楊 靜

(南京中醫(yī)藥大學，江蘇 南京 210029)

腫瘤多藥耐藥(multidrug resistance,MDR)是腫瘤細胞對結構、細胞靶點和作用機制不同的抗癌藥物同時產生耐藥的現象，是導致化療失敗的主要原因。其主要機制是多藥耐藥基因編碼的P-gp高表達與腫瘤細胞內的藥物結合并將其排出細胞外，降低細胞內藥物濃度,減弱藥物對腫瘤細胞的殺傷抑制作用[1]。現對近年來中藥逆轉乳腺癌MCF-7/ADM多藥耐藥性的實驗方面研究，總結如下。

1 中藥單體

1.1 β-攬香烯(β-elemene，β-ELE) β-攬香烯是從中草藥溫莪術的揮發(fā)油中提取的國家二類廣譜抗腫瘤藥物。胡軍等[2]研究發(fā)現無毒劑量的β-欖香烯乳劑(6 μg/mL)能顯著降低化療藥物阿霉素(ADM)對乳腺癌耐藥細胞株MCF-7/ADM細胞的IC50，明顯增加耐藥細胞內藥物濃度。非細胞毒性劑量(6 μg/mL)及低毒劑量(13 μg/mL)的β-ELE對MCF-7/ADM細胞的逆轉倍數分別為1.4倍及2.2倍。β-攬香烯作用后，MCF-7/ADM的細胞內ADM濃度明顯增加(P<0.01),Bcl-2由90.2%降至70.0%(P<0.05)。結果提示β-ELE可部分逆轉MCF-7/ADM細胞的耐藥性，逆轉機制與增加細胞內藥物積累及降低Bcl-2的表達有關[3]。

1.2 砷劑 砷劑主要是指雄黃[主要成分為硫化砷(AsS)]和砒霜[有效成分為三氧化二砷(As2O3)]。砷化合物能與組織蛋白質中的巰基(-SH)結合使多種酶失活。谷胱苷肽S-轉移酶(GSTs)酶的催化活性部位有巰基參與砷劑還可與次巰基結合，部分逆轉耐藥。三氧化二砷在非毒性劑量可增加MCF-7/ADM細胞內ADM的含量，逆轉倍數為2.1倍；非毒性、低毒性劑量作用前后GST-酶活性有顯著改變、GST-mnRNA的表達水平也呈不同程度的下調，結果提示三氧化二砷可部分逆轉人乳腺癌MCF-7/ADM細胞對ADM的耐藥性，其逆轉機制可能與細胞內GST-酶活性的改變有關[4]。15、25 μg/mL的雄黃對MCF-7/ADM的逆轉倍數分別為2.0倍和2.8倍，并能明顯抑制mdr-1基因的轉錄水平。結果提示雄黃可以逆轉MCF-7/ADM細胞的多藥耐藥性，并呈劑量依賴性，逆轉機制可能為下調了mdr-1基因的表達[5]。

1.3 雄黃聯合β-欖香烯 胡軍等[6]研究發(fā)現雄黃與β-欖香烯聯合用藥對MCF-7/ADM的耐藥性有明顯的逆轉作用，逆轉倍數約4.2倍,明顯好于二者單獨應用(P<0.01)；MCF-7/ADM細胞內阿霉素濃度明顯增加(P<0.01)；P-gp及Bcl-2表達均明顯降低(P<0.01)。結果提示雄黃與β-欖香烯聯合用藥可顯著增強對MCF-7/ADM細胞的耐藥逆轉作用，逆轉機制與增加細胞內藥物積累，降低P-gp、Bcl-2的表達有關。

1.4 川芎嗪 研究[7]報道中藥鈣通道阻滯劑川芎嗪(TMP)能下調腫瘤細胞P-gp的表達，提高細胞內化療藥物濃度，逆轉腫瘤細胞耐藥。解霞等[8]研究發(fā)現非細胞毒性劑量(320 mg/L)及低毒劑量(1250 mg/L)川芎嗪均能顯著降低MCF-7/ADM 的IC50(P<0.01)，逆轉倍數分別為2.13倍和2.82倍，均能顯著增加耐藥細胞內ADM的濃度(P<0.01)。320 mg/L川芎嗪能顯著增加耐藥細胞的凋亡百分率(P<0.01)。結果提示川芎嗪具有部分逆轉人乳腺癌 MCF-7/ADM 細胞對阿霉素的耐藥性，其逆轉機制與增加細胞內 ADM 濃度有關。李海霞等[9]將TMP與ADM聯合作用于MCF-7/Adr，與單用ADM相比，ADM對細胞的殺傷效應及細胞內ADM熒光強度明顯升高(P<0.05)，且呈劑量依賴性；與對照組比較，TMP能抑制ADM對細胞P-gp、EMMPRIN、MMP2和MMP9蛋白和mRNA水平的上調作用。結果提示TMP能有效逆轉MCF-7/Adr耐藥，可能的機制為抑制了ADM對細胞P-gp、EMMPRIN、MMP2和MMP9蛋白和mRNA水平的上調。

1.5 補骨脂 劉敘儀等[10]研究發(fā)現補骨脂提取物R3能明顯增加MCF-7/ADM對ADM的敏感性，且與異博定有協(xié)同作用，在非細胞毒性劑量下能使 MCF-7/ADM對阿霉素的濃度升高，逆轉乳腺癌MCF-7/ADM的多藥耐藥性。補骨脂素(psoralen)為呋喃香豆素類化合物，對多種小鼠肉瘤、艾氏腹水瘤、肝癌等有生長抑制和體外細胞毒作用[11]。蔡宇等[12]觀察了補骨脂素對MCF-7多藥耐藥細胞株Bc1-2基因蛋白表達影響，結果發(fā)現Bc1-2在正常MCF-7細胞中表達為陰性，而在MCF-7/ADR細胞表達陽性，提示Bc1-2過度表達可導致多藥耐藥(MDR)的產生，同時發(fā)現補骨脂素能降低MCF-7/ADR細胞中凋亡抑制基因Bc1-2的表達，達到提高化療敏感性作用，可推測Bc1-2可能是補骨脂素逆轉MDR的靶點之一 。

1.6 人參皂苷Rh2張暉等[13]研究發(fā)現人參皂苷Rh2可以顯著降低MCF-7/ADM的ADM IC50，Rh2和維拉帕米可以增加MCF-7/ADM細胞內羅丹明123熒光表達率，Rh2比維拉帕米抑制羅丹明123外排作用更強，Rh2對MCF-7/ADM細胞mdrl mRNA表達及P-gp表達沒有影響。結果提示人參皂苷Rh2可有效逆轉P-gp介導乳腺癌MCF-7/ADM的多藥耐藥性。

1.7 三七總皂苷(PNS) 劉麗麗等[14]研究發(fā)現PNS可增強阿霉素對MCF-7/ADM的細胞毒作用，PNS 50、100、200 μg/mL分別作用于乳腺癌耐藥細胞48 h后，耐藥細胞株的IC50分別降至17.85，13.80，11.63 μg/mL。PNS(50、100、200 μg/mL)均可下調多藥耐藥基因mdr-1及其表達的糖蛋白P-gp的量，且隨PNS濃度的增加，下調作用更加明顯。結果提示三七總皂苷能夠部分逆轉耐藥細胞MCF-7/ADM的多藥耐藥性，呈劑量依賴性，可能的逆轉機制為下調了MCF-7/ADM的mdr-1和P-gp。

1.8 白藜蘆醇 馮磊等[15]將白藜蘆醇作用MCF-7/ADM 72 h之后，發(fā)現細胞增殖明顯下降并呈劑量依賴關系，使MCF-7/ADM細胞阻滯于G0/G1期。結果提示白藜蘆醇可能是一種細胞周期蛋白依賴性激酶(Cdk2)的抑制劑，同時通過作用于細胞的骨架結構蛋白質來干擾細胞的有絲分裂過程，使細胞周期延長從而抑制MCF-7/ADM的增殖。

1.9 防己水煮液 現代藥理研究[16]發(fā)現防己提取物中是一類高效、低毒的MDR逆轉劑。李冬梅等[17]觀察了防己水煮液對MCF-7/ADM多藥耐藥細胞的逆轉作用，并對其有效成分作初步分析，結果提示0.25 g/mL阿霉素為防己水煮液逆轉 MCF-7/ADM多藥耐藥細胞的敏感濃度點；對 MCF-7/ADM多藥耐藥細胞起逆轉作用的有效成分大部分集中在經正丁醇萃取所得相和水相中，而極性低的有機溶劑相中基本不含可以逆轉 MCF-7/ADM多藥耐藥細胞的有效組分。

2 中藥復方

2.1 溫下方 溫下方為山東中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院院內制劑，歐陽兵等[18]研究發(fā)現溫下方含藥血清可提高MCF-7/ADM對化療藥的敏感性，增加胞內化療藥物濃度，使P-gp表達下降，P53表達增高，胞內鈣濃度及線粒體膜電位均降低，結果提示溫下方可部分逆轉MCF-7/ADM耐藥，其逆轉機制可能與誘導耐藥細胞凋亡密切相關。

2.2 槐耳顆粒 槐耳是一種藥用真菌，槐耳顆粒是從槐耳菌質中提取并作為國家中藥一類新藥，可促進腫瘤細胞凋亡和增強免疫力，也能逆轉肺癌耐藥細胞株的耐藥性[19]。李戎等[20]研究發(fā)現非細胞毒性劑量(0.01 mg/mL)的槐耳顆粒能顯著降低ADM對MCF-7/ADM的IC50，其逆轉倍數為 5.1倍；0.01 mg/mL的槐耳顆粒使MCF-7/ADM細胞的耐藥基因mdr-1、mdr-1的mRNA以及相應的P-gp、MRP蛋白的表達水平均明顯下調。結果提示非細胞毒性劑量槐耳顆?？赡孓DMCF-7/ADM的耐藥性，逆轉機制和其耐藥基因mdr-1、mdr-1的mRNA以及相應的P-gp、MRP蛋白的表達水平下調相關。

2.3 復康靈膠囊 陳前軍等[21]觀察了復康靈膠囊對新輔助化療乳腺癌近期療效以及對耐藥基因p170、GST-π的調控，結果:治療組腫瘤完全緩解率及部分緩解率，與對照組比較，具有統(tǒng)計學意義。治療組p170陽性率，與對照組比較，具有統(tǒng)計學意義。結果提示扶正解毒中藥可以增強化療效果，而調控耐藥基因的表達是其作用機制之一。

3 展望

乳腺癌耐藥是乳腺癌治療的一大難題，目前研究主要集中在對耐藥基因和耐藥蛋白的調控研究等方面。隨著中醫(yī)藥對乳腺癌化療的減毒增效及逆轉腫瘤多藥耐藥性研究的深入，開發(fā)逆轉腫瘤多藥耐藥性的高效、低毒中藥在中醫(yī)腫瘤研究方面有重要意義。目前中藥逆轉MDR尚處于實驗階段，仍需進行大樣本、多中心的隨機臨床試驗進一步證實中藥在逆轉MDR方面的作用。

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