胡 娜,索有瑞
(1.中國(guó)科學(xué)院西北高原生物研究所,青海西寧810001;2.中國(guó)科學(xué)院研究生院,北京100049)
抱莖獐牙菜(Swerlia franchetiana H.Smith)是龍膽科獐牙菜屬的一個(gè)品種,生長(zhǎng)在海拔3 800~5 000 m,分布于青海、四川和甘肅等地,一年生草本,全草入藥,為傳統(tǒng)的藏藥材,具有清熱解毒,舒肝利膽的功能,主治急性肝炎、慢性肝炎、慢性膽囊炎屬肝膽濕熱癥[1-3]。近年來(lái),由于以抱莖獐牙菜為主的制劑不斷增多,市場(chǎng)需求量急劇增加,使天然資源日趨短缺。為解決資源問(wèn)題,加大了人工栽培抱莖獐牙菜技術(shù)研究和種植推廣等工作[4-5]。配合人工栽培技術(shù)研究,我們對(duì)人工栽培和野生抱莖獐牙菜的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究。研究對(duì)比人工栽培與野生抱莖獐牙菜之間的成分差異,對(duì)指導(dǎo)人工栽培抱莖獐牙菜替代野生抱莖獐牙菜用藥具有重要意義,本文對(duì)人工栽培和野生抱莖獐牙菜中氨基酸與礦物質(zhì)元素的含量水平及差異性進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究。
野生種:在青海省玉樹州于采收季節(jié)采集地道抱莖獐牙菜全草(由中科院西北高原生物研究所陳桂琛研究員鑒定為抱莖獐牙菜Swerlia franchetiana H.Smith.),整理后陰干,用自來(lái)水沖洗泥土,再用蒸餾水沖洗3遍,低溫烘干,粉碎成細(xì)粉作為分析樣品。
人工栽培種:在青海省海東縣種植示范區(qū)于采收季節(jié)采集人工栽培抱莖獐牙菜全草(由中科院西北高原生物研究所陳桂琛研究員鑒定為抱莖獐牙菜Swerlia franchetiana H.Smith),處理方法同上。
日立835-50型氨基酸分析儀測(cè)定氨基酸含量,水解條件:6 mol/L HCl,110℃水解22 h;色譜條件:分離柱長(zhǎng) 15 cm(φ2.6 cm),泵壓 80~90 kgt/cm2,緩沖液流速 0.225 mL/min,茚三酮流速 0.3 mL/min,反應(yīng)槽溫度98℃,分離柱溫53℃。色氨酸由熒光光譜儀 RF-5000測(cè)定,水解條件為5 mol/L NaOH,110℃水解22 h。微量元素的測(cè)定:全草先用清水沖洗干凈,再用去離子水沖洗3遍,放入烘箱60℃烘干,取出研磨粉碎,稱取樣品2.000 0 g,放入高溫電爐于500~550℃灰化4 h,取出冷卻后加入10 mL 1∶1HNO3溶液,加熱溶解灰分,轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中用水定容。此溶液以火焰原子吸收光譜法測(cè)定 Cu、Fe、Zn、Mn、Co、Ni、Cr、Pb、Cd元素。
另稱取1.000 0 g樣品于50 mL燒杯中,加入5 mL HNO3,放置3~4 h后,在電熱板上低溫消化1 h,加入2 mL H2O2,再加熱消化至體積1~2 mL,加入2.5 mL HCl加熱溶解鹽類,轉(zhuǎn)移至25 mL容量瓶中用水定容,用氫化物原子熒光光譜法測(cè)定As、Hg、Se元素。
日立835-50型氨基酸分析儀;熒光光譜儀RF-5000;日立180/80原子吸收光譜儀;XDY-Ⅰ型無(wú)色散熒光光譜儀。
人工栽培與野生抱莖獐牙菜礦物元素測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1和表2;人工栽培與野生抱莖獐牙菜中氨基酸含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表3。
表1 人工栽培與野生抱莖獐牙菜礦物元素含量(×10-6)
表2 人工栽培與野生抱莖獐牙菜中非必需微量元素含量(×10-6)
表3 人工栽培與野生抱莖獐牙菜中氨基酸含量(×10-2)
(1)由圖1可以看出野生抱莖獐牙菜中幾種有害微量元素都比人工栽培種低,所以從有害元素角度對(duì)比分析,野生種要優(yōu)于人工栽培種。這種差異有可能是種植基地環(huán)境污染造成。野生抱莖獐牙菜常量元素中除鈣外,均低于人工栽培種,鈣、鎂與肝臟疾病也有密切關(guān)系,鎂是谷胱甘肽酶的組成部分,其對(duì)動(dòng)物體內(nèi)的谷胱甘肽酶含量有顯著影響,缺乏會(huì)引起肝臟病變[6-8]。
圖1 人工栽培與野生抱莖獐牙菜中非必需微量元素及常量元素比較
(2)人體內(nèi)的微量元素雖然含量極微,但卻具有特殊功能。大量研究顯示微量元素與人體的各項(xiàng)生理機(jī)能密切相關(guān),微量元素的盈缺會(huì)導(dǎo)致人體的生理機(jī)能紊亂,從而導(dǎo)致疾病[9]。由圖3可以看出野生抱莖獐牙菜各種微量元素含量除硒、鍶、鈀外均高于人工栽培種,鋅、硒、銅、鐵等元素與肝臟及其它各種疾病有密切關(guān)系[7]。抱莖獐牙菜中含有豐富的硒、鋅。硒是GSH-PX酶的活性成分,有抗氧化作用,可保護(hù)四氯化碳對(duì)肝臟的損傷,減輕肝纖維化[10-12]。鋅對(duì)細(xì)胞凋亡有重要調(diào)節(jié)作用,是免疫功能下降的重要機(jī)制之一[13]。鋅鹽可防止肝組織纖維化的發(fā)生與發(fā)展,在慢性肝炎及肝硬化的發(fā)展過(guò)程中,由于鋅缺乏而引起蛋白質(zhì)合成障礙[6]。野生川西獐牙菜中硒含量遠(yuǎn)高于人工栽培川西獐牙菜,其它必需微量元素對(duì)比,野生抱莖獐牙菜元素含量大都低于人工栽培種,而微量元素與疾病有密切聯(lián)系,故從礦物元素角度分析人工栽培與野生抱莖獐牙菜有明顯差異。這種差異是否會(huì)引起臨床療效的不同,還需進(jìn)一步研究。
圖2 人工栽培與野生抱莖獐牙菜中必需微量元素含量比較
(3)氨基酸具有重要的生理功能,除主要作為合成蛋白質(zhì)的原料外,還可以轉(zhuǎn)變成核苷酸、某些激素、神經(jīng)遞質(zhì)等含氮物質(zhì)。氨基酸含量要足、種類要全面,才能滿足機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育和健康的需要。氨基酸缺乏時(shí),人體正常的生長(zhǎng)發(fā)育就會(huì)受到抑制或產(chǎn)生疾?。?4]。由圖3、表3可知野生抱莖獐牙菜中各種必需氨基酸及其它氨基酸含量除色氨酸外均遠(yuǎn)高于人工栽培種,慢性肝功能不良的患者多存在蛋白質(zhì)、熱能營(yíng)養(yǎng)不良,營(yíng)養(yǎng)合理補(bǔ)充對(duì)肝病患者恢復(fù)很有必要[15-16],氨基酸參與構(gòu)成酶激素和部分維生素,糾正肝硬化和肝病所致的蛋白質(zhì)合成紊亂[17],異亮氨酸、亮氨酸、纈氨酸具有改善肝功能作用而且對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)性肝損傷有保護(hù)作用[18-19]。人工栽培抱莖獐牙菜與野生抱莖獐牙菜中氨基酸含量的差別是否會(huì)引起臨床療效不同,也需進(jìn)一步研究。
圖3 人工栽培與野生抱莖獐牙菜中必需氨基酸含量比較
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