錢 峰
(江蘇省泰興市古溪鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站,江蘇 泰興 225417)
1.1 病原及臨床癥狀
1.1.1 病原 本屬菌呈革蘭氏染色陰性,無(wú)芽孢,一般有數(shù)根鞭毛,常無(wú)莢膜,兩端鈍圓。從病豬身上分離到的大腸桿菌有溶血性或非溶血性兩類,其O型抗原因不同地域和時(shí)期而有變化。多數(shù)病原菌株都有菌毛吸著因子并產(chǎn)生腸毒素,已知吸著因子(也稱粘著因子)有K88、K99、987P、F41 4 種,且各具獨(dú)特的抗原性。
1.1.2 臨床癥狀 臨床上以排灰白色粥樣稀便為主要特征,發(fā)病率高而致死率低。神經(jīng)癥狀表現(xiàn)為盲目行走或轉(zhuǎn)圈,共濟(jì)失調(diào),口吐白沫,叫聲嘶啞,進(jìn)而倒地抽搐,四肢呈游泳狀,逐漸發(fā)生后軀麻痹,臥地不起,在昏迷狀態(tài)中死亡。體溫在病初可能升高,很快降至常溫或偏低。眼瞼或結(jié)膜及其他部位水腫,病程在數(shù)小時(shí)至1~2 d,潛伏期短,一般在24 h左右,長(zhǎng)的也僅有1~3d,個(gè)別病例到7日齡左右發(fā)病。
1.2 病理變化 尸體脫水,表現(xiàn)為皮膚干燥、皺縮,口腔黏膜蒼白。最顯著的病變?yōu)槟c道有急性卡他性炎癥,其中以十二指腸最為嚴(yán)重。全身多處組織水腫,特別是胃壁黏膜水腫是本病的特征。大腸腸系膜水腫,結(jié)腸腸系膜膠凍狀水腫亦很常見(jiàn)。此外,大腸壁、全身淋巴結(jié)、眼瞼和頭頸部皮下亦有不同程度的水腫。除了水腫病變外,胃底和小腸黏膜、淋巴結(jié)等有不同程度的充血。心包、胸腔和腹腔有程度不等的積液。
2.1 試驗(yàn)材料 大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)O抗原(O1-O163),購(gòu)自中國(guó)獸藥監(jiān)察所,病料分別來(lái)自江蘇泰興市14個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn),編號(hào)為:長(zhǎng)生(CS)、古溪(GX)、黃橋(HQ)、泰興(TX)、溪橋(XQ)、河失(HS)、橫垛(HD)、橫巷(HX)、劉陳(LC)、廣陵(GL)、曲霞(QH)、寧界(NJ)、元竹(YZ)、大生(DS)。所有病料均為典型腸炎病死豬的肝、脾、淋巴結(jié)和胃壁水腫液;實(shí)驗(yàn)動(dòng)物購(gòu)自南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心,為60日齡左右的健康小白鼠。
2.2 細(xì)菌分離及培養(yǎng)試驗(yàn) 無(wú)菌采取病料接種于麥康凱瓊脂平板上培養(yǎng)24h,挑取紅色中等大小光滑菌落接種于普通肉湯,再劃線于麥康凱瓊脂平板上培養(yǎng)24h,然后挑取單個(gè)菌落將其接種于鮮血瓊脂上培養(yǎng),并觀察是否有溶血現(xiàn)象。分離菌分別接種于普通瓊脂平板、鮮血瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板、巧克力瓊脂平板、伊紅美藍(lán)瓊脂平板、普通肉湯培養(yǎng)基,于37℃有氧條件下培養(yǎng);同時(shí)設(shè)立另一組于厭氧條件下培養(yǎng),并觀察其生長(zhǎng)表現(xiàn)。
2.3 生化試驗(yàn) 參照《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊(cè)》進(jìn)行鑒定,分別進(jìn)行了吲哚試驗(yàn)、M.R試驗(yàn)、V-P試驗(yàn)、硫化氫試驗(yàn)、尿素試驗(yàn)、葡萄糖、麥芽糖等發(fā)酵試驗(yàn)。
2.4 血清型鑒定及細(xì)菌毒素試驗(yàn) 將待檢菌株接種于營(yíng)養(yǎng)斜面,37℃培養(yǎng)24h,用生理鹽水制成濃菌液。均參照中國(guó)獸藥監(jiān)察所抗O血清試劑說(shuō)明書操作。
將純種菌接種于普通肉湯內(nèi)常溫培養(yǎng)24h,菌液先用比濁法進(jìn)行計(jì)數(shù),然后倍比稀釋。取不同濃度菌液涂布平板培養(yǎng)24h后進(jìn)行計(jì)數(shù),然后將菌液稀釋至18億CFU/mL備用。將備制的菌液用0.22μm濾膜過(guò)濾,取無(wú)菌液尾靜脈注射小白鼠,0.1mL/只,注射5只;空白對(duì)照組5只,注射滅菌肉湯(0.1mL/只),觀察注射后的小白鼠發(fā)病及死亡癥狀,對(duì)死亡的立即剖檢,并取肝、脾、淋巴結(jié)等涂片鏡檢。
2.5 動(dòng)物致病性試驗(yàn) 將以上菌液腹腔注射小白鼠,0.2mL/只,對(duì)照組腹腔注射普通肉湯0.2mL/只。對(duì)注射后的小白鼠進(jìn)行隔離飼養(yǎng)并觀察其發(fā)病及死亡情況,對(duì)死亡的立即進(jìn)行剖檢,并取肝、脾、淋巴結(jié)等涂片鏡檢。
2.6 結(jié)果
2.6.1 細(xì)菌分離及形態(tài) 從14個(gè)疑似病料樣品中分離到大腸桿菌12株,在血瓊脂上均可見(jiàn)明顯的溶血現(xiàn)象。分離菌為革蘭氏陰性,兩端略圓、中等大小的桿菌,無(wú)芽孢單個(gè)存在。
2.6.2 生化及培養(yǎng)特性 參照《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊(cè)》的判定標(biāo)準(zhǔn),分離菌均符合大腸埃希氏菌的特征;分離菌為兼性厭氧菌,在巧克力瓊脂平板上形成邊緣整齊的白色菌落,在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上形成黑色帶金色的菌落,在普通肉湯培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)的液體渾濁,管壁有菌環(huán)。
2.6.3 血清型鑒定結(jié)果 共有6個(gè)血清型,其中O139有 3株(LC、TX、XQ),O138有 4株(HQ、HD、GX、YZ),O48有 2株(GL、QX),O8、O54、O141 各有 1株(分別是 LJ、HX、DS)。
一般認(rèn)為,仔豬大腸桿菌感染通常以出生仔豬的黃痢、哺乳仔豬的白痢以及斷奶前后的水腫病這3種形式出現(xiàn),而我們分離菌株的病豬所表現(xiàn)的癥狀和剖檢變化也明顯有別于仔豬黃痢、白痢和水腫病,提示該菌株不同于引起豬大腸桿菌病的大腸埃希氏菌的某些血清型,可能另有所屬。對(duì)照《中國(guó)人獸共患病學(xué)》有關(guān)資料記載,認(rèn)定該病原屬出血性大腸桿菌這一群。
2.7 診斷 根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀、病理變化及上述病原分離結(jié)果,初步認(rèn)定該病屬出血性大腸桿菌引起的腹瀉病。
2.8 藥敏試驗(yàn) 取典型菌落均勻涂布于普通瓊脂平板上進(jìn)行藥敏試驗(yàn),結(jié)果該菌對(duì)氯霉素、丁胺卡那、環(huán)丙沙星高敏,對(duì)磺胺嘧啶、土霉素中敏,對(duì)青霉素、氨芐青霉素、鏈霉素低敏。
2.9 防治
2.9.1 西醫(yī)治療 立即將圈舍清洗干凈并用1%百毒殺消毒,停喂飼料半天。每頭豬口腔灌注0.1%高錳酸鉀溶液20mL;每頭豬腹腔注射5%葡萄糖氯化鈉20mL;每頭豬肌注“6542”注射液5mg;板蘭根注射液10mL+維生素B125mL+100萬(wàn)單位鏈霉素1支,靜脈注射。
2.9.2 中醫(yī)療法 中藥組方:焦山楂20g、焦六曲20g、牡蠣 30g、半支蓮 30g、垂盆草 30g、雞骨草 10g、黃芪50g、白芍 30g、熟地 30g、甘草 15g、茵陳 20g、薏苡仁15 g、陳皮20 g,共研細(xì)末拌料飼喂,每日一次,連用3 d。效果:當(dāng)天止瀉,3d后痊愈。
3.1 豬大腸桿菌病是危害仔豬生長(zhǎng)發(fā)育的常見(jiàn)病、多發(fā)病,是引起仔豬死亡的主要原因之一。臨床上對(duì)該病的治療通常使用抗生素,如:痢菌凈、鏈霉素、慶大霉素、痢特靈、環(huán)丙沙星等藥。而常見(jiàn)病原菌耐藥菌的傳播又使很多抗生素在治療該疾病時(shí)效果不明顯,常引發(fā)人們過(guò)量用藥的錯(cuò)誤治療行為,致使細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)或出現(xiàn)大量變異菌株,從而加重了病原耐藥菌的傳播,對(duì)畜牧業(yè)生產(chǎn)造成巨大的影響,且嚴(yán)重威脅著人們的身體健康。目前防治此類疾病的藥品往往都是偏重治療且功效單一,雖能解決一些問(wèn)題,但卻忽視了整體性及相關(guān)器官功能的平衡與協(xié)調(diào)關(guān)系,并容易因此掩蓋其他問(wèn)題甚至是實(shí)質(zhì)性問(wèn)題,進(jìn)而導(dǎo)致更嚴(yán)重的后果。
3.2 口腔灌注0.1%高錳酸鉀溶液20mL,是為了凈化胃腸環(huán)境;停止采食半天,是為了讓腸胃充分休息以及恢復(fù)、調(diào)整腸胃功能。
3.3 本中藥組方藥理是:焦山楂、焦六曲、薏苡仁、陳皮、雞骨草、甘草有健脾、養(yǎng)胃、助消化等作用,主治食積腹脹、菌痢腹瀉;半支蓮、垂盆草、雞骨草有清熱解毒、涼血消腫等作用,主治急慢性肝炎;黃芪有補(bǔ)氣固表、生肌利尿等作用。
3.4 本中藥組方打破了傳統(tǒng)的以痢治痢的治療方法,通過(guò)提高脾胃的運(yùn)化功能達(dá)到燥濕、健脾、保肝、潤(rùn)腸的功能,對(duì)腸黏膜有收斂和吸附作用,從而有效地保護(hù)消化道黏膜減少細(xì)菌毒素及食物異常發(fā)酵產(chǎn)物的侵蝕,使炎癥得以緩解,達(dá)到清熱解毒、開胃消積、祛濕健脾、保肝止瀉的目的。充分體現(xiàn)了中醫(yī)藥的整體觀念和優(yōu)勢(shì),使藥效和功能更為全面達(dá)到標(biāo)本兼治,從而拓開了中醫(yī)藥辯癥施治的具體內(nèi)容和應(yīng)用范圍。
3.5 中藥在我國(guó)資源豐富,應(yīng)用歷史悠久,價(jià)格低廉,并具有抗菌、抗病毒、抗毒素、免疫調(diào)節(jié)和提高生產(chǎn)性能等多方面作用,且毒副作用小,在治療仔豬腹瀉方面,能與抗生素媲美,它一般不受大腸桿菌血清型的影響,不存在耐藥性問(wèn)題。在畜牧業(yè)生產(chǎn)中作為抗生素的替代品,在營(yíng)養(yǎng)、保健、提高免疫力、抗應(yīng)激、抗氧化和改善畜產(chǎn)品品質(zhì)等多方面的應(yīng)用已越來(lái)越受到人們的重視。而傳統(tǒng)的對(duì)仔豬進(jìn)行抓捕注射,不僅勞動(dòng)強(qiáng)度大,還易對(duì)病豬造成各種應(yīng)激反應(yīng);中藥喂服投藥簡(jiǎn)便省工、安全實(shí)惠,療程短、療效高、保護(hù)率高、克服了打針灌藥的困難,易于在生產(chǎn)中推廣。
3.6 仔豬消化道未發(fā)育成熟,消化機(jī)能不健全、消化腺不發(fā)達(dá),體溫調(diào)節(jié)及應(yīng)急能力差,再加上飼養(yǎng)管理粗放、圈舍骯臟潮濕導(dǎo)致仔豬消化機(jī)能紊亂是引發(fā)本病的主要原因。病豬喜舔食糞便污水,致使病原體在整個(gè)消化道形成惡性循環(huán),故而必須首先清理胃腸。
3.7“6542”注射液有抑制腺體分泌、解除胃腸平滑肌痙攣的作用,因此運(yùn)用該藥治療在本案中能起到很好的協(xié)同療效。
3.8 長(zhǎng)期劇烈的腹瀉使機(jī)體體液減少,鈉離子大量喪失,體內(nèi)電解質(zhì)失衡,引起機(jī)體等滲性脫水,因此必須補(bǔ)水。引起腹瀉的原因很多,有細(xì)菌性、病毒性、寄生蟲性等,往往是混合存在相互促進(jìn)誘發(fā),因此治療時(shí)必須有一個(gè)綜合全面的措施。
本病只要正確診斷,及時(shí)做好中西醫(yī)結(jié)合治療,采取消毒隔離、加強(qiáng)飼養(yǎng)管理等綜合性防治措施,是可以控制的。建議獸醫(yī)人員在實(shí)際工作中應(yīng)認(rèn)真進(jìn)行病死豬的剖檢,特別是在基層化驗(yàn)條件有限的情況下,此項(xiàng)工作對(duì)任何疾病的診斷尤為重要。
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