許 欣，于成功

(1.南京中醫(yī)藥大學中西醫(yī)結合鼓樓臨床學院，江蘇 南京 210029；2.南京大學醫(yī)學院附屬鼓樓醫(yī)院 消化科,江蘇 南京 210008)

潰瘍性結腸炎(UC)，病變主要累及黏膜和黏膜下層，以腹瀉、腹痛、黏液膿血便等為主要表現(xiàn)。目前認為UC與免疫功能紊亂、遺傳、環(huán)境等因素相關。屬于祖國醫(yī)學“泄瀉”“痢疾”“腸風”等范疇。中醫(yī)采用中醫(yī)藥治療本病具有療效確切、復發(fā)率低、毒副作用小等特點，故應用較多?，F(xiàn)就中醫(yī)藥治療UC作用機制的實驗研究進展總結如下。

1 從免疫機制角度治療UC

1.1 免疫調(diào)節(jié) 免疫調(diào)節(jié)功能紊亂可引起UC。田軍彪等[1]用芪仙安腸方治療三硝基苯磺酸(TNBS)誘導的UC模型大鼠發(fā)現(xiàn)，芪仙安腸方給藥組補體3、補體4含量明顯提高，免疫球蛋白(Ig) A、IgG含量降低，提示作用機制可能與免疫調(diào)節(jié)有關。

鄭學寶等[2]研究黃芩湯對濕熱型UC大鼠CD4+細胞及其共刺激分子的影響發(fā)現(xiàn)，黃芩湯可下調(diào)模型大鼠結腸共刺激分子CD28、OX40的表達，并使效應CD4+細胞活化抑制因子CD152維持在較高水平，從而下調(diào)過度激活的效應CD4+細胞。

叉頭狀/翅膀狀螺旋轉錄因子(forkhead/winged helix transcription factor，F(xiàn)oxp3)是新近發(fā)現(xiàn)的轉錄因子，在調(diào)控調(diào)節(jié)性T細胞(regulatory T cell，Treg)的分化發(fā)育和功能上有重要作用。原皓等[3]研究甘草酸二銨(DG)對UC模型大鼠的療效及對大鼠外周血單個核細胞中Foxp3 mRNA表達的影響時發(fā)現(xiàn)，DG能顯著改善UC癥狀，通過上調(diào)Foxp3 mRNA的表達抑制自身反應性T淋巴細胞的增殖可能是緩解病情的機制之一。

Toll樣受體(Toll-like receptors，TLRs)是定位于細胞表面的跨膜蛋白，目前已知哺乳動物存在11種TLR。其中TLR-4識別脂多糖，向胞內(nèi)傳遞活化信號激活核因子(NF)-κB，從而促進多種炎性細胞因子的轉錄。顧培青等[4]發(fā)現(xiàn)清腸化濕方可抑制UC模型大鼠結腸黏膜TLR-4、NF-κBp65蛋白的表達發(fā)揮治療作用。梁麗等[5]用TNBS法復制UC大鼠模型,取脾臟和結腸組織檢測β2腎上腺素受體(β2AR)、β-arrestin2、NF-κB p65的表達，結果發(fā)現(xiàn)中藥烏梅丸可升高大鼠淋巴細胞β2AR、β-arrestin2的表達水平，降低大鼠結腸黏膜中NF-κB p65的水平，發(fā)揮對免疫功能的調(diào)節(jié)作用。

施斌等[6]檢測UC大鼠結腸黏膜固有層淋巴細胞凋亡及固有層淋巴細胞Bcl-2和Bax蛋白的表達，結果發(fā)現(xiàn):模型組結腸黏膜固有層淋巴細胞凋亡減慢，Bcl-2表達率增加，Bax表達率下降。中藥清腸栓可能通過調(diào)節(jié)Bcl-2及Bax之間的比例變化，誘導淋巴細胞凋亡，發(fā)揮對UC的治療作用。

1.2 對細胞因子的影響 細胞因子在調(diào)節(jié)腸道免疫中發(fā)揮著重要作用，UC患者存在促炎細胞因子與抗炎細胞因子的平衡失調(diào)。陳江等[7]用TNBS建立大鼠UC模型,予中藥清腸栓治療。發(fā)現(xiàn)清腸栓各劑量組可溶性白細胞介素受體(sIL-R)2、6的水平降低，大、中劑量組IL-2R、IL-6R mRNA表達降低，從而推測清腸栓治療UC機制與降低sIL-2R、sIL-6R水平，下調(diào)IL-2R、IL-6R mRNA表達，抑制T淋巴細胞活化增殖，減少炎癥遞質(zhì)產(chǎn)生有關。劉杰民等[8]用健脾益腸散合固本保元腹袋治療UC患者,經(jīng)治療后，臨床癥狀有效緩解，且患者血清中IL-8、腫瘤壞死因子(TNF)-α水平下降。

2 抗炎作用

何愛明等[9]用TNBS灌腸建立大鼠UC模型,發(fā)現(xiàn)模型組大鼠中性粒細胞趨化因子-1(CINC-1)及其受體CXC趨化因子受體2(CXCR2) mRNA和蛋白表達呈明顯上升趨勢，經(jīng)潰結靈干預后，CINC-1、CXCR2 mRNA及其蛋白表達呈下降趨勢,提示潰結靈通過干預上述指標的表達抑制中性粒細胞趨化，發(fā)揮治療效應。施斌等[10]觀察清腸栓對UC模型大鼠結腸黏膜粒-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)和粒細胞集落刺激因子(G-CSF)的影響,發(fā)現(xiàn)清腸栓組GM-CSF和G-CSF mRNA及蛋白表達較模型組降低，從而推測清腸栓治療UC的機制是調(diào)控GM-CSF、G-CSF的表達,抑制中性粒細胞浸潤。孫政等[11]分別采用白頭翁湯、柳氮磺胺吡啶片治療UC患者，治療后發(fā)現(xiàn)2組患者外周血中性粒細胞(PMN)凋亡率明顯升高,且以白頭翁組改變更顯著，說明中藥白頭翁湯療效確切，可能機制與調(diào)節(jié)患者PMN凋亡相關。

3 影響血液流變學

胡連海等[12]觀察灌腸方對UC患者的臨床療效及對血清D-二聚體(D-D)、血小板計數(shù)(PLT)、血小板平均體積(MPV)的影響發(fā)現(xiàn)，治療組臨床癥狀改善優(yōu)于對照組，且治療組患者血清D-D和PLT水平降低、MPV水平升高較對照組顯著，提示灌腸方治療UC的作用機制可能與降低血清D-D和PLT水平以及升高MPV，改善患者血液高凝狀態(tài)相關。安賀軍等[13]發(fā)現(xiàn)以益氣活血解毒立法的中藥潰結復發(fā)方,可有效降低UC結腸組織P-選擇素水平，從而阻抑血小板活化，抗UC復發(fā)。

4 修復腸黏膜

李燕舞等[14]采用TNBS法復制UC大鼠模型，以大鼠結腸黏膜腸三葉因子(ITF) mRNA、糖黏蛋白(MUC2)、轉化生長因子(TGF)-α為檢測指標，結果提示:與模型組相比，中藥潰結靈組3、7、14 d ITF mRNA、MUC2蛋白表達均明顯增高，TGF-α表達呈現(xiàn)逐步增高過程。潰結靈治療UC機制可能與上調(diào)ITF基因、MUC2蛋白及TGF-α相關。潘鋒等[15]發(fā)現(xiàn)馬齒莧多糖可緩解UC，效應機制可能為下調(diào)半胱氨酸天冬氨酸酶-3(Caspase-3)、Caspase-8的表達，延緩腸上皮細胞凋亡。盧璐等[16]觀察到中藥清腸栓能有效抑制UC大鼠結腸通透性的升高，改善腸黏膜屏障功能，促進潰瘍愈合。

5 其他

李海龍等[17]采用異種異體結腸黏膜組織致敏法和乙酸局部灌腸相結合的方法制造UC大鼠模型，實驗發(fā)現(xiàn)久瀉靈沖劑可明顯降低結腸組織中MDA，提高GSH-Px、SOD的活性，提示作用機制可能與抗氧自由基損傷、增強抗氧化酶活性有關。秦建梅等[18]發(fā)現(xiàn)半夏瀉心湯合四神丸加減方可降低UC大鼠結腸組織中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)水平,對模型大鼠有顯著的干預作用。李麗秋等[19]發(fā)現(xiàn)復方樹舌中藥可作為益生元調(diào)節(jié)腸道菌群失調(diào)及黏膜的修復，對UC療效顯著。朱凌宇等[20]發(fā)現(xiàn)三七提取物可上調(diào)血管內(nèi)皮生長因子、含有激酶插入?yún)^(qū)域的受體、fms樣酪氨酸激酶受體和低氧誘導因子-1表達促進血管生成，從而治療UC。秦震聲等[21]采用TNBS/乙醇溶液灌腸加束縛法制作UC肝郁脾虛大鼠模型，發(fā)現(xiàn)舒肝健脾顆?？烧{(diào)節(jié)模型大鼠結腸組織中血管活性腸肽(VIP)的濃度發(fā)揮治療作用。

綜上，中醫(yī)藥治療UC具有多靶點作用的特點，但也應該看到中醫(yī)藥治療UC作用機制的實驗研究尚存在不足之處。比如中醫(yī)選方用藥的特色是辨證論治，而UC動物模型的制作與中醫(yī)的“證”并不一定吻合；目前多從整個方劑角度研究中藥的作用機制，對中藥單體的研究較少，且究竟是中藥的何種成分對何靶點發(fā)揮作用尚不十分明確；另外，科研設計尚欠嚴謹，實驗研究亦較少運用基因工程、分子生物學等技術，故作用機制的研究尚不深入，部分實驗結果缺乏可信度。以上不足一定程度上影響到中藥的臨床推廣以及向更廣闊的平臺發(fā)展。因此應盡量制作符合中醫(yī)證候的動物模型，盡可能明確中藥具體的作用成分與靶點，依據(jù)UC的發(fā)病機制進行科學的實驗設計，運用新的實驗技術，期待通過以上努力中醫(yī)藥實驗研究能有新的突破，中醫(yī)藥事業(yè)得到深遠的發(fā)展。

[1]田軍彪,單兆偉,劉建平,等.芪仙安腸方對大鼠潰瘍性結腸炎的治療作用及機制[J].河北中醫(yī),2008,30(4):424-427.

[2]鄭學寶,封艷玲,劉洪波,等.黃芩湯對濕熱型潰瘍性結腸炎大鼠CD4+T細胞及其共刺激分子的影響[J].中國實驗方劑學雜志,2011,17(1):169-172.

[3]原皓,崔慎茹,李時光.甘草酸二銨對潰瘍性結腸炎大鼠Foxp3 mRNA表達的影響[J].世界華人消化雜志,2010,18(31):3301-3305.

[4]顧培青,沈洪,劉麗,等.清腸化濕方對潰瘍性結腸炎模型大鼠結腸TLR-4、NF-κBp65蛋白表達的影響[J].中國中醫(yī)急癥,2010,19(1):99-101.

[5]梁麗,范恒,段雪云,等.β2AR、β-arrestin2、NF-κBp65在潰瘍性結腸炎大鼠中的表達及烏梅丸的干預作用[J].世界華人消化雜志,2010,18(16):1650-1655.

[6]施斌,謝建群,張濤,等.清腸栓對大鼠潰瘍性結腸炎淋巴細胞凋亡調(diào)控蛋白Bcl-2及Bax表達的影響[J].河南中醫(yī),2008,28(12):28-30.

[7]陳江,馬貴同,謝建群,等.清腸栓對大鼠潰瘍性結腸炎白細胞介素受體表達的影響[J].中國中西醫(yī)結合消化雜志,2009,17(5):309-312.

[8]劉杰民,黃盛文,董菲洛,等.健脾益腸散合固本保元腹袋治療潰瘍性結腸炎的療效及機制[J].吉林中醫(yī)藥,2011,31(1):42-43.

[9]何愛明,林董,林世明.潰結靈對潰瘍性結腸炎大鼠結腸黏膜的CINC-1及其受體CXCR2表達的作用[J].復旦學報(醫(yī)學版),2010,37(3):310-314.

[10]施斌,謝建群,袁建業(yè),等.清腸栓對急性潰瘍性結腸炎大鼠結腸黏膜GM-CSF及G-CSF的影響[J].上海中醫(yī)藥大學學報,2009,23(4):68-70.

[11]孫政,祝斌.白頭翁湯對潰瘍性結腸炎患者外周血PMN凋亡和IL-6、IL-8的影響[J].廣東醫(yī)學院學報,2010,28(4):378-379.

[12]胡連海,肖成,李國棟,等.灌腸方治療潰瘍性結腸炎的臨床療效及對血清D-二聚體和血小板參數(shù)的影響[J].遼寧中醫(yī)雜志,2010,37(10):1958-1959.

[13]安賀軍,王新月,于玫,等.益氣活血解毒法對潰瘍性結腸炎結腸組織血小板活化的影響[J].吉林中醫(yī)藥,2011,31(5):471-474.

[14]李燕舞,黃秋凌,杜群,等.潰結靈對潰瘍性結腸炎大鼠結腸黏膜ITF、MUC2、TGF-α動態(tài)變化的影響[J].中藥藥理與臨床,2010,26(6):68-70.

[15]潘鋒,張濤,陳建永.馬齒莧多糖干預大鼠潰瘍性結腸炎Caspase-3 Caspase-8表達的研究[J].中華中醫(yī)藥學刊,2010,28(8):1639-1641.

[16]盧璐,謝建群.中藥清腸栓對潰瘍性結腸炎大鼠結腸通透性的影響[J].中國中西醫(yī)結合雜志,2010,30(10):1087-1090.

[17]李海龍,吳玉泓,楚惠媛,等.久瀉靈沖劑對潰瘍性結腸炎大鼠結腸病變氧化損傷的影響[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2009,16(9):29-31.

[18]秦建梅,程小麗,安方玉,等.半夏瀉心湯合四神丸加減方對潰瘍性結腸炎大鼠NO、NOS 及TNF-α的影響[J].甘肅中醫(yī),2010,23(6):29-31.

[19]李麗秋,王春敏,楊春佳,等.實驗性大鼠潰瘍性結腸炎菌群失調(diào)的診斷及復方樹舌的治療觀察[J].中國微生態(tài)學雜志,2009,21(6):522-523,526.

[20]朱凌宇,顧賢,馬貴同,等.三七提取物對三硝基苯磺酸誘導潰瘍性結腸炎大鼠結腸血管生成的研究[J].中國中西醫(yī)結合消化雜志,2008,16(2):99-102.

[21]秦震聲,王軼,趙耀,等.舒肝健脾顆粒對潰瘍性結腸炎大鼠模型VIP和IL-10水平的影響[J].吉林中醫(yī)藥,2007,27(3):48-50.