何國柏 丁人均 楊宇鋒 楊 芳

（湖南省懷化市鶴城區(qū)畜牧水產(chǎn)局，懷化 418000）

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 植黃牛 在武陵山區(qū)南、中、北地段的中高山區(qū)、丘陵地帶和相對平坦的區(qū)域，選用不同年齡、性別、體況的湘西黃牛302頭，分別進(jìn)行植黃試驗(yàn)。

1.1.2 牛黃床 選用卵形網(wǎng)狀平面空心黃床和卵型溝回狀黃床二種。①卵形網(wǎng)狀平面空心黃床。是以無毒R、R、V、C、PmmA、LDPE PALOIO等極性高分子聚合物為原料，塑成縱軸長⒋5 mm，直徑4 cm的卵狀牛黃床（代號LN-2型）。②卵型溝回狀黃床。是以進(jìn)口無毒高壓聚乙烯為原料注塑而成，長軸5 cm，直徑4 cm，外壁有6條等距離的縱行溝回。黃床的上端有2個(gè)1.8 cm×0.9 cm的塑料小瓣，起到類似心臟二尖瓣的作用。它的內(nèi)外附著面積比前者增加75%。而與膽囊內(nèi)壁的接觸面減少了47%（代號為HX-4型）。將黃床塑殼外面都分別用白的確涼布或白粗棉布縫制包裹，分組供試。

1.1.3 牛黃菌 ①“HX-1型”菌種（非致病性埃希氏大腸桿菌），含菌量1×109～1.5×109/ml，每頭膽內(nèi)用量2 ml，河南淅川縣畜牧局提供。② “WL-6號”菌種：從形成天然牛黃的牛膽囊內(nèi)分離而成，含菌量1×1010/ml，每頭膽內(nèi)用量為3～5 ml。由吉首大學(xué)獸醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)室提供。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 培植牛黃技術(shù)流程 選擇適齡健康黃?！覀?cè)季肋部標(biāo)定手術(shù)部位并剃毛消毒→靜松靈（2，4—二甲基丙胺噻唑鹽酸鹽，中國農(nóng)科院中獸醫(yī)研究所生產(chǎn)）配合傳導(dǎo)局麻→外科常規(guī)切開腹壁→暴露膽囊→開膽排汁并植入黃床→倫勃爾氏縫合膽囊→注入牛黃菌種→凈化膽囊外壁并復(fù)位→常規(guī)關(guān)腹→正常放牧1～2年→手術(shù)取黃→清除血跡與粘液→刮黃干燥封存→取樣送檢。

1.2.2 試驗(yàn)中的技術(shù)改進(jìn) ①改電針麻醉為靜松靈配合傳導(dǎo)局麻，使牛安靜站立接受手術(shù)。經(jīng)150頭牛的試驗(yàn)，研究出適宜于湘西黃牛站立手術(shù)的靜松靈合理劑量為0.05～0.10 mg/kg。②改外地牛黃菌種為我們自己從形成天然牛黃的膽汁中分離培育產(chǎn)生的β-G酶活性強(qiáng)盛的牛黃菌種?！癢L-6號”，含菌量達(dá)1×1010/ml。③在選用“HX-4型”卵形溝回狀黃床時(shí)，將內(nèi)部裝上一根細(xì)沙布條，并用白粗棉布取代白的確良布作包皮，以增加牛黃微粒的附著面。④改膽囊普通術(shù)式為增做一道膽囊頸部半結(jié)扎術(shù)。它既可以避免黃床在膽囊收縮時(shí)被排出或卡阻于膽囊頸部影響膽汁流通的可能性，更可緩留膽汁在黃床內(nèi)外停留的時(shí)間，增加牛黃微粒沉積和附著的機(jī)會(huì)，從而提高牛黃的產(chǎn)量。⑤改術(shù)部創(chuàng)口裝紗布敷料為涂搽蟲膠酊劑，使之在創(chuàng)口表面迅速形成一薄層保護(hù)膜，既防蚊蠅叮咬，又防雨水和贓物污染。在其周圍再涂1ml～2ml菜籽油，防蚊蠅效力更佳。我們曾于7、8月的盛夏季節(jié)施術(shù)數(shù)十頭，無一例感染化膿，創(chuàng)口均取一期愈合。

2 結(jié)果與分析

2.1 牛黃產(chǎn)量及相關(guān)因素

直接編組進(jìn)行試驗(yàn)的302頭湘西黃牛，已手術(shù)取黃148頭，共取牛黃（干品）1 947.16 g，頭均產(chǎn)黃13.16 g。其中Ⅰ級品（膽紅素含量在35%以上）452.13g，占23.22%；Ⅱ級品（膽紅素含量在18～34%）1140.26g，占58.56%。達(dá)標(biāo)量共1 592.39g，占總產(chǎn)量的81.78%。

試驗(yàn)證明，培植牛黃的產(chǎn)量與質(zhì)量受多種因素的影響。如牛群的生態(tài)環(huán)境、個(gè)體的機(jī)能狀態(tài)、育黃時(shí)間的長短、黃床的類型、牛黃菌種以及手術(shù)的方式與質(zhì)量等，都明顯地起著制約作用。

2.1.1 牛的生態(tài)環(huán)境與產(chǎn)黃的關(guān)系 選年齡均在5～10 歲的成年湘西黃牛（公母各半，膘情中等）一批（100頭左右）進(jìn)行不同生態(tài)環(huán)境的產(chǎn)黃對比試驗(yàn)。結(jié)果表明，中高山地的牛黃產(chǎn)量高于丘陵地帶，丘陵地帶的牛黃產(chǎn)量又高于平地和城郊，但太高的山區(qū)又有所下降。這可能與氣象因子影響水草飼料和牛的消化生理有關(guān)。

2.1.2 植黃牛個(gè)體機(jī)能狀況與產(chǎn)黃的關(guān)系 選擇育黃時(shí)間相近（22～26個(gè)月），地勢相近，同處于丘陵低山區(qū)環(huán)境，都采用同一種牛黃菌種（WL-6）和同一型號黃床（HX-1型）的植黃牛一批進(jìn)行試驗(yàn)，比較不同年齡、性別和體況對產(chǎn)黃的影響。結(jié)果表明，年齡越大、個(gè)體越大（膘情不一定要好）的母牛，比年齡小、個(gè)體小的公牛產(chǎn)黃量高，質(zhì)量好。絕大多數(shù)這種牛的牛黃均為橙紅或棕紅色。

2.1.3 育黃時(shí)間與產(chǎn)量的關(guān)系 選年齡均為5～8歲，體重為200～250 kg范圍內(nèi)的湘西黃牛60頭，公母各半，用同樣的菌種和黃床（同前）作不同育黃期的比較試驗(yàn)，結(jié)果用卡方檢驗(yàn)分析育黃時(shí)間的長短對牛黃產(chǎn)量的影響。結(jié)果表明，育黃時(shí)間對牛黃的產(chǎn)量與質(zhì)量有明顯正向影響（P＜0.01）。

2.1.4 選用菌種、黃床和術(shù)式與產(chǎn)黃的相關(guān)性 選在張家界市永定區(qū)羅塔鄉(xiāng)和洪江市深渡鄉(xiāng)2個(gè)自然環(huán)境近似的中山區(qū)內(nèi)，所用牛的年齡相近（5～8歲），體況相近（體重在200～250 kg）的湘西黃牛（公母各半）90頭，育黃時(shí)間同為2年左右（23～25個(gè)月）進(jìn)行不同菌種、不同黃床、不同術(shù)式的試驗(yàn)比較。結(jié)果經(jīng)方差分析可知，黃床類型α=0.05的顯著性水平下差異顯著。HX-4型優(yōu)于LN-2型黃床。在α=0.01的顯著水平下，植黃方式與菌種型號差異極為顯著。即采用膽囊頸部半結(jié)扎式植黃比一般術(shù)式植黃的牛黃產(chǎn)量顯著提高。采用WL-6號菌種所得牛黃產(chǎn)量又明顯高于HX-1型菌種的。

2.2 培植牛黃質(zhì)量檢測

將試驗(yàn)中所取的培植牛黃，隨機(jī)提取4批樣品（同時(shí)2批，每批10頭牛的牛黃混合之，），分別送懷化市藥檢所、湖南省藥檢所、湖南醫(yī)科大學(xué)分析測試中心作了全面的質(zhì)量檢測，檢測結(jié)果表明，所送樣品主要指數(shù)都達(dá)到國家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。

2.2.1 物理性狀 牛黃樣品為小片碎塊及部分粉末固體，有光澤、質(zhì)酥脆、易研碎、色棕黃或綜褐。碎塊斷面橙黃色艷，聞?dòng)星逑?，口感味苦而后甘涼，掛甲良好。隨機(jī)采樣送湖南醫(yī)科大學(xué)電鏡室作電子顯微鏡觀察，結(jié)果表明牛黃層次結(jié)構(gòu)清晰，與天然牛黃相似，并以膽紅素結(jié)構(gòu)為主，質(zhì)量上乘。

2.2.2 培植牛黃主要化學(xué)成份 所檢測的40頭培植牛黃樣品全部達(dá)到部頒標(biāo)準(zhǔn)。再將它與我國其他地區(qū)所產(chǎn)牛黃進(jìn)行主要指標(biāo)比較。結(jié)果表明武陵山區(qū)培植牛黃的質(zhì)量達(dá)到或超過了國內(nèi)某些地區(qū)的先進(jìn)水平。

值得注意的是，在牛黃的多種化學(xué)成分中，膽紅素是一個(gè)最重要的成份。盡管對它的藥理作用還需要進(jìn)一步的認(rèn)識，但其含量的高低與傳統(tǒng)評價(jià)牛黃質(zhì)量是一致的。因此常以膽紅素含量的高低來評價(jià)牛黃質(zhì)量的優(yōu)劣。衛(wèi)生部 “衛(wèi)藥字（90）第9號”文件中，明文規(guī)定“培植牛黃中膽紅素含量35%以上（含35%）的，可與天然牛黃同等藥用；膽紅素含量在18%～35%之間的，只能供非急救成藥配方用；膽紅素含量在18%以下的，不可供藥用?！?/p>

武陵山區(qū)培植牛黃與我國其他地區(qū)培植牛黃膽紅素含量達(dá)標(biāo)范圍十分相似，即80%的以上的產(chǎn)品達(dá)到部頒Ⅰ、Ⅱ級標(biāo)準(zhǔn)。將膽紅素含量一項(xiàng)與國內(nèi)主要產(chǎn)地的牛黃比較，結(jié)果表明武陵山區(qū)培植牛黃還含有15種微量元素和18種氨基酸，與其他省市培植牛黃和天然牛黃的含量相近。

2.2.3 毒性安全試驗(yàn) 樣品經(jīng)湖南醫(yī)科大學(xué)分析測試中心作安全毒性試驗(yàn)，表明經(jīng)口為LD50大于5 000mg/kg；經(jīng)腹腔注射LD50為401.8mg/kg。結(jié)論：武陵山區(qū)培植牛黃“屬微毒或無毒”。

2.2.4 衛(wèi)生學(xué)檢驗(yàn) 樣品經(jīng)湖南醫(yī)科大學(xué)分析測試中心檢驗(yàn)，“兩批樣品檢出細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)均為合格，無活螨”。

2.3 培植牛黃對牛的勞役、繁殖、長膘及血液常規(guī)生理指數(shù)的影響

科研組直接試驗(yàn)的302頭牛，經(jīng)3年來的測察，無一頭牛因植黃手術(shù)引起術(shù)部感染化膿、腹膜炎、內(nèi)出血、膽囊瘺管或膽道阻塞而致殘、致傷或死亡。

2.3.1 對勞役的影響 經(jīng)對保靖縣白云農(nóng)場、永順縣永茂鎮(zhèn)、張家界永定區(qū)羅塔坪鄉(xiāng)和洪江市深渡鄉(xiāng)等四個(gè)植黃數(shù)量較多（40～90頭）的試驗(yàn)點(diǎn)一年一度的實(shí)地考察，畜主和鄉(xiāng)村領(lǐng)導(dǎo)一致反映，手術(shù)后1個(gè)月左右即可正常使役（事實(shí)上術(shù)后1周傷口即已愈合，10 d即可輕役）。一般都能在農(nóng)忙季節(jié)順利完成勞役任務(wù)。

2.3.2 對膘情的影響 選個(gè)體大小相似，公牛、母牛各半的植黃牛20頭，進(jìn)行體尺測量，觀察植黃前后膘情變化。結(jié)果表明，植黃1年后膘情不但不減，反而頭均增重32.5kg。例如保靖縣白云山農(nóng)場觀察90頭植黃牛，增膘65頭，占70.25%，無明顯增膘24頭，占26.66%，因患肝片吸蟲病營養(yǎng)低下1頭，占3.12%。

2.3.3 對繁殖力的影響 在永茂鎮(zhèn)、羅塔坪鄉(xiāng)和深渡鄉(xiāng)三個(gè)點(diǎn)，對已植黃的86頭有繁殖力的母牛觀察統(tǒng)計(jì)，植黃時(shí)正處于孕期（2～6月），術(shù)后正常分娩牛犢16頭，植黃時(shí)已產(chǎn)牛犢（1～3月）正在哺乳，術(shù)后母子生長發(fā)育正常24頭；植黃時(shí)處于空懷期，術(shù)后（1～6月）正常發(fā)情配種，妊娠產(chǎn)犢46頭。無一頭因植黃引起流產(chǎn)、死胎、死犢或終生不育者。種公牛植黃后雄性不減，能照常配種繁殖，并收取到質(zhì)優(yōu)量多的牛黃。如永茂鎮(zhèn)農(nóng)戶袁宣金，羅塔坪鄉(xiāng)檳堂村畜主李冬所養(yǎng)的種公牛，分別為4歲和6歲，育黃期間分別配種21頭和23頭，均1次受孕正常產(chǎn)犢。

2.3.4 對血液常規(guī)生理指數(shù)的影響 在洪江市深渡鄉(xiāng)取植黃牛15頭與對照牛15頭的血液做血常規(guī)檢驗(yàn)對比。結(jié)果表明：紅細(xì)胞總數(shù)與血紅蛋白含量，植黃牛比對照牛略有增數(shù)，植黃引起機(jī)體反射性的造血機(jī)能旺盛。植黃牛白細(xì)胞總數(shù)稍有增加，顯示機(jī)體對膽囊內(nèi)異物（黃床與菌種）的刺激已引起炎性反應(yīng)，隨著手術(shù)創(chuàng)口的愈合，炎性反應(yīng)可逐漸消退。植黃牛白血球分類計(jì)數(shù)出現(xiàn)淋巴球和中性球比例升高的現(xiàn)象，顯示機(jī)體免疫機(jī)能增強(qiáng)。

上述實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，培植牛黃雖然在牛體內(nèi)引起一定的防御性反應(yīng)，但并不影響牛的整體生理機(jī)能，而膽囊內(nèi)的炎性反應(yīng)和膽汁變得濃稠與排泄緩慢，正是牛黃形成的基本因素，有利于早期成黃。

3 結(jié)果與討論

3.1 試驗(yàn)結(jié)果

用湘西黃牛培植牛黃獲得成功。培植牛黃不影響牛的使役、繁殖和長膘。手術(shù)取黃148頭，得干黃1 947.16g，頭均產(chǎn)黃13.16g，經(jīng)省級藥檢所等權(quán)威科研機(jī)關(guān)質(zhì)量檢測，其中81.78%達(dá)到部頒標(biāo)準(zhǔn)。

3.2 影響培植牛黃產(chǎn)量與質(zhì)量的主要因素

3.2.1 黃床 試驗(yàn)證明采用HX-4型卵型溝回狀黃床，外包粗白棉布，內(nèi)裝細(xì)紗條為好。

3.2.2 菌種 菌種首選“WL-6號”，每牛膽內(nèi)用量3～5ml。

3.2.3 年齡 植黃牛以選用年齡老（10～12歲）、個(gè)體大（體重在250kg～300kg，膘情差但基本健康）的山區(qū)黃牛為宜。

3.2.4 麻醉 0.05～0.10 mg/kg肌注靜松靈配合傳導(dǎo)局麻，能使湘西黃牛安靜站立接受手術(shù)。

3.2.5 術(shù)式 植黃手術(shù)方式宜快速、簡潔，將黃床固定于膽囊底部，再作膽囊頸部半結(jié)扎術(shù)，是提高產(chǎn)量與質(zhì)量的重要手段。

3.2.6 時(shí)間 育黃時(shí)間應(yīng)在18～20個(gè)月為宜。

3.3 討論

為何有天然牛黃者消瘦、貧血和黃疸，而培植牛黃者反而增膘？我們認(rèn)為：天然牛黃的形成，皆因肝膽疾病所致。即在牛黃形成之前，就有疾病發(fā)生。尤其是管黃形成之后，加劇了肝膽疾病，固多呈病態(tài)。而培植牛黃全過程是經(jīng)過科學(xué)設(shè)計(jì)，以不影響牛體的正常生理功能為基礎(chǔ)。牛黃床定位于膽囊空腔之中，膽囊松弛富有彈性，不致造成膽道阻塞；接種的牛黃菌種經(jīng)過選育，毒力低，活性強(qiáng)（產(chǎn)生β-G酶的活性強(qiáng)），感染定向。正是由于它們的共同作用和良性刺激，使膽囊壁增厚，膽汁變得濃稠，但仍能排入膽道，并反射性地引起整個(gè)胃腸蠕動(dòng)增強(qiáng)，食欲及消化旺盛，從而激活了其肝膽功能。只要手術(shù)質(zhì)量高，不但牛黃量多質(zhì)優(yōu)，且能使牛體增膘。這為充分利用老廢退役黃牛，育肥植黃同步兩用提供了依據(jù)。

試驗(yàn)證明培植牛黃不影響牛的長膘，即可利用山區(qū)退役的老廢?；驍M屠宰的肉牛植黃，育肥一年后屠宰時(shí)一并取黃。將育肥與植黃同步進(jìn)行，是合理利用老廢牛，拓寬肉牛多種用途，提高牛的經(jīng)濟(jì)效益，刺激養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展，充分開發(fā)山區(qū)資源的一條新途徑。武陵山區(qū)地跨湘鄂川黔四省邊界，總面積11.7萬多km2，可利用草場80萬hm2，有國內(nèi)著名的優(yōu)良地方牛種—湘西黃牛100多萬頭。它具有個(gè)體較大（一般體重300kg～400kg）、毛色金黃、體格勻稱、肌肉豐滿、耐寒熱暑濕，適應(yīng)山區(qū)、役肉兼用等優(yōu)勢。據(jù)有關(guān)部門統(tǒng)計(jì)，每年可出欄肉牛20萬頭，若能利用其1/10也就是2萬頭牛作育肥同步植黃，平均每次產(chǎn)黃只以10g計(jì)算，可得牛黃200 kg，按50元/g計(jì)算，僅產(chǎn)黃一項(xiàng)，每年可新增創(chuàng)收1 000萬元。