羅教秀

淋巴組織細(xì)針吸取細(xì)胞HE染片褪色后作免疫組化的探討

羅教秀

目的探討淋巴組織細(xì)針吸取細(xì)胞(FNAC)HE染片褪色后作免疫組化的效果。方法12例淋巴組織細(xì)針吸取細(xì)胞學(xué)HE染片，采用高錳酸鉀-草酸褪色后應(yīng)用免疫組織化學(xué)S-P法，對12例淋巴組織針吸細(xì)胞涂片進(jìn)行標(biāo)記，光學(xué)顯微鏡下觀察染色效果。結(jié)果HE染色細(xì)胞學(xué)診斷:5例無惡性細(xì)胞，4例核異質(zhì)細(xì)胞，3例可疑惡性細(xì)胞;HE染片褪色行免疫組化標(biāo)記后診斷:3例轉(zhuǎn)移性癌，3例可疑惡性淋巴瘤，6例無惡性細(xì)胞。結(jié)論FNAC檢查對初篩淋巴結(jié)疾患的良惡性判斷及腫瘤分型有重要意義;淋巴組織細(xì)針吸取細(xì)胞HE染片褪色后行免疫組化染色，方法簡便易行，在病理診斷中有一定的應(yīng)用價值。

淋巴組織;細(xì)針吸取細(xì)胞;涂片

細(xì)針吸取細(xì)胞學(xué)(FNAC)對于淋巴結(jié)各類疾病的分類診斷已有較多文獻(xiàn)報道［1］。本文主要探討淋巴組織細(xì)針吸取細(xì)胞涂片蘇木精-伊紅(HE)染片褪色后，行免疫組化染色輔助診斷的效果，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本和試劑 選用我科細(xì)針抽吸淋巴組織細(xì)胞標(biāo)本(HE染色)12例，一抗使用廣譜CK、LCA、CD20三種抗體，二抗采用Dako公司的REALTM EnvisionTM通用型二步法檢測試劑盒，褪色劑用0.25% 高錳酸鉀及0.5%草酸。

1.2 方法 ①選用20ml一次性無菌注射器，注射用7號針頭，無需麻醉。操作時沿頸部淋巴結(jié)長軸方向進(jìn)針，進(jìn)針深度以穿入淋巴結(jié)假想半徑1/3～2/3為宜。進(jìn)針后，形成負(fù)壓，并向不同方向反復(fù)提插吸取幾次后，用無菌棉球壓迫進(jìn)針部位出針，立即作厚薄均勻的涂片，浸入95%乙醇中固定，HE染色。②將玻片放入I、Ⅱ號缸二甲苯內(nèi)各30min;先后置入無水酒精、95% 酒精、70%酒精各5min，蒸餾水洗3min。③將水化的玻片浸入0.25%高錳酸鉀中5min，蒸餾水洗3min;再置入0.5% 草酸漂白2min，蒸餾水洗3min。④褪色后的玻片放入PBS液漂洗3次。不進(jìn)行抗原修復(fù)，未加阻斷劑。加一抗各50μl，置濕盒內(nèi)4℃孵育過夜。PBS液漂洗3次，滴加Envision二抗50μl，置濕盒內(nèi)37℃孵育30min。PBS液漂洗3次，滴加DAB顯色劑50μl，顯微鏡下控制顯色程度，待陽性染色明顯，背景未著色前，放入蒸餾水中終止顯色。

2 結(jié)果

12例淋巴組織針吸細(xì)胞涂片經(jīng)HE染色細(xì)胞學(xué)診斷:5例無惡性細(xì)胞，4例核異質(zhì)細(xì)胞，3例可疑惡性細(xì)胞;HE染片褪色行免疫組化標(biāo)記后診斷:3例轉(zhuǎn)移性癌，3例可疑惡性淋巴瘤，6例無惡性細(xì)胞。活檢石蠟切片診斷證實(shí)12例病變中良性病變6例，惡性病變6例。針吸細(xì)胞涂片經(jīng)HE染色組良性符合率83.33%，惡性符合率50%。HE涂片褪色行免疫組化標(biāo)記組良性符合率100%，惡性符合率100%。

3 討論

免疫組化技術(shù)對淋巴瘤的分型較為準(zhǔn)確，特別是對淋巴結(jié)造血系統(tǒng)與上皮源性腫瘤的鑒別起到至關(guān)重要的作用。本實(shí)驗(yàn)12例針吸細(xì)胞涂片標(biāo)本HE染色細(xì)胞學(xué)診斷有分歧的經(jīng)褪色行免疫組化標(biāo)記后均都明確診斷，并經(jīng)組織病理學(xué)證實(shí)。說明針吸細(xì)胞涂片作免疫細(xì)胞化學(xué)染色在日常病理工作中是有意義的，免疫細(xì)胞化學(xué)為細(xì)胞學(xué)診斷和鑒別診斷提供了一個較為可靠的手段。為正確的細(xì)胞學(xué)診斷提供了依據(jù)，提高了疾病診斷的準(zhǔn)確率。所以本褪色方法行之有效，可以在實(shí)踐工作中加以運(yùn)用。

［1］沈銘昌，徐維萍，王龍富，等.細(xì)針吸取細(xì)胞病理學(xué).北京:人民衛(wèi)生出版社，2000:271-306.

ObjectiveTo observe the clinical effects of immunohistochemistry of cell from lymph tissue by fine needle aspiration after HE staining section fading.MethodsThe cell from lymph tissue by fine needle aspiration after HE staining section fading for 12cases，using immunohistochemical S-P method after potassium permanganate and ethanedioic acid fade to mark the lymph tissue by fine needle aspiration after HE staining section fading.ResultsThe cytologic diagnosis by HE stain as follows.ConclusionFNAC is very important to the first screening in the benign malignant lymph node lesions and tumor type.

Adenoid tissue;Fine needle aspiration cell;Smear

528402廣東省中山市人民醫(yī)院病理科