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        熒光定量PCR法檢測(cè)丙型肝炎病毒核酸的臨床意義

        2012-01-22 21:40:15王玉紅胡曉芳關(guān)慧霞齊志丹高瑞環(huán)
        中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué) 2012年11期
        關(guān)鍵詞:丙肝丙型肝炎抗病毒

        王玉紅,胡曉芳,關(guān)慧霞,齊志丹,高瑞環(huán),王 靜

        (沈陽軍區(qū)總醫(yī)院 檢驗(yàn)科,遼寧 沈陽110840)

        丙型肝炎是一種主要經(jīng)血液傳播的疾病,HCV感染可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥、壞死和纖維化,部分患者甚至可發(fā)展為肝硬化及肝癌[1],對(duì)人類的健康和生命危害極大,已成為嚴(yán)重的社會(huì)和公共衛(wèi)生問題。抗-HCV檢測(cè)可反映HCV的感染或既往感染,而HCV-RNA定量檢測(cè)是反映HCV復(fù)制的特征指標(biāo),是抗病毒治療的依據(jù)。本文對(duì)277例抗-HCV陽性患者同時(shí)進(jìn)行HCV-RNA定量檢測(cè),并進(jìn)行對(duì)比分析,結(jié)果進(jìn)一步表明二者同時(shí)檢測(cè),對(duì)丙肝感染的診斷、抗病毒治療時(shí)機(jī)的選擇和療效觀察具有重要的意義,現(xiàn)報(bào)告如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 277例抗-HCV陽性血清標(biāo)本均來自我院2008年12月至2010年12月門診及住院患者。

        1.2 方法 抗-HCV采用ELISA法測(cè)定,試劑由廈門新創(chuàng)生物工程公司生產(chǎn)提供。HCV-RNA定量檢測(cè)采用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(FQ-RT-PCR)法,儀器為美國 ABI公司7300型熒光定量PCR儀,試劑由上海科華生物技術(shù)有限公司提供,所有標(biāo)本嚴(yán)格按照試劑說明書操作及判定結(jié)果。

        2 結(jié)果

        277例抗-HCV 陽性患者中,有213例(76.90%)HCV-RNA定量結(jié)果≥1.0×103IU/ml,病毒含量在1.0×103~1.6×108IU/ml之間,有64例(23.10%)HCV-RNA 定量結(jié)果<1.0×103IU/ml。

        3 討論

        本研究結(jié)果顯示277例抗-HCV陽性中,HCVRNA含量≥1.0×103IU/ml,占76.90%,比文獻(xiàn)報(bào)道60%-70% 略 高[2]。HCV-RNA 定 量 <1.0×103IU/ml的占23.10%。二者結(jié)果差異主要來自實(shí)驗(yàn)方法學(xué)和臨床表現(xiàn)兩個(gè)方面,具體原因?yàn)椋孩倏梗璈CV采用ELISA法檢測(cè),由于受方法學(xué)的影響,有非特異性反應(yīng)可出現(xiàn)假陽性[3]。②標(biāo)本不及時(shí)檢測(cè)或保存不當(dāng),標(biāo)本本身或環(huán)境中的RNA降解酶使RNA降解,從而HCV-RNA含量的檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陰性[4]。③實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)HCV-RNA含量,靈敏度雖然很高,但有一定的閾值,當(dāng)患者體內(nèi)HCV-RNA病毒含量低于檢測(cè)下限[5],也無法檢出。④當(dāng)感染HCV患者接受抗病毒治療后,HCV-RNA復(fù)制受限或出現(xiàn)變異,HCVRNA亦無法檢出。⑤抗-HCV陽性僅提示有HCV感染或既往感染,當(dāng)體內(nèi)HCV-RNA病毒被清除后,其抗體仍可持續(xù)1-10年[6]。⑥丙肝感染者體內(nèi)HCV-RNA病毒含量的高低,隨著病程變化,存在間隙性陰性[7]。

        綜上所述,抗-HCV檢測(cè)雖然可間接反映HCV的感染或既往感染,但不能作為丙肝感染的診斷及抗病毒治療的依據(jù)。因此臨床對(duì)抗-HCV陽性患者必須進(jìn)行HCV-RNA檢測(cè),HCV-RNA定量檢測(cè)≥1.0×103IU/ml者可考慮HCV感染并選擇抗病毒治療;對(duì)抗-HCV陽性 HCV-RNA定量檢測(cè)<1.0×103IU/ml患者必須定期復(fù)檢HCV-RNA,以關(guān)注病程的變化。即抗-HCV陽性患者同時(shí)進(jìn)行HCVRNA定量檢測(cè)具有重要的臨床意義。

        [1]華 瑞,王 峰,??∑?我國慢性丙型肝炎治療進(jìn)展[J].中國實(shí)用內(nèi)科學(xué)雜志,2005,25(9):778.

        [2]周永香.丙型肝炎病毒抗體與丙型肝炎病毒核糖核酸的關(guān)系[J].醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐,2003,16(8):890.

        [3]莊 輝.重視丙型肝炎的研究[J].中華肝臟病雜志,2004,12(2):65.

        [4]趙 穎,魏 軍,王菊英.丙型肝炎病毒核酸定量測(cè)定的臨床價(jià)值[J].寧夏醫(yī)學(xué)雜志,2005,27(4):233.

        [5]黃大毛,范杰斐,唐發(fā)清.血清中HCV抗體與HCV-RNA檢測(cè)在臨床中的應(yīng)用[J].實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2007,14(5):1550.

        [6]崔艷香,邱香廷,王新花,等.FQ-PCR檢測(cè)丙肝病毒核酸的臨床價(jià)值[J].中華實(shí)用中西醫(yī)雜志,2005年,9(18):1302.

        [7]季 陽,莊 文,楊 翠,等.丙型肝炎病毒感染的l0名獻(xiàn)血者的追蹤研究[J].中國輸血雜志,2004,17(6):399.

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