高志芳

廣東省廣寧縣中醫(yī)院，廣東廣寧 526300

1 材料與方法

1.1 血清標(biāo)本

選擇本院2011～2012年門診的不同類型慢性肝病青少年患者137例,定義實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組為HBeAg陽性，對(duì)照組為HBeAg陰性。全部病例的診斷均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)2005年《慢性乙型肝炎防治指南》。血清采用經(jīng)高壓滅菌的1.5mL新Eppendorf管分裝,于-20℃凍存待檢。

1.2 方法及主要儀器、試劑

每份標(biāo)本同時(shí)檢測(cè)HBV-DNA、ALT.乙肝兩對(duì)半檢測(cè)試劑均采用北京北方生物研究所生產(chǎn)的ELISA藥盒，按說明書操作，判斷結(jié)果全部采用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀檢測(cè)。ALT采用酶動(dòng)力學(xué)法，全自動(dòng)生化儀為羅氏C501。乙型肝炎病毒（HBV-DNA）定量采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR，儀器使用JY57-ABI7300熒光定量PCR儀。

1.3 統(tǒng)計(jì)處理

采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05差異有顯著性。

2 結(jié)果

(1)從表1可看出，137例患者中HBV-DNA>1.0*105拷貝/mL以上分別為：ALT<40U／L 組占 37.5%，40～80U／L 組占 75.8%，81～400U／L組占 85.0%，>400U／L組占 94.44%；后 3組與 ALT<40U／L組比較差異有顯著性意義(P<0.05)，提示青少年患者ALT升高者大多HBV-DNA升高明顯。但后3組之間比較差異無顯著性意義(P>0.05)。

表1 不同ALT水平與血清HBV-DNA水平的關(guān)系[n(%)]

(2)實(shí)驗(yàn)組與血清HBV-DNA水平的關(guān)系，實(shí)驗(yàn)組HBVDNA均值明顯高于對(duì)照組，兩組比較差異有顯著性意義(P<0.05)。見表2。

表2 實(shí)驗(yàn)組與血清HBV-DNA水平的關(guān)系（±s）

表2 實(shí)驗(yàn)組與血清HBV-DNA水平的關(guān)系（±s）

注：與對(duì)照組比較，△P<0.05

組別 例數(shù) HBV-DNA（logo 拷貝/mL）實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組85 52（6.23±2.60）△4.51±2.78

3 討論

乙型病毒性肝炎是一類嚴(yán)重危害人類身體健康的感染性疾病，全球有3.5億人感染乙型肝炎(HBV)其中近10%的患者可因持續(xù)HBV感染而導(dǎo)致肝硬化或肝細(xì)胞[1]血清HBV-DNA載量和HBeAg陽性是反映病毒復(fù)制和宿主傳染性的主要指標(biāo)，它們同時(shí)也是臨床觀察治療療效的重要項(xiàng)目。慢性乙型肝炎青少年患者在ALT升高時(shí)，大多HBV-DNA升高明顯。駱抗先等[2]報(bào)道,15例HBV免疫標(biāo)志均陰性的慢性活動(dòng)性肝炎患者中有9例HBVDNA陽性,陽性率高達(dá)60%。應(yīng)用PCR技術(shù)檢測(cè)HBV-DNA并結(jié)合HBeAg指標(biāo)可監(jiān)測(cè)乙肝病毒復(fù)制狀況，雖然不能用來反映肝損傷狀況，但是病毒的活躍復(fù)制又是啟動(dòng)或激發(fā)肝臟組織炎癥反應(yīng)的因素[3]；Scotto等采用斑點(diǎn)雜交法分析HBVDNA,發(fā)現(xiàn)大多數(shù)HBeAg陽性患者存在高水平的HBV復(fù)制[4,5]。慢性乙型肝炎青少年患者HBeAg陽性中HBVDNA均值明顯高于HBeAg陰性，故需定期檢測(cè)HBV-DNA，以及時(shí)發(fā)現(xiàn)原發(fā)性無應(yīng)答或病毒學(xué)突破。

[1]Tang RX,Gao FG,Zeng LY,et al.Detection of HBV DNA and its existence status in liver tissues and peripheral blood lymphocytes from chronic hepatitis B patients[J].World J Gastroenterol,1999,5:359-361.

[2]駱抗先,周榮,梁熾森,等.聚合酶鏈反應(yīng)鑒定HBsAg陰性慢性活動(dòng)性肝炎中乙型肝炎病毒感染[J].中華內(nèi)科雜志,1991,30:21-23.

[3]謝勇.hbv-dna定量與乙肝血清學(xué)標(biāo)志物及肝功能關(guān)系分析[J].中國熱帶醫(yī)學(xué)，2007,7(12):2212.

[4]Scotto J,Hadchouel M,Hery C,et al.Detection of hepatitis Bvirus DNA in serum by a single spot hybridization technique:comparison with results for other viral markers[J].Hepatology,1983,3:279-284.

[5]Lieberman H,Labreque D,Kew M,et al.Detection of hepatitis B virus directly test:comparison to HBeAg/anti–Hbe status[J].Hepatology,1983,3:385-391.