陸 宇 陳 瑜 周 希

（1.江蘇省無(wú)錫市惠山區(qū)錢橋街道畜牧獸醫(yī)站，無(wú)錫 214000；2.江蘇省無(wú)錫市惠山區(qū)畜牧獸醫(yī)站，無(wú)錫 214000）

高致病性禽流感（HPAI）是當(dāng)前世界范圍內(nèi)對(duì)養(yǎng)禽業(yè)及公共衛(wèi)生威脅最大的A類烈性動(dòng)物傳染病。近幾年來(lái)，該病在全球范圍擴(kuò)散蔓延，據(jù)報(bào)道已有60多個(gè)國(guó)家和地區(qū)發(fā)生疫情或分離到病毒。2004年以來(lái)，我國(guó)部分地區(qū)也出現(xiàn)了疫情，造成重大經(jīng)濟(jì)損失和社會(huì)影響。采取疫苗免疫是我國(guó)目前防控HPAI的主要措施之一。為了解雛雞禽流感（AI）母源抗體和免疫雞AI抗體產(chǎn)生的消長(zhǎng)情況，合理制定有效免疫程序，提高免疫效果，我們于2011年5月起，選用禽流感H5N1（Re-4Re-5）滅活疫苗，對(duì)免疫雞進(jìn)行了HI抗體消長(zhǎng)跟蹤監(jiān)測(cè)，現(xiàn)報(bào)告如下：

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

在無(wú)錫惠山區(qū)某小型封閉養(yǎng)雞場(chǎng)，選定300只1日齡苗雞（種雞經(jīng)過(guò)禽流感疫苗免疫），在一獨(dú)立雞舍，分5個(gè)試驗(yàn)組，每組60只分隔飼養(yǎng)，飼料、日常管理不變。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)試劑

均由青島異邦生產(chǎn)。禽流感H5N1（Re-5）抗原，批號(hào)20110328；禽流感H5N1（Re-5）陽(yáng)性血清，批號(hào)20110328；禽流感H5N1（Re-5）陰性血清，批號(hào)20110328；禽流感H5N1（Re-4）抗原，批號(hào)20110328；禽流感H5N1（Re-4）陽(yáng)性血清，批號(hào)20110328；禽流感H5N1（Re-4）陰性血清，批號(hào)20110328。

1.3 疫苗

禽流感H5N1（Re-4Re-5）滅活疫苗，由青島異邦生產(chǎn)，批號(hào)2010125。

1.4 母源抗體測(cè)定

分別于1、3、7、14、28日齡隨機(jī)每次選苗雞30只，心臟或翅靜脈采血，分離血清備用。

1.5 疫苗2免后抗體產(chǎn)生情況及維持時(shí)間觀察

根據(jù)一免后抗體的消長(zhǎng)規(guī)律，確定2免時(shí)間，采用肌注進(jìn)行2免，然后觀察其抗體消長(zhǎng)規(guī)律。

1.6 不同免疫劑量免疫效果試驗(yàn)

選取3個(gè)實(shí)驗(yàn)組，分別肌內(nèi)注射禽流感H5N2疫苗0.3ml、0.5ml、0.7ml，然后分別于第3、7、14、21、28、56 d翅靜脈采血進(jìn)行血清抗體檢測(cè)，觀察其抗體產(chǎn)生消長(zhǎng)情況。

1.7 HA和HI試驗(yàn)

按常規(guī)法在96孔110°的V型微量反應(yīng)板上進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 雞禽流感母源抗體消長(zhǎng)情況

試驗(yàn)雞禽流感母源抗體消長(zhǎng)情況詳見圖1。

圖1 禽流感母源抗體水平消長(zhǎng)情況曲線圖

2.2 禽流感H5N1（Re-4Re-5）滅活疫苗免疫后抗體消長(zhǎng)情況

試驗(yàn)雞只注射禽流感疫苗后抗全消長(zhǎng)情況詳見圖2。

圖2 禽流感免疫后抗體水平消長(zhǎng)曲線圖

2.3 不同免疫劑量免疫后抗體檢測(cè)情況

對(duì)不同免疫劑量免疫后的抗體情況進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果詳見表1。

表1 不同免疫劑量對(duì)H5 HI抗體的檢測(cè) （log2）

3 結(jié)論與討論

（1）試驗(yàn)表明，苗雞AI母源抗體在3日齡達(dá)到最高值，基本接近母體水平，隨后迅速下降，7日齡接近母體的一半，14日齡時(shí)母源抗體大多在2Log2以下，28日齡基本檢不到母源抗體，提示有較高母源抗的苗雞應(yīng)在14日齡左右首免比較好。

（2）從圖2可看到，禽流感免疫抗體平均水平在首免后第18 d達(dá)到高峰5.3 log2，以后開始下降，第35 d回落到4 log2的保護(hù)臨界值，而在一免后第3～4周進(jìn)行加強(qiáng)免疫后，抗體水平能一直保持在保護(hù)值以上，且能維持相當(dāng)長(zhǎng)一段時(shí)間，免疫效果確實(shí)。因此，在不能通過(guò)免疫監(jiān)測(cè)指導(dǎo)免疫的地區(qū)，為確保AI免疫質(zhì)量，應(yīng)在首免后3～4周再加強(qiáng)免疫1次，實(shí)施2次免疫。

（3）從表1可以看出，禽流感H5N1（Re-4Re-5）滅活疫苗劑量較大的試驗(yàn)組產(chǎn)生免疫抗體的速度和滴度都要高于劑量較少的組，通過(guò)對(duì)不同時(shí)期部分雞的剖檢也未發(fā)現(xiàn)因免疫劑量加大而發(fā)生肉眼可見的吸收障礙。因此，我們可推廣應(yīng)用在平常免疫時(shí)使用推薦劑量，而在緊急免疫時(shí)使用加大劑量的免疫方法。