祁金玉，高國平，信雯，王月

(沈陽農業(yè)大學，遼寧沈陽 110866)

刺槐Robinia pseudoacacia因具有速生性和用途多樣性被許多國家廣泛引種栽培，與桉樹、楊樹一起被稱為世界上引種最為成功的三大樹種之一。當前刺槐在中國已經鄉(xiāng)土化，而且形成很多地方類型，是非常重要的城市綠化樹種;但是近年來在遼寧沈陽棋盤山等地區(qū)發(fā)現(xiàn)刺槐心材腐朽病造成樹木死亡或風折后死亡［1］。

刺槐心材腐朽病由槐生多年臥孔菌Perenniporia robiniophila(Murr.)Ryv.引起，屬于臥孔菌屬真菌。在我國臥孔菌有11種，南、北方均有分布。寄生在活立木上的臥孔菌多為多年生，長在樹干基部，也寄生在倒木和枯立木上，造成針葉樹和闊葉樹白色腐朽病［2］?；鄙嗄昱P孔菌以前僅作為一種腐生菌在國內的分布加以報道，且描述簡單［3－4］。戴玉成等［1］首次將槐生多年臥孔菌確定為樹木病原菌，并描述其形態(tài)特征—子實體、菌絲結構、菌肉、孢子的大小，形態(tài)、顏色，臥孔菌發(fā)病的癥狀。

由于刺槐心材腐朽病防治的研究國內外還沒有切實可行防治措施的報道，本試驗使用9種殺菌劑對刺槐心材腐朽菌進行毒力測定，以期為防治的藥劑選擇提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 2008年10月在沈陽市棋盤山風景區(qū)人工刺槐純林30～40年生病株上采集新鮮子實體，通過分離純化、鑒定得到槐生多年臥孔菌［5］。

采用的以下9種藥劑應用普遍，除退菌特毒性中等，其它均為低毒。

70%甲基硫菌靈可濕性粉劑(WP)，保定農藥廠;80%代森鋅WP，沈陽豐收農藥有限公司;75%百菌清WP，四川省廣漢市利邦生化廠;50%多菌靈WP，山東德州大成農藥有限公司;50%退菌特WP，天津市捷康化學品有限公司;77%可殺德WP，美國杜邦公司;15%三唑酮WP，四川國光農化有限公司;45%石硫合劑結晶粉，宜賓川安高科農藥有限公司;70%代森錳鋅WP，利民化工有限公司。

1.2 方法

1.2.1 藥劑的初步篩選 采用室內菌絲生長速率法測定。在無菌條件下，把9種藥劑分別配成不同的藥劑濃度PDA培養(yǎng)基。將菌餅接于含藥劑培養(yǎng)基中央，置于25℃恒溫箱中培養(yǎng)，加入清水培養(yǎng)基作為對照，每處理5次重復。培養(yǎng)3 d后采用生長速率法測量菌落直徑。連續(xù)4 d測量菌落直徑，然后根據(jù)5次重復的結果，算出各處理菌絲生長的平均直徑［6－8］。根據(jù)測得的數(shù)據(jù)算出相對抑制率。

1.2.2 對初篩藥劑的毒力測定 在藥劑初步篩選的基礎上，用菌絲生長速率法進行測定。

根據(jù)測得的數(shù)據(jù)算出相對抑制率，求出毒力方程及其相關系數(shù)R值，y為相對抑制率對應的機率值，x為濃度對數(shù)值。利用毒力方程求出抑制中濃度EC50。

2 結果與分析

2.1 藥劑的初步篩選 9種藥劑中，三唑酮、代森錳鋅、代森鋅抑菌作用明顯。15%三唑酮的抑制作用最明顯，在10 000倍液時，菌絲仍無法生長。70%代森錳鋅在5 000倍液時平均抑菌率為100%，8 000倍液時平均抑菌率為97.29%。80%代森鋅在3 000倍液時平均抑菌率為100%，5 000倍液時平均抑菌率為93.79%。其他6種藥劑對病原菌也有一定抑制作用，但效果不明顯。其中多菌靈對病原菌的抑制作用最差，50倍液時平均抑菌率僅為42.65%。其他4種藥劑50倍液時抑菌率在82%～97%之間。

2.2 初篩藥劑的毒力測定 已篩選的3種藥劑抑制作用測定結果見表1。三唑酮在20 000～40 000倍液時菌落不生長，抑菌率為100%，50 000倍液平均抑菌率為99.01%;代森錳鋅7 000倍液平均抑菌率為99.16%，其后隨著倍數(shù)的增加，抑菌率下降;代森鋅4 000倍液平均抑菌率為99.23%，隨著藥劑倍數(shù)的增加，抑菌效果下降。

表1 3種藥劑對槐生多年臥孔菌抑制作用的測定結果

對表1進行回歸統(tǒng)計分析，以平均菌落直徑為基礎數(shù)據(jù)，擬合出各藥劑濃度對數(shù)值(x)與抑菌率幾率值(y)的毒力回歸方程(表2)。根據(jù)毒力回歸方程算得3種藥劑的抑制中濃度EC50。15%三唑酮的EC50最小，為2.8 mg/L，80%代森鋅EC50最大，為62.7 mg/L。

表2 不同殺菌劑對槐生多年臥孔菌的毒力方程

綜合抑制率和抑制中濃度分析，3種藥劑中15%三唑酮對病原菌的抑菌效果最好，平均抑菌率達到99%，且用藥量最小，說明槐生多年臥孔菌對三唑酮最敏感，其次代森錳鋅。

3 結論與討論

經對9種藥劑室內毒力的初步篩選，三唑酮、代森錳鋅和代森鋅對槐生多年臥孔菌相對防效較好;進一步試驗證明，15%三唑酮對刺槐心材腐朽菌的抑制效果較好，40 000倍液平均抑菌率還為100%，EC50為2.8 mg/L;其次是70%代森錳鋅，7 000倍液平均抑菌率為99.16%，EC50為42.21 mg/L。

刺槐心材腐朽病的防治，國內外還沒有切實可行的防治措施的報道。及早清除受害木上的子實體是減少病害進一步擴展的途徑之一。另外，在有條件的地區(qū)及時清除受害木也是減少病害擴展的有效方法。本研究只是針對刺槐心材腐朽菌作為活立木病原菌進行室內藥物防治試驗，室外防治時藥劑的施用時期、施用方式、氣候、環(huán)境條件以及樹木自身的耐藥性等因素都會影響藥劑的使用和藥效的發(fā)揮，所以野外施用的效果，還有待于野外進一步驗證。

［1］ 戴玉成，高強．刺槐心材腐朽病初報［J］．東北林業(yè)大學學報，2005，33(1):88 －90．

［2］ Allen E A．，Morrison D J，Wallis G W．Common tree diseases of British Columbia［M］．Canadian Forest Service，1996:1 －48．

［3］ 戴玉成，秦國夫，徐梅卿．中國東北地區(qū)的立木腐朽菌［J］．林業(yè)科學研究，2000，13(1):15 －22．

［4］ Zhao J D，Zhang X Q．The Polyporus of China［J］．Bibl Mycol，1992，145:510 －524．

［5］ 高國平，信雯，鄭雅楠，等．刺槐心材腐朽菌鑒定及生物學特性研究［J］．東北林業(yè)大學學報，2010，38(8):60 －62．

［6］ 任小杰．草莓炭疽病病原鑒定、生物學特性及藥劑毒力測定［D］．浙江揚州:揚州大學，2007:27 －28．

［7］ 張勇，李曉軍，曲健祿，等．扁桃流膠病病原鑒定及藥劑毒力研究［J］．山東農業(yè)科學，2008(1):74－77．

［8］ 李赤，于莉，陳永欽，等．9種殺菌劑對香蕉枯萎病菌的室內毒力測定［J］．中國南方果樹，2008，37(2):44 －45．