吳海榮,余 雄,艾合買提江·吐爾遜,古蘭白爾·木合塔爾,阿布力孜·吾斯曼
(1.新疆農業(yè)大學動物科學學院,烏魯木齊 830052;2.新疆肉乳草食動物營養(yǎng)實驗室)
左旋精氨酸(L-Arg)是動物體內一種重要的堿性氨基酸,是精子蛋白的重要組成成分。除參與體內蛋白質沉積外,還通過多種酶參與機體代謝,并通過其代謝產物一氧化氮(NO)和多胺等在動物體內發(fā)揮多重營養(yǎng)生理效應。此外,Arg還能有效促進機體的激素分泌[1],對調控母畜的生長發(fā)育與繁殖生理具有重要作用。L-Arg對母畜繁殖性能的影響報道不多,多見于母豬繁殖的應用,提高母豬的胚胎著床率、產仔率和出生重。Mateo在妊娠第30~114天的母豬飼料中添加1.0%L-Arg的飼料,發(fā)現(xiàn)母豬窩產活仔數增加2頭[2]。但在提高綿羊繁殖性能的方面尚未見報道。本試驗旨在研究薩??巳庋蛟缙谌焉锲谌占Z中添加L-Arg對其繁殖性能以及血清中激素水平的影響,為提高綿羊胎產羔數提供一定參考。
試驗時間為2011年8月—2012年4月,試驗地點在新疆阿克蘇地區(qū)天山肉用種羊有限公司。
選擇健康無病、年齡相近且均無產雙羔記錄的薩??思兎N母羊105只,隨機分為3組,每組35只,分別作為對照組、試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組。每日06:00和18:00點飼喂,自由飲水。
L-精氨酸鹽酸鹽(純度均≥98.5%),購于北京嘉康源科技有限公司。孕酮陰道海綿栓、多管架自動平衡離心機、真空采血管、移液槍。
1.4.1 試驗羊的飼喂 參照國內肉羊飼養(yǎng)標準NY/T816—2004并做適當調整,進行日糧精料配方設計。試驗精料配方見表1。
表1 混合精料配方
對照組:飼喂配方1精料,每只母羊600 g/d,飼喂30 d,飼喂結束后對自然發(fā)情羊只進行人工輸精。配種結束后,飼喂配方1精料,每只羊200 g/d,直至產羔。
試驗Ⅰ組:飼喂配方2精料,每只母羊600 g/d,飼喂30 d,飼喂結束后,采用外源激素處理后進行人工輸精,配種后停用精料7 d后開始采用精料中添加精氨酸,每只羊100 g/d配方2精料(包括17g精氨酸),持續(xù)飼喂40 d后,飼喂配方1精料,每只羊200 g/d,直至生產。
試驗Ⅱ組:飼喂配方2精料,每只羊600 g/d,飼喂30 d,飼喂結束后,采用外源激素處理后進行人工輸精,配種后停用精料7 d后開始,每只羊100 g/d,持續(xù)飼喂40 d后,飼喂配方1精料,每只羊200 g/d,直至生產。
3組飼喂粗料均為全株青貯玉米每只羊2 kg/d、干麥草每只羊0.8 kg/d,自由采食。
1.4.2 母羊外源激素處理方法 對試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組進行放置孕酮海綿陰道栓(CIDR,放置日為第0天),于第12~14天撤陰道栓的同時肌肉注射孕馬血清促性腺激素400~450 u/只,并于撤栓24 h后用試情公羊進行試情,并對發(fā)情母羊進行人工適時輸精,同時肌肉注射促排 3 號 4~6 μg/只。
分別在試驗的補飼前、配種后和配種47 d后對3組所有母羊,使用一次性采血針進行羊頸靜脈空腹采血10 mL,室溫下靜置30 min,以4 000 r/min離心15 min,取上層血清-20℃冷凍保存。
1.6.1 母羊繁殖性能 記錄母羊的發(fā)情數、配種數、受胎數、產羔數、產雙羔數以及產羔時間。
1.6.2 血樣測定 血清樣本測定指標:雌二醇(E2)、雌三醇(E3)、孕酮(P)、促卵泡素(FSH)、促黃體素(LH)、人絨毛膜促性腺激素(hCG)、皮質醇(Cor)。樣本送北京華英生物技術研究所檢測,測定方法采用放射免疫法,儀器為r-911型全自動放免儀,試劑盒均來自于北京華英生物技術研究所。
數據先用EXCEL作初步統(tǒng)計,采用SPSS 17.0軟件進行重復數不等的方差分析,處理間差異采用LSD、Duncan檢驗,百分數采用卡方檢驗。除百分數以外,所有數據均以平均值±標準差表示,以P<0.05作為差異顯著性評判標準。
由表2可知,在妊娠期,試驗Ⅱ組的受胎率顯著高于試驗Ⅰ組(P<0.05);產羔率顯著高于對照組(P<0.05);雙羔率顯著高于對照組(P<0.05),試驗Ⅰ組與對照組差異不顯著(P>0.05);3組的發(fā)情率差異不顯著(P>0.05)。在第1情期,試驗Ⅱ組的受胎率、產羔率、雙羔率均顯著高于試驗Ⅰ組和對照組(P<0.05);試驗Ⅰ組與對照組差異不顯著(P>0.05)。
表2 薩??巳庋蚍敝承阅苤笜?/p>
由表3可看出,在配種前,對照組血清中hCG水平極顯著高于試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組(P<0.01),在配種47 d,試驗Ⅱ組血清中E2水平顯著高于試驗Ⅰ組和對照組(P<0.05);試驗Ⅰ組血清中P水平極顯著低于試驗Ⅱ組和對照組(P<0.01);對照組血清中LH水平顯著高于試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組(P<0.05)。
在試驗Ⅰ組中,補飼前血清中E2水平極顯著低于配種前與配種47 d(P<0.01);配種47 d血清中Cor水平極顯著低于補飼前與配種前(P<0.01);在試驗Ⅱ組中,配種47 d血清中E3水平極顯著高于補飼前與配種前(P<0.01);配種47 d后血清中P水平極顯著高于補飼前與配種前(P<0.01);在對照組中,配種47 d后血清中P水平極顯著高于補飼前與配種前(P<0.01);配種前血清中FSH水平顯著高于補飼前與配種47 d后(P<0.05);配種47 d血清中LH水平極顯著高于補飼前與配種前(P<0.01)。
表3 3組羊在不同時期的血清激素指標
由表4可知,在配種后,試驗Ⅰ組經產羊血清中E2、E3的含量顯著低于初產羊(P<0.05);經產羊血清中hCG的含量顯著高于初產羊(P<0.05)。配種47 d后,試驗Ⅰ組經產羊血清中E3、hCG的含量均顯著低于初產羊(P<0.05);經產羊血清中Cor的含量也顯著高于初產羊(P<0.05),P、FSH、LH含量差異均不顯著(P>0.05)。
表4 試驗Ⅰ組經產、初產羊在不同時期的血清激素指標
由表5可知,在補飼前,試驗Ⅱ組中經產羊血清中E2的含量極顯著高于初產羊(P<0.01);經產羊血清中hCG的含量極顯著低于初產羊(P<0.01);在配種后,試驗Ⅱ組中經產羊血清中E2、hCG的含量顯著低于初產羊(P<0.05);在配種47 d后,試驗Ⅱ組中經產羊血清中E2的含量顯著高于初產羊,差異顯著(P<0.05)。
表5 試驗Ⅱ組經產、初產羊在不同時期的血清激素指標
在母畜的繁殖過程中,早期胚胎死亡、胚胎著床失敗是導致產仔數目減少的一個重要繁殖問題。研究表明,在母畜妊娠早期或整個妊娠期間的日糧中補充一定的L-Arg能增加胚胎著床點、胚胎存活率和窩產仔數[3]。Berard等在妊娠第14~28 d給母豬飼喂添加1%L-Arg的飼料,使妊娠第70天胎兒數目提高了3.7頭[4]。在本次試驗中,試驗Ⅰ組的產羔率、雙羔率均低于試驗Ⅱ組,其原因包括:試驗Ⅰ組中比試驗Ⅱ組存在較多數目的初產羊,試驗Ⅰ組的經、初產羊比為18∶17;試驗Ⅱ組的經、初產羊比為24∶11,而初產羊的產羔率、雙羔率一般要比經產羊低。另外,試驗Ⅰ組在經過2次人工授精和本交之后,仍存在9只羊未妊娠的情況,說明這9只羊可能存在繁殖疾病或障礙,大大降低了試驗Ⅰ組的產羔率與雙羔率,在試驗Ⅱ組中,僅有4只羊未妊娠。
Van等[5]在母豬妊娠第14~30天日糧中補加1%精氨酸后發(fā)現(xiàn),母豬的分娩率和窩產仔數分別提高了15%和8%。但本試驗結果顯示,試驗Ⅰ組的產羔率、雙羔率與對照組相比,差異不顯著(P>0.05),這說明在經過PMSG+A3處理,促進卵巢排卵后,在薩??巳庋蝻暳现刑砑覮-Arg可改善胚胎的附植和存活率方面未見顯著效果。這可能與動物的種屬有關,L-Arg在瘤胃中的消化代謝與單胃存在較大差異,可能是由于大量的L-Arg被瘤胃微生物分解消化,只有少量的L-Arg進入機體內循環(huán),但其作用機制還有待進一步研究。
動物繁殖是一個復雜過程,受許多激素的影響,它們直接調節(jié)動物的發(fā)情、排卵、生殖細胞在生殖道內的運行、胚胎的著床、妊娠、分娩、泌乳等繁殖行為[6]。本試驗結果顯示:在對照組中,配種后血清中FSH、LH的含量顯著高于補飼前(P<0.05),這是由于母羊妊娠后的自然結果造成的。在試驗Ⅰ組與試驗Ⅱ組血清中兩者在配種后未出現(xiàn)顯著變化,這是由于兩個試驗組均經過PMSG+A3處理,說明外源激素的處理會影響到母羊自身FSH、LH的分泌。
在補飼前、配種后、配種47 d后,試驗Ⅱ組和對照組血清中P的含量均呈現(xiàn)上升的變化趨勢,差異極顯著(P<0.01),而試驗Ⅰ組血清中P的含量無顯著變化(P>0.05),但血清中Cor的含量呈上升的變化趨勢,差異極顯著(P<0.01),且在配種47 d后經產羊血清中Cor的含量顯著高于初產羊(P<0.05)。試驗Ⅱ組和對照組血清中P含量的顯著上升,是由于母羊妊娠后造成的正常變化。在試驗Ⅰ組血清中P的含量在配種后未出現(xiàn)顯著變化,經產羊和初產羊血清中P的含量也無顯著差異,且試驗Ⅱ組和對照組在配種47 d后血清中P的含量極顯著高于試驗Ⅰ組(P<0.01)。這說明在薩??巳庋蛟缙谌焉飼r,飼料中添加L-Arg可能會影響其血清中P的分泌,繼而影響薩福克肉羊的繁殖性能。Cor是一種由性腺和腎上腺分泌的類固醇激素,對動物的性行為和生殖激素的分泌有直接或間接的作用。值得注意的是,在配種47 d后試驗Ⅰ組血清中Cor含量顯著提高,這可能由于添加LArg會影響經產羊血清中Cor的分泌,但其作用機制還需進一步的研究。
1)在薩??巳庋蛟缙谌焉?5~50 d時,按照每天每只添加17g L-Arg到精料補充料中,添加L-Arg在改善薩??巳庋蚺咛サ母街埠痛婊盥史矫嫖匆婏@著效果。
2)在補飼前、配種后以及配種47 d后,添加L-Arg降低了薩??巳庋蜓逯蠵、E3、水平。
3)在補飼前、配種后以及配種47 d后,添加L-Arg對薩??巳庋蜓逯蠩2、FSH、LH、、hCG的分泌無顯著影響。
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