李有富 李魏林

湖北省襄陽市鐵路中心醫(yī)院藥劑科，湖北襄陽 441000

復(fù)方氯霉素洗劑中氯霉素含量測定方法的探討與改進(jìn)

李有富 李魏林▲

湖北省襄陽市鐵路中心醫(yī)院藥劑科，湖北襄陽 441000

目的 探討與改進(jìn)復(fù)方氯霉素洗劑中氯霉素的含量測定方法。 方法 采用紫外分光光度法在278 nm處直接測定復(fù)方氯霉素洗劑的吸收值，扣除此處干擾成分水楊酸的吸收值，建立公式計(jì)算氯霉素的含量，并將結(jié)果與化學(xué)滴定法測定結(jié)果相比較。 結(jié)果 氯霉素用化學(xué)滴定法測定終點(diǎn)不易準(zhǔn)確判斷，改進(jìn)為紫外分光光度法則更準(zhǔn)確、簡便。 結(jié)論 本法簡便、快速、準(zhǔn)確，適用于醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑的快速質(zhì)量控制。

紫外分光光度法；氯霉素；含量測定；探討

復(fù)方氯霉素洗劑是臨床常用的外用制劑之一，具有止癢、殺菌、溶解脂肪酸的作用，用于治療痤瘡、酒糟鼻、脂溢性伴毛囊炎型皮炎等效果良好。復(fù)方氯霉素洗劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于《中國醫(yī)院制劑規(guī)范》西藥制劑第二版，其處方組成為氯霉素 10 g、水楊酸 20 g、薄荷腦 5 g、甘油 25 mL、乙醇 800 mL，蒸餾水加至1 000 mL[1]。氯霉素的最大吸收波長為278 nm，而水楊酸在278 nm處的吸收對氯霉素的測定產(chǎn)生干擾，故該藥品標(biāo)準(zhǔn)中棄用了紫外分光光度法測定氯霉素含量，而是采用亞硝酸鈉滴定法。但該滴定法操作繁瑣，且用碘化鉀淀粉試紙劃痕判斷終點(diǎn)容易產(chǎn)生誤差。本實(shí)驗(yàn)依據(jù)吸收度加和性原則，測定復(fù)方氯霉素洗劑在278 nm處的總吸收，然后扣除此處水楊酸的吸收，由此計(jì)算所得氯霉素的含量測定結(jié)果準(zhǔn)確、穩(wěn)定，方法簡便、快速，適用于醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑的快速質(zhì)量控制。

1 儀器與試藥

UV757CRT型紫外分光光度計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；水楊酸 （中國食品藥品檢定研究院，批號：100106-201104）；氯霉素（國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)網(wǎng)，ASB-00003428-001）；復(fù)方氯霉素洗劑（自制三批，批號 120506、120515、120523）；乙醇為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 水楊酸在278 nm波長處的吸收特征

水楊酸的最大吸收波長為230 nm，與氯霉素在278 nm處的吸收有較大重疊[2-6]，故本文考察水楊酸在278 nm處的吸收特征。按照《中國醫(yī)院制劑規(guī)范》，水楊酸采用酸堿中和滴定法測定含量簡單、快速、準(zhǔn)確，仍予采用。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：分別精密稱定一定量干燥至恒重的水楊酸對照品，加乙醇適量溶解并用純化水稀釋成約10、20、30、40、50 μg/mL的系列對照品溶液，以純化水為空白，于278 nm波長處分別測定吸收度A，見表1。

表1 水楊酸的線性考察結(jié)果

由表1得回歸方程A=0.010 8C+0.038 7，R=0.999，表明水楊酸在10.2～50.8 μg/mL的范圍內(nèi)，其紫外吸收與濃度呈良好的線性關(guān)系。

2.2 氯霉素的紫外分光光度法測定

2.2.1 樣品溶液的配制和測定

2.2.1.1 分別精密量取三批批號為120506、120515和120523的復(fù)方氯霉素洗劑各5 mL，置100 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻；精密量取2 mL置100 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻作為樣品溶液。照分光光度法（中國藥典2010年版二部附錄ⅣA）在278 nm波長處測定吸收度A總，見表2。

2.2.1.2 分別精密量取批號為120506、120515和120523的復(fù)方氯霉素洗劑各5 mL，按照《中國醫(yī)院制劑規(guī)范》所示方法操作，加中性醇10 mL，酚酞指示液2滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1 mol/L）滴定至溶液顯粉紅色，即得。將滴定結(jié)果經(jīng)稀釋倍數(shù)代換后代入其回歸方程得其吸收度A水，見表3。

表2 復(fù)方氯霉素洗劑在278 nm處的紫外吸收

表3 復(fù)方氯霉素洗劑中水楊酸在278 nm處的紫外吸收

2.2.2 氯霉素含量的計(jì)算

氯霉素用紫外分光光度法測定已經(jīng)比較完善，氯霉素酊的含量正是采用此法測定[7-8]。為避免水楊酸的吸收干擾，《中國藥典》2010年版中已把測定方法升級為HPLC法，但其原理仍然基于278 nm波長處的紫外吸收。根據(jù)以上藥品標(biāo)準(zhǔn)可知，氯霉素在278 nm波長處的吸收系數(shù)（）為 298。

根據(jù)吸收度的加和性原則，A總=A氯+A水，故A氯=A總-A水

根據(jù)朗伯-比爾定律，A氯=×C氯×L

用以上公式所得C氯×稀釋倍數(shù)1 000，即得復(fù)方氯霉素洗劑中氯霉素的含量測定結(jié)果，見表4。

表4 復(fù)方氯霉素洗劑中氯霉素的含量（紫外分光光度法）

2.3 加樣回收率試驗(yàn)

精密量取已知氯霉素含量為0.97%、水楊酸含量為2.05%的復(fù)方氯霉素洗劑5 mL，分別置3個(gè)100 mL量瓶中，設(shè)為低、中、高3個(gè)濃度組，并依次精密加入約20、30、40 mg干燥至恒重的氯霉素對照品，每組分設(shè)3個(gè)平行，加適量乙醇溶解后加水稀釋至刻度，搖勻；精密量取2 mL置100 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。照2.2項(xiàng)下方法測定，以最后定容的樣品溶液計(jì)算加樣回收率，見表5。

由加樣回收試驗(yàn)結(jié)果可知，采用本實(shí)驗(yàn)所述的紫外分光光度法測定氯霉素的含量，其準(zhǔn)確度高，符合測定要求。

2.4 氯霉素兩種含量測定方法的比較

化學(xué)滴定法：精密量取批號分別為120506、120515和120523的復(fù)方氯霉素洗劑25 mL，按照《中國醫(yī)院制劑規(guī)范》所示方法操作，置100 mL錐形瓶中，加鋅粉1 g，鹽酸（1→2）15 mL，搖勻，置水浴上加熱 15 min，放冷，過濾，濾器用20 mL蒸餾水分4次洗滌，洗液與濾液合并，加鹽酸（1→2）10 mL，加溴化鉀 2 g，用亞硝酸鈉滴定液（0.1 mol/L）滴定，并不斷強(qiáng)力攪拌，至用玻璃棒蘸取少許劃過碘化鉀淀粉試紙即呈藍(lán)色條痕，即為終點(diǎn)。將測定結(jié)果與紫外分光光度法相比較，見表6。

表5 加樣回收率試驗(yàn)

表6 兩種含量測定方法的比較

兩種測定方法比較可知，化學(xué)滴定法操作比較繁瑣費(fèi)時(shí)，且用碘化鉀淀粉試紙劃痕判斷終點(diǎn)容易產(chǎn)生較大誤差，造成測定結(jié)果不準(zhǔn)確，而用紫外分光光度法測定，排除了人為判斷因素，所得數(shù)據(jù)更準(zhǔn)確、更均一。

3 討論

《中國醫(yī)院制劑規(guī)范》出版于20世紀(jì)90年代，有些制劑的含量測定方法仍沿用相對古老的化學(xué)滴定法滴定，與近年來藥物制劑檢測技術(shù)飛速發(fā)展的形勢極為不符，也給藥品生產(chǎn)單位的質(zhì)量檢驗(yàn)工作帶來一定的局限和困擾。筆者查閱大量文獻(xiàn)資料，并結(jié)合生產(chǎn)單位實(shí)際，對復(fù)方氯霉素洗劑中氯霉素的含量測定方法進(jìn)行了探討和改進(jìn)。結(jié)果表明，采用紫外分光光度法測定復(fù)方氯霉素洗劑中氯霉素的含量，不經(jīng)預(yù)先分離，不需對照品，且對檢測儀器要求不高。相比較《中國醫(yī)院制劑規(guī)范》中采用的化學(xué)滴定法而言，本操作簡便、快速，測定中排除滴定終點(diǎn)判斷容易產(chǎn)生誤差的劣勢，測定結(jié)果亦更為穩(wěn)定、準(zhǔn)確，尤其適用于生產(chǎn)單位及醫(yī)院制劑室的快速質(zhì)量控制。

[1]中華人民共和國衛(wèi)生部藥政局.《中國醫(yī)院制劑規(guī)范》西藥制劑第二版[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，1995：103-104.

[2]霍天鳳，趙素珍，宋閆軍.兩版藥典對氯霉素含量測定的比較[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2006，3（27）：148-149.

[3]夏鵬霄，楊瀚春，陳曉霞，等.紫外分光光度法測定復(fù)方氯霉素滴耳液中氯霉素含量[J].總裝備部醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào)，2009，11（1）：25-26.

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[6]羅桂萍.紫外分光光度法測定氯柳酊中氯霉素和水楊酸的含量[J].天津藥學(xué)，2004，16（6）：11-12.

[7]湖北省衛(wèi)生廳.湖北省醫(yī)院制劑規(guī)范[S].武漢：武漢出版社，1999：116-117.

[8] 郭潤勤.氯霉素酊中氯霉素的含量測定[J].海峽藥學(xué)，2007，19（9）：26－27.

The study of assay method of Chloramphenicol in Fufang Lvmeisu Xiji

LI Youfu LI Weilin
Railway Central Hospital of Xiangyang City in Hubei Province,Xiangyang 441000,China

ObjectiveTo discuss and improve the assay method of Chloramphenicol in Fufang Lvmeisu Xiji.MethodsThe general absorbtion and the absorbtion of salicylic acid in 278 nm were determined by ultraviolet(UV)spectrophotometry,and the figture of the former subtract the latter was considered as the absorbtion of Chloramphenicol.According to the Lambert-Beer Law,then,a format was esblished in order to count the content of Chloramphenicol,and a contract could be taken between this metod and chemical titration method.ResultsThe UV method was more accurate and simplistic than the chemical titration method.ConclusionThe proved UV method is applicable to quality control of the pharmaceutical preparations dispensed in hospitals.

Ultraviolet spectrophotometry;Chloramphenicol;Content determination;Investigate

R927.2

A

1674-4721（2012）10（a）-0061-02▲

李有富（1966-），男，湖北襄陽人，主管藥師，本科學(xué)歷，湖北省襄陽市鐵路中心醫(yī)院藥劑科主任。

▲通訊作者：李魏林（1983-），男，湖北襄陽人，藥師，碩士研究生，研究方向?yàn)樗幬锘瘜W(xué)和藥品檢驗(yàn)。

2012-06-14 本文編輯：郭靜娟）