì)血管開放數(shù)量的增加，微循環(huán)血流速度也明顯加快。因此，擴(kuò)張毛細(xì)血管、增加毛細(xì)血管開放數(shù)量和增加微循環(huán)血流速度是牛王刺具有良好活血、鎮(zhèn)痛作用的機(jī)制之一，這將為牛王刺用于臨床治療微循環(huán)障礙類疾病提供參考。但牛王刺對(duì)腸系膜微循環(huán)影響的主要活性部位或成分還有待進(jìn)一步明確。研究其對(duì)血液流變性和凝血機(jī)制的影響，能更全面深入了解牛王刺活血和鎮(zhèn)痛的作用機(jī)理。

［1］方志先.土家族藥物志 (上冊(cè)) ［M］.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2007:190.

［2］國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草 (第4卷) ［M］.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999:370.

［3］董興高.牛王刺鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究 ［J］.中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2012，21(174):35.

［4］董興高.牛王刺抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究 ［J］.中國(guó)民族民間醫(yī)藥，2012，21(177):48－50.

［5］陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1993:499－503.