萬(wàn)建春，郭平，占春瑞

(江西出入境檢驗(yàn)檢疫局綜合技術(shù)中心，南昌 330002)

近年來(lái),食品安全問(wèn)題成為全球高度關(guān)注的焦點(diǎn)，各國(guó)投入大量資源建設(shè)食品安全檢測(cè)機(jī)構(gòu)，并要求相關(guān)實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系以提升其食品安全分析能力的水平。大量新開發(fā)裝備的引入和先進(jìn)檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用使得食品中危害物分析技術(shù)的科技水平越來(lái)越高，并且待測(cè)物分析趨向痕量化，這類分析實(shí)驗(yàn)必然提高對(duì)環(huán)境、器具、試劑、過(guò)程處理的要求。

筆者所在實(shí)驗(yàn)室開展食品中痕量危害物檢測(cè)多年，時(shí)常也會(huì)遇到各種污染影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的情況，往往需要花費(fèi)很大精力來(lái)排查原因。目前食品中痕量危害物分析檢測(cè)的質(zhì)量保證活動(dòng)集中在實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系幾大要素方面，如實(shí)驗(yàn)室環(huán)境與資源、人員資質(zhì)、樣品管理、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)管理、方法選擇和確認(rèn)等，而預(yù)防分析過(guò)程干擾和污染的控制措施研究涉及較少，相應(yīng)的保證措施也比較抽象籠統(tǒng)。筆者通過(guò)對(duì)發(fā)生的實(shí)際污染案例進(jìn)行分析歸納，為食品中痕量危害物分析過(guò)程中污染源的控制提供參考。

1 污染來(lái)源案例分類

1.1 實(shí)驗(yàn)環(huán)境中存在目標(biāo)物

水產(chǎn)品中結(jié)晶紫抗菌藥物殘留的檢測(cè)當(dāng)屬典型例子。結(jié)晶紫是醫(yī)藥工業(yè)中龍膽紫的主要原料，也用于制造墨水、復(fù)寫紙、繪畫顏料、印臺(tái)油、油墨、顏色鉛筆等，在醫(yī)藥學(xué)上作為皮膚消毒防腐藥物使用，也曾在水產(chǎn)養(yǎng)殖中被用來(lái)預(yù)防和治療爛尾病。我國(guó)在水產(chǎn)養(yǎng)殖中已禁用結(jié)晶紫，所以結(jié)晶紫是我國(guó)水產(chǎn)品中獸藥殘留監(jiān)控的主要項(xiàng)目。由于結(jié)晶紫用途廣泛，在很多的物品都存在，分析實(shí)驗(yàn)室也不例外。筆者所在實(shí)驗(yàn)室曾遭遇水產(chǎn)品中結(jié)晶紫殘留分析污染，經(jīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)用記號(hào)筆染料進(jìn)行測(cè)試，發(fā)現(xiàn)其結(jié)晶紫和隱性結(jié)晶紫含量非常高，也含有一定量的孔雀石綠。高華鵬[1]等對(duì)實(shí)驗(yàn)室常用紙制品和油墨筆跡中孔雀石綠、無(wú)色孔雀石綠、結(jié)晶紫、無(wú)色結(jié)晶紫、亞甲基藍(lán)的含量進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)除了實(shí)驗(yàn)濾紙外，其它紙樣品(如打印紙、報(bào)紙、標(biāo)簽紙等)均含有一定水平的目標(biāo)物，其中結(jié)晶紫分布最廣，在簽字筆和雙頭水筆藍(lán)中還發(fā)現(xiàn)含量不低的孔雀石綠。在此研究的基礎(chǔ)上，實(shí)驗(yàn)室對(duì)實(shí)驗(yàn)所用器具進(jìn)行單獨(dú)清洗管理，實(shí)驗(yàn)時(shí)貼不干膠后再做標(biāo)記，實(shí)驗(yàn)完畢后撕下不干膠，再進(jìn)行器具清洗，超聲清洗時(shí)豎放器具，避免內(nèi)壁與外壁交叉接觸，經(jīng)改進(jìn)管理后污染的情況大為改觀。

1.2 實(shí)驗(yàn)器具中存在干擾物

食用油脂中苯并芘殘留分析可采用乙腈飽和正己烷溶解試樣，再用正己烷飽和乙腈將目標(biāo)物萃取到乙腈層，反復(fù)萃取后，濃縮萃取液，用液相色譜–熒光檢測(cè)器檢測(cè)，此提取方法試劑用量不大。采用聚丙烯離心管進(jìn)行溶解萃取操作較為方便，方法開發(fā)初期選擇使用聚丙烯離心管，但實(shí)驗(yàn)表明試劑空白、樣品、樣品添加都有較高的響應(yīng)值，而且響應(yīng)值水平相當(dāng)。經(jīng)分析實(shí)驗(yàn)本底的干擾物可能來(lái)自實(shí)驗(yàn)器具。據(jù)查，聚丙烯加工生產(chǎn)時(shí)通常會(huì)加入抗氧化劑丁納維P[2-(2-羥基-5-甲基苯基)苯并三唑][2]，丁納維P同樣具有剛性共平面的大共軛結(jié)構(gòu)，它能吸收與它本身特征頻率相同的光線而發(fā)射熒光，在熒光檢測(cè)器上產(chǎn)生響應(yīng)，而且丁納維P和苯并芘極性相當(dāng)，在反相色譜分析中其保留時(shí)間也無(wú)較大差異，極易對(duì)苯并芘殘留分析產(chǎn)生干擾。采用玻璃器具代替聚丙烯離心管后，試劑本底非常干凈，干擾現(xiàn)象未再出現(xiàn)。

1.3 常量檢測(cè)嚴(yán)重影響殘留分析

食品安全實(shí)驗(yàn)室分析樣品具有多樣性，往往會(huì)涉及種植、養(yǎng)殖過(guò)程中的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)資料。筆者所在實(shí)驗(yàn)室曾發(fā)生氟苯尼考含量測(cè)定結(jié)果為零，而此后在氯霉素殘留分析中出現(xiàn)嚴(yán)重污染的情況，一系列樣品中都檢出氯霉素有較高的響應(yīng)，甚至出現(xiàn)了20倍線性范圍的標(biāo)準(zhǔn)曲線與橫坐標(biāo)平行的情形，這應(yīng)該是樣品處理過(guò)程發(fā)生了嚴(yán)重的污染，后經(jīng)確認(rèn)是前處理所用試劑遭污染，污染的原因便是測(cè)定氟苯尼考含量的樣品。氟苯尼考[3]是第4代氯霉素類藥物，因其毒性較低，目前已作為氯霉素替代藥物在動(dòng)物養(yǎng)殖過(guò)程中使用，氯霉素因其能大量化工合成而作為氟苯尼考生產(chǎn)的原料藥，此次送檢的樣品為原料藥而非氟苯尼考。污染事件發(fā)生的原因一是實(shí)驗(yàn)室有隔離意識(shí)但受實(shí)際環(huán)境所限，隔離不能完全徹底；另一方面是檢測(cè)人員一直將樣品視為氟苯尼考，未有意識(shí)將其與氯霉素殘留分析實(shí)驗(yàn)區(qū)有效地隔離。

1.4 試劑本底影響殘留分析

2011年塑化劑事件引起社會(huì)廣泛關(guān)注，許多實(shí)驗(yàn)室在檢測(cè)塑化劑中遭遇了實(shí)驗(yàn)本底干擾的困擾。實(shí)驗(yàn)人員都意識(shí)到塑料的普遍使用而致使塑化劑廣泛的存在，方法驗(yàn)證盡量選擇玻璃器具避免干擾，但驗(yàn)證結(jié)果仍出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)本底存在目標(biāo)物干擾的情況，后經(jīng)排查發(fā)現(xiàn)是實(shí)驗(yàn)用正己烷本身含有較高的鄰苯二甲酸二甲酯(DMP)、鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)和鄰苯二甲酸二異辛酯(DEHP)。目前有機(jī)化學(xué)試劑生產(chǎn)運(yùn)輸過(guò)程中很難做到不使用塑料容器，塑化劑自然被帶入到試劑中。實(shí)驗(yàn)室嘗試更換不同廠家的試劑仍無(wú)法避免此種情況。

選擇使用干擾較低的試劑,并在計(jì)算結(jié)果時(shí)扣除試劑空白本底值。對(duì)正己烷進(jìn)行重蒸餾會(huì)有較好的效果，但操作復(fù)雜。

1.5 器具洗滌的影響

實(shí)驗(yàn)室處理的樣品都為盲樣，極有可能存在陽(yáng)性樣品，若與樣品接觸的器具清洗不徹底就可能成為一個(gè)污染源。筆者所在實(shí)驗(yàn)室有一批飼料檢出某獸藥，而此后一段時(shí)間內(nèi)則經(jīng)常出現(xiàn)其它樣品檢測(cè)同一獸藥出現(xiàn)疑似陽(yáng)性結(jié)果；二是某一樣品有較高待測(cè)物檢出，其后分析其它樣品仍然有陽(yáng)性檢出，但殘留量呈逐漸走低情形。這兩起事件均為實(shí)驗(yàn)所有器具接觸陽(yáng)性樣品后清洗不徹底所致。實(shí)驗(yàn)室器具清洗目前是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理的盲點(diǎn)，往往被人們所忽視，因此應(yīng)規(guī)范管理器具洗滌，避免交叉污染。

1.6 制樣環(huán)節(jié)的污染

當(dāng)前食品分析檢測(cè)大多采用微量化學(xué)法，需先對(duì)樣品進(jìn)行制備、縮分獲取實(shí)驗(yàn)所需試樣量。一般包括縮分樣、切小、搗碎、混勻等步驟，制樣設(shè)備共用的情況極易導(dǎo)致交叉污染。筆者所在實(shí)驗(yàn)室有制樣設(shè)備被氯霉素污染的案例，有一批禽蛋樣品有氯霉素檢出，此后其它樣品也有氯霉素檢出但殘留量非常低，試樣經(jīng)復(fù)檢后仍為陽(yáng)性，對(duì)實(shí)驗(yàn)各環(huán)節(jié)進(jìn)行逐一排查，發(fā)現(xiàn)制樣用食品搗碎機(jī)有氯霉素殘留。目前食品安全檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室樣品制備操作缺乏規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)，樣品制備主要依據(jù)方法籠統(tǒng)且有限，而對(duì)如何預(yù)防交叉污染卻無(wú)相應(yīng)操作規(guī)范，因此制定規(guī)范且符合食品中痕量危害物化學(xué)分析實(shí)驗(yàn)室制樣操作程序可有效避免樣品制備過(guò)程中交叉污染的發(fā)生。

2 食品中痕量危害物分析時(shí)預(yù)防污染的措施

我國(guó)目前還未制定針對(duì)痕量危害物分析避免外部污染的質(zhì)量保證措施的技術(shù)規(guī)范，實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范[4]中只籠統(tǒng)規(guī)定了樣品處理應(yīng)避免目標(biāo)物揮發(fā)、環(huán)境污染造成試樣特征值不能充分代表樣品。國(guó)際上已開始重視痕量危害物分析污染的質(zhì)量保證措施，也有具體的控制措施出臺(tái)，如胡文蘭[5]介紹的歐盟農(nóng)藥殘留分析的質(zhì)量控制程序中從樣品傳遞、樣品預(yù)處理、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境、器具清洗、器具質(zhì)量、檢測(cè)方法、環(huán)境中目標(biāo)物等方面的污染預(yù)防都有明確的規(guī)定，這些污染預(yù)防要求被列為質(zhì)量控制程序中的重要內(nèi)容。歐盟2002／657／EC[6]指令也規(guī)定樣品應(yīng)該以有最大機(jī)會(huì)檢測(cè)出物質(zhì)的方式獲得、處理和加工，樣品處理過(guò)程應(yīng)防止偶然污染或丟失分析物的可能性。目前國(guó)內(nèi)對(duì)食品中痕量危害物分析預(yù)防污染的措施少有規(guī)定，因此探討預(yù)防痕量危害物分析污染的控制措施有著十分重要的意義，以下就預(yù)防痕量危害物分析過(guò)程污染的控制措施提出建議。

2.1 人員培訓(xùn)

痕量危害物分析涉及的人員較多，有直接從事分析實(shí)驗(yàn)，也有樣品接收和樣品預(yù)處理的人員，任何環(huán)節(jié)都可能帶入污染，因此培訓(xùn)檢測(cè)流程各環(huán)節(jié)人員掌握痕量危害物分析方法的特點(diǎn)和質(zhì)量保證控制措施顯得十分重要。使涉及人員掌握污染可能來(lái)源，并能采取合理的措施預(yù)防污染的發(fā)生。如識(shí)別樣品類型，采取適合的包裝防止樣品傳遞時(shí)發(fā)生污染，建立科學(xué)合理的制樣操作規(guī)范如易產(chǎn)生粉塵的樣品分類單獨(dú)操作、共用設(shè)備清洗后再行制樣。類似這些易于識(shí)別的污染來(lái)源及控制措施應(yīng)培訓(xùn)相應(yīng)的檢測(cè)人員，使之熟悉掌握。

2.2 方法性能指標(biāo)考查應(yīng)全面

方法學(xué)評(píng)價(jià)指南或標(biāo)準(zhǔn)[4–8]中都強(qiáng)調(diào)方法的特異性考查，一方面這將決定方法的準(zhǔn)確可靠性，另一方面也關(guān)系到方法使用時(shí)抗干擾能力。目前對(duì)方法特異性考查大多采用確證手段檢測(cè)，或盡可能多的考查不同樣品基質(zhì)的內(nèi)源性物質(zhì)的干擾及目標(biāo)物的同簇物、同系物和代謝物的干擾。而考查方法耐用性時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)器具和環(huán)境考查也很重要，當(dāng)有某類實(shí)驗(yàn)器具或環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)有帶入干擾物或污染物時(shí)在方法中加以明確說(shuō)明后，方法也將增加其抗干擾能力。此外采用內(nèi)標(biāo)法定量時(shí)應(yīng)考查內(nèi)標(biāo)物是否存有目標(biāo)物干擾成分。

2.3 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要求和功能區(qū)分隔離

食品中痕量危害物分析實(shí)驗(yàn)室環(huán)境對(duì)分析結(jié)果也有影響[9–11]，如環(huán)境中的塵埃及污染物是痕量分析工作的主要污染源和誤差源，如空氣中硼的存在對(duì)食品中硼元素分析就會(huì)產(chǎn)生干擾。實(shí)驗(yàn)室人員的著裝應(yīng)保持良好的潔凈，實(shí)驗(yàn)人員化妝應(yīng)被限制，而實(shí)驗(yàn)人員可能的個(gè)人用藥情況也應(yīng)在控制范圍內(nèi)。實(shí)驗(yàn)室各功能區(qū)分和隔離也同樣重要，如洗滌區(qū)與實(shí)驗(yàn)區(qū)、樣品存放區(qū)與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)存放區(qū)、樣品預(yù)處理區(qū)與實(shí)驗(yàn)區(qū)等都應(yīng)有合理的布局和有效的隔離。這也是“食品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定條件”[12]中的明確規(guī)定。

2.4 器具清洗和使用

器具洗滌對(duì)預(yù)防污染十分重要[13]。樣品處理后的器具、存放標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和高濃度標(biāo)準(zhǔn)添加實(shí)驗(yàn)器具若清洗不徹底會(huì)對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)造成污染。因此設(shè)計(jì)一種針對(duì)器具種種可能污染途徑的清洗程序是器具避免污染的重要手段，如存放標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)器具、盛放高濃度標(biāo)準(zhǔn)添加樣品器具、不同污染程度的器具都應(yīng)分類清洗，并根據(jù)器具材質(zhì)和實(shí)驗(yàn)用途不同采用浸泡、刷洗、超聲、煅燒等不同方式或組合方式進(jìn)行清洗清潔。選擇使用實(shí)驗(yàn)器具時(shí)也應(yīng)考慮污染是否可能發(fā)生，如有嚴(yán)重擦痕或蝕刻的玻璃器具應(yīng)慎用。

3 結(jié)語(yǔ)

痕量危害物分析是一項(xiàng)縝密的化學(xué)分析工作，同時(shí)因其分析特點(diǎn)的原因易受環(huán)境的干擾和各種來(lái)源的污染，因此識(shí)別分析實(shí)驗(yàn)過(guò)程中潛在的污染來(lái)源，采取科學(xué)合理的控制措施才能保證痕量危害物分析實(shí)驗(yàn)正常進(jìn)行，以保證最終得到準(zhǔn)確可靠的分析結(jié)果。

[1]高華鵬，李永夫，劉海山，等.孔雀石綠等染料物質(zhì)殘留檢測(cè)過(guò)程中實(shí)驗(yàn)室污染的來(lái)源分析[J].中國(guó)獸藥雜志，2008，42(8):21–25.

[2]SN／T 1504.1–2005 食品容器、包裝用塑料原料 第1部分聚丙烯均聚物中酚類抗氧化劑和芥酰胺爽滑劑的測(cè)定方法 液相色譜法[S].

[3]張建民，鐘超平.獸用廣譜抗生素氟苯尼考的合成(一)[J].國(guó)外醫(yī)藥抗生素分冊(cè)，1999，20(1): 13–16.

[4]GB／T 27404–2008 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測(cè)[S].

[5]胡文蘭，張志恒.歐盟農(nóng)藥殘留分析的質(zhì)量控制程序.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志[J].2005，15(2): 118–122.

[6]EN 2002／657／EC Implementing Council Directive 96／23／EC Concerning the Performance of Analytical Methods and the Interpretation of Results 2002 [S].

[7]國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，質(zhì)檢食函〔2011〕398號(hào) 進(jìn)出口食品安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)控實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制指南[S].

[8]國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，質(zhì)檢食函〔2011〕405 號(hào) 出口動(dòng)物源性食品安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)控實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制指南[S].

[9]占永革，孫東衛(wèi)，林善興，等.提高痕量分析實(shí)驗(yàn)室內(nèi)空氣潔凈度的意義[J].現(xiàn)代測(cè)量與實(shí)驗(yàn)室管理，2004(1): 48–50；

[10]許東，楊廷璋.實(shí)驗(yàn)分析過(guò)程中的污染與控制[J].職業(yè)衛(wèi)生與病傷，1990，1(5): 35–37

[11]龍建林.淺談痕量分析的質(zhì)量保證[J].達(dá)縣師范高等?？茖W(xué)校學(xué)報(bào) (自然科學(xué)版 )，2006，16(2): 16–18 ；

[12]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部，衛(wèi)監(jiān)督發(fā)[2010]29號(hào) 食品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定條件[S].

[13]高鵬.痕量分析中容器的選擇與洗滌[J].油氣田環(huán)境保護(hù)，2002，12(1): 41–43.