2010年“某乳制品致嬰兒性早熟”事件引起了社會廣泛的關(guān)注。雖然經(jīng)過檢測，該乳品中激素含量水平均在國家限定范圍內(nèi)，但仍然引起了人們對嬰兒食用奶粉中激素含量標(biāo)準(zhǔn)及檢測方法的廣泛討論。

激素是由內(nèi)分泌腺或內(nèi)分泌細(xì)胞分泌的高效生物活性物質(zhì)，在體內(nèi)作為信使傳遞信息，對機(jī)體生理過程起調(diào)節(jié)作用的物質(zhì)。按照化學(xué)組成，可以分為類固醇、氨基酸衍生物、肽與蛋白質(zhì)和脂肪酸衍生物4大類；按照來源，激素可以分為內(nèi)源性激素和外源性激素。內(nèi)源性激素是由自身體內(nèi)腺體或細(xì)胞分泌的激素，分為生長激素和性激素，如雌二醇、雌三醇、孕酮、睪酮等。為了維持動物正常的新陳代謝和生理功能，動物機(jī)體和組織都需要這種天然微量的性激素。內(nèi)源性激素的水平受動物品種、年齡、生理變化，包括飼料以及氣候、季節(jié)的影響而不斷地變化。專家們普遍認(rèn)為，牛乳中天然含有微量內(nèi)源性的性激素，但不會對人體的健康產(chǎn)生危害，牛乳中的微量內(nèi)源性激素是動態(tài)變化的，不構(gòu)成食品安全威脅。目前，國內(nèi)外都沒有制定牛乳中內(nèi)源性激素限量的標(biāo)準(zhǔn)，一般情況下不作為常規(guī)的檢測指標(biāo)。外源性激素是人工合成的激素，可以分為性激素、促生長激素、間羥基苯酸丙酯和β-興奮劑，如己烯雌酚、玉米赤霉醇、克倫特羅等都屬于外源性激素。

由于激素能夠促進(jìn)奶牛的生長、泌乳增加產(chǎn)奶量，導(dǎo)致一些奶農(nóng)向飼料中添加激素或直接給奶牛注射激素。隨著激素合成技術(shù)的提高，應(yīng)用于畜禽產(chǎn)品的激素種類和數(shù)量逐漸增加。據(jù)估計，美國30%的奶牛都曾被注射重組牛生長激素。激素會通過泌乳進(jìn)入牛奶中。被人體攝入后，會明顯影響人體的激素平衡，引起致癌、致畸，如已烯雌酚可能引起女童早熟、子宮癌及男性的女性化等。所以外源性激素一般都是禁用的，有的雖然可以使用，但是有限量要求，如歐盟自1989年開始禁止合成甾醇類激素在動物性食品中的使用；美國FDA對動物性食品中的玉米赤霉醇和醋酸雌酮進(jìn)行了限量要求。

牛奶中激素殘留濃度極低，激素的分析屬復(fù)雜基質(zhì)中痕量組分的分析技術(shù)，這種痕量分析具有檢測限低，樣品基質(zhì)復(fù)雜，干擾物質(zhì)多等特點(diǎn)，樣品前處理技術(shù)復(fù)雜，檢測難度大。目前，國際上針對激素的檢測方法主要包括儀器方法、酶聯(lián)免疫方法和生物芯片法。

儀器方法簡述

儀器方法主要有氣相色譜法（GC）、高效液相色譜法（HPLC）、氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）和液相色譜-質(zhì)譜法（LC-MS）。這些檢測方法均存在一定的弊端：激素是高沸點(diǎn)、低揮發(fā)性物質(zhì)，氣相色譜法不適合對激素進(jìn)行直接測定，一般需要對目標(biāo)激素進(jìn)行衍生化處理，因此樣品處理復(fù)雜、費(fèi)時；HPLC靈敏度低，很難達(dá)到食品基質(zhì)中的外源性激素檢測要求；氣質(zhì)聯(lián)用分析法在性激素檢測中的不足之處在于需要繁瑣的衍生化過程；液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)將液相色譜的強(qiáng)分離能力與質(zhì)譜檢測器的豐富結(jié)構(gòu)信息、高靈敏度特點(diǎn)結(jié)合，具有靈敏度高、且能提供化合物的結(jié)構(gòu)特征等特點(diǎn)，是定性定量非?？煽康拇_認(rèn)方法，但儀器成本較高，操作較復(fù)雜，同時對操作人員的要求較高。

酶聯(lián)免疫方法

酶聯(lián)免疫方法是以抗原抗體的特異性結(jié)合及酶與底物的顯色反應(yīng)為基礎(chǔ)的檢測方法。北京博歐實德生物技術(shù)有限公司的激素類檢測試劑盒采用直接競爭性酶聯(lián)免疫原理，可以定量檢測乳制品等多種樣品中的激素殘留，操作簡單、靈敏度高、特異性強(qiáng)、回收率高、檢測速度快，可在2小時內(nèi)完成檢測，且檢測成本低，非常適合批量檢測。另外，產(chǎn)品系列齊全（見表1）。該系列試劑盒目前已得到國內(nèi)知名乳品企業(yè)的廣泛應(yīng)用，如伊利、蒙牛等企業(yè)。

生物芯片法

生物芯片是根據(jù)生物分子間特異相互作用的原理，將生化分析過程集成于芯片表面，從而實現(xiàn)對DNA、RNA、多肽、蛋白質(zhì)以及其他生物成分的高通量快速檢測技術(shù)。英國朗道公司的Evidence Investigator多分析物生物芯片檢測系統(tǒng)可用于檢測乳品、蜂蜜、尿液、組織等多種樣品中的激素殘留和獸藥殘留，是世界上第1臺多分析物、半定量藥物殘留分析儀。北京博歐實德生物技術(shù)有限公司是英國Randox Evidence Investigator生物芯片系統(tǒng)在中國區(qū)域的獨(dú)家代理。

表1 產(chǎn)品列表

生物芯片技術(shù)基于ELISA(酶聯(lián)免疫反應(yīng))原理，采用夾心和競爭的免疫檢測方法，每個載體含9個生物芯片（以3x3形式排列），相當(dāng)于9個反應(yīng)器，在生物芯片的預(yù)定獨(dú)立檢測區(qū)域上（每個芯片25個檢測區(qū)域）固定了多種特異捕獲配合基(抗體或者抗原)。當(dāng)樣品中含有待測物時，待測物可與芯片上固定的抗體或抗原及辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗原結(jié)合，加入信號試劑后，產(chǎn)生光信號，隨后超低溫CCD相機(jī)（高分辨的CCD成像技術(shù)）獲取生物芯片每個測試區(qū)產(chǎn)生的光信號，并由獨(dú)一無二的圖像處理軟件將光信號迅速轉(zhuǎn)換為分析物的濃度，無須手工計算。

技術(shù)平臺的優(yōu)勢

Evidence Investigator生物芯片檢測系統(tǒng)可同時對單個樣本進(jìn)行多個分析物的定量檢測（每次最多可檢測23個項目），測試速度比傳統(tǒng)實驗室分析儀更快速更有效。

儀器采用高通量設(shè)計，可在2小時內(nèi)檢測45個樣品或675個檢測項目，大大節(jié)省人力物力（至少可節(jié)省5倍人力），節(jié)約時間，節(jié)約檢測費(fèi)用。

樣品經(jīng)處理后可應(yīng)用于多種檢測組合，無須重復(fù)處理樣品。

無須標(biāo)準(zhǔn)品，易于操作，無須專業(yè)技術(shù)人員。

試劑盒提供整套試劑，無隱形或額外成本，只需25ul微量樣本可同時得到多種分析物的檢測結(jié)果，一次最多可檢測54個樣本。

現(xiàn)有的可用于檢測乳制品中激素殘留的生物芯片包括多基質(zhì)生長激素組合（檢測項目包括β-興奮劑、勃地酮、皮質(zhì)類固醇、去甲睪酮、萊克多巴胺、司坦唑、二苯乙烯、群伯龍和玉米赤霉醇）和合成甾醇類組合（檢測項目包括17β-氯睪酮、乙炔雌二醇、促孕激素類和甲基睪酮）。同時，Randox公司將不斷推出新的檢測項目和分析組合，從而使其生物芯片具有很強(qiáng)的擴(kuò)展性。

除激素類檢測組合外，所配套的生物芯片還包括抗菌素組合和藥物濫用組合等不同組合，涵蓋數(shù)百種檢測項目，同時還有更多檢測項目正在研發(fā)中。

檢測平臺可根據(jù)國家相關(guān)政策的變化和藥物殘留檢測目標(biāo)的變化更改檢測項目和檢測參數(shù)，使檢測更加靈活。另外可提供芯片定制服務(wù)，滿足用戶多元化的需求。

乳制品性激素殘留是涉及人類健康的公共衛(wèi)生問題，開發(fā)準(zhǔn)確、快速的檢測方法來解決我國乳制品行業(yè)面臨的難題已成為當(dāng)務(wù)之急。國內(nèi)外乳制品中激素殘留檢測技術(shù)的發(fā)展趨勢是提高檢測方法的靈敏度、提高定性能力，實現(xiàn)多種激素殘留的同時快速測定。因而，在更多地應(yīng)用和發(fā)展色譜法和色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法的同時，也需要建立快速、靈敏的篩選方法，如ELISA試劑盒和生物芯片技術(shù)等。