秦 斌

廣西壯族自治區(qū)桂林市第二人民醫(yī)院藥劑科，廣西 桂林 541000

芍藥苷 (paeoniflorin，PAE)是主要從毛莨科植物芍藥中提取，是一種易溶于水單萜類糖苷白色無定形粉末化合物，是芍藥的主要單體活性成分，芍藥苷具有抗炎及免疫調(diào)節(jié)作用［1］。近年來，對于芍藥苷這一中藥提取物的研究近期也開始成為熱點。國內(nèi)外有關學者運用芍藥苷進行了大量抗肝纖維化的研究，效果較為滿意。本文就芍藥苷抗肝纖維化方面的研究作一綜述。

1 肝纖維化形成機制

肝纖維化是肝組織對慢性損傷的修復反應，是多種類型細胞、氧化應激、細胞因子和生長因子等一系列復雜作用的結(jié)果，以細胞外基質(zhì) (extracellular matrix，ECM)成分的過度增生與異常沉積為主要特征。肝纖維化是慢性肝病重要的病理特征，也是肝硬化發(fā)生的前奏和必經(jīng)的中間環(huán)節(jié)，是臨床治療慢性肝病的關鍵環(huán)節(jié)。近年來國內(nèi)外取得廣泛共識的是:肝星狀細胞 (hepatic stellate cell，HSC)是肝臟ECM的主要來源，是肝纖維化形成的細胞學基礎，它在ECM代謝和各種細胞介質(zhì)的產(chǎn)生過程中處于中心地位，HSC的表型激活和過度增殖是肝纖維化形成過程的關鍵［2］。

2 芍藥苷抗肝纖維化的機制

2.1 抗自由基過氧化損傷，促進肝細胞再生

芍藥苷的化學結(jié)構(gòu)表明，芍藥苷分子中的多個酚羥基使其具有較強的自由基清除活性、具有生物學應答調(diào)節(jié)作用［3］，對由H2O2誘導DNA單鏈損傷有保護作用［4］:抗氧化用氧自由基和其他基因產(chǎn)生的增多與很多種類的肝損傷和肝纖維化有關，其中最重要的是超氧化物。在肝纖維化中，線粒體呼吸鏈的破壞導致電子泄露增加和超氧化物的增多，通過以4n幾何級數(shù)的速度增長，超氧基團又可使過氧化氫、羥自由基、單線氧氣等活性氧類產(chǎn)物增加。羥自由基極度活躍，能夠攻擊包括脂類、蛋白質(zhì)、核酸和糖類在內(nèi)的許多細胞成分。同時肝內(nèi)原有的細胞保護機制 (抗氧化系統(tǒng)、修復系統(tǒng))遭到破壞，氧化物的產(chǎn)生與消除之間不平衡，因而誘發(fā)肝纖維化的形成與發(fā)展，在體外試驗李文庭反應中［5］，芍甘多苷大劑量組肝細胞和肝細胞線粒體中MDA含量降低，SOD活性升高 (P＜0.05或0.01)，說明芍甘多苷有較強的抗氧化作用，拮抗自由基對肝臟的損傷。駱和生等［6］體內(nèi)實驗發(fā)現(xiàn)芍甘多苷大劑量能顯著提高線粒體Na。K+ATPase、Ca”ATPase活性，減輕線粒體鈣超載和水腫，增強能量代謝、有效減輕自由基對線粒體的損傷，從而對受損的線粒體起到保護作用。因此，芍藥苷可認為是通過清除氧自由基，抑制脂質(zhì)過氧化反應，阻斷或者減緩肝損傷時的炎癥刺激，達到抗肝纖維化的作用。

2.2 抑制炎性因子釋放，改善肝臟微循環(huán)

肝細胞受損后，Kupffer細胞和淋巴細胞等炎性細胞被激活，釋放多種細胞因子 (腫瘤壞死因子、白細胞介素一β等)，促進間質(zhì)細胞的有絲分裂，使貯脂細胞及其他細胞合成膠原纖維增多［7］。因此，消除炎癥，減少細胞因子的釋放，是抑制膠原合成、抗肝纖維化的重要途徑。Nero E等［8］發(fā)現(xiàn)，腫瘤壞死因子 (TNF)活性的高低與肝細胞壞死程度的輕重有著正相關的關系，且TN單抗 (mAb—TNF)對TNF介導的肝細胞壞死有保護作用。提示TNF是造成急性肝壞死的重要介質(zhì)，在肝纖維化產(chǎn)生過程中，白細胞介素—β(IL—β)、IL—6、IL—8水平升高。Hung KS研究表明［9］，IL—6及IL—8主要由單核細胞和巨噬細胞產(chǎn)生并參與炎性損傷過程。肝臟內(nèi)核因子KB能通過調(diào)控炎性因子和抗炎因子增加和減少來影響反應的損傷修復，Ping J在CCl4聯(lián)合乙醇誘導的大鼠肝纖維化模型中［10］，芍甘多苷能顯著抑制肝組織中NF—KBp65/IKBCt的過度表達，降低血清TNF—d水平?？傊琓NF。在細胞因子網(wǎng)絡中起重要調(diào)節(jié)作用，它的增加破壞了網(wǎng)絡平衡，導致免疫功能紊亂，加重肝細胞壞死。Czaja MJ實驗研究表明［11］，模型組大鼠肝臟TNF－a含量較正常組為高，有顯著性差異，表明TNF a參與介導了CCL4。所致的大鼠亞急性肝損傷。芍甘多苷大劑量能顯著降低 CO1。亞急性肝損傷大鼠肝臟TNF—Q含量，從而對損傷肝臟起到保護作用。芍甘多苷是一抗炎免疫調(diào)節(jié)藥，在不同的病理狀態(tài)下，芍甘多苷對異常的免疫功能具有雙相調(diào)節(jié)作用。lseri SO研究發(fā)現(xiàn)［12］在化學性和免疫性肝損傷模型中，芍甘多苷有抗炎作用。

2.3 降低肝臟總NOS、iNOS的活性及NO的含量，阻斷NO對肝臟的損傷作用。NO(一氧化氮)是NO合成酶以左旋精氨酸為底物合成的。體內(nèi)合成NO的酶有兩種即原生酶 (eNOS)和誘生酶 (iNOS)，eNOS合成的NO，主要參與傳遞信息、舒張血管和抑制血小板聚集與粘附的過程，而iNOS合成的N0，主要作為細胞免疫和細胞毒性的效應分子，在多種感染性及自身免疫性疾病的發(fā)病機制中起重要作用。研究表明［13－14］，在免疫刺激條件下iNOS mRNA在肝細胞的表達對肝損傷的發(fā)生有重要意義。iNOS及其合成的NO對肝細胞有損害作用，NO介導了枯否氏細胞對肝細胞的毒性，但eNOS可以減輕肝臟損傷。同時，NO可作為NF—K B的激活劑，激活NF—K B。與RObt一樣，還可攻擊caspase中起關鍵作用的巰基，使其喪失活性，抑制凋亡，但同時可導致細胞壞死。與模型對照組相比，芍甘多苷大劑量灌胃給藥能顯著降低CCL4亞急性肝損傷大鼠肝臟N0含量 (P＜0.01)，中小劑量有一定的降低作用趨勢 (P＞0.05)，表明芍甘多苷能通過降低肝臟NO含量而起到肝臟保護作用。

2.4 抑制HSC活化，抑制膠原生成，促進病理沉積膠原降解。

在各種因素引起的肝臟損傷中，多種內(nèi)源性細胞因子參與肝細胞的凋亡，從而導致肝臟功能的異常，抗肝纖維化治療中誘導細胞的凋亡是目前研究的熱點。王曉玉等實驗［15］發(fā)現(xiàn)PAE作用24和48 h均可明顯抑制體外培養(yǎng)大鼠HSC分泌HA和PcⅢ，還發(fā)現(xiàn)PAE能顯著降低血清ALT，AST和ALP水平，升高血清ALB水平和A/G值。晏雪生實驗［16］，2m∥mL芍藥苷作用HepG—2細胞48h后的細胞凋亡率 (21.67%)顯著高于相應無藥對照組 (3.49%)，P＜0.05。肝臟病理組織學觀察顯示PAE能減輕肝臟炎細胞浸潤，改善脂肪變性，有利于肝細胞和肝臟組織結(jié)構(gòu)、形態(tài)恢復正常。周登余等研究表明PAE能減少大鼠系膜增生性腎小球腎炎時系膜細胞的增生，使已經(jīng)聚積的ECM部分降解，能一定程度保護和恢復大鼠的腎功能。

2.5 基因表達譜芯片檢測表明，芍甘多苷對肝臟基因表達的調(diào)控是多靶點的，這些多途徑的靶基因的改變可能是芍甘多苷肝臟保護作用的分子生物學機理，具體表現(xiàn)在［17－20］:①上調(diào)與能量代謝有關的基因表達;②上調(diào)與轉(zhuǎn)錄、細胞分裂和增殖有關的蛋白和酶的基因表達，促進轉(zhuǎn)錄、細胞分裂和增殖;③下調(diào)與促進細胞凋亡有關的基因表達，抑制細胞調(diào)亡;④下調(diào)部分能促進肝纖維化的基因表達，減輕肝纖維化;⑤上調(diào)與應激反應有關的基因表達，保護肝細胞;⑥調(diào)節(jié)與肝臟代謝酶有關的基因表達;⑦調(diào)節(jié)與免疫和炎癥反應有關的基因表達，降低白細胞介素等細胞因子，降低細胞免疫和體液免疫，減少炎癥介質(zhì)及受體的產(chǎn)生:⑧上調(diào)與抗自由基損傷有關的基因表達;⑨上調(diào)與轉(zhuǎn)運有關的基因表達。

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