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        α-及β-catenin在胃癌淋巴結轉移癌中的再表達及其臨床意義

        2012-01-19 08:08:40霍建設張宇龍張國栓崔專義王桂琦
        實用癌癥雜志 2012年6期
        關鍵詞:原發(fā)灶癌細胞上皮

        霍建設 張宇龍 張國栓 崔專義 王桂琦

        胃癌是人類常見的惡性腫瘤,每年全世界有80萬人死于胃癌[1],是我國最常見的惡性腫瘤之一。轉移是其主要致死原因,而淋巴結轉移是影響預后的重要因素[2]。雖然惡性腫瘤的浸潤和轉移是一個復雜的過程,但是有研究表明,一些黏附分子可能與腫瘤的浸潤和轉移有關,α-及β-連接蛋白 (α-及β-catenin)就是對細胞間黏著系統(tǒng)具有重要調(diào)控作用的功能性蛋白[3]。上皮型鈣黏蛋白(E-cadherin,E-cd)是1種跨膜糖蛋白,屬于鈣依賴經(jīng)典鈣黏著素家族成員,主要分布在非神經(jīng)上皮組織,可以與Catenin(Catenin,Cat,包含α、β、γ 3種)結合而介導Ca2+依賴性的細胞間黏附,這對于保持組織結構的完整性和極性起著極其重要的作用[4]。本實驗采用SP免疫組化法,檢測了該復合體中α-及β-catenin 在進展期胃癌及其相應轉移淋巴結中的表達狀況,探討其與進展期胃癌臨床病理因素的關系。

        1 材料與方法

        1.1 標本來源

        收集2006年 3月~2012年 2月石家莊市第一醫(yī)院外科手術切除并經(jīng)病理組織學檢查證實的進展期胃癌標本86例,男性70例,年齡30 ~79 歲;女性16例,年齡42 ~72 歲,平均年齡 59.2歲。胃癌組織病理學類型:黏液腺癌21例,管狀腺癌57例,印戒細胞癌4例和腺鱗癌2例,未分化癌1例,鱗癌1例。其中高分化14例,中分化21例,低分化51例;侵及漿膜層78例,未侵及漿膜層8例。入選病例均未接受化療或放療,無長期服用非甾體類抗炎藥、皮質激素藥物史。

        1.2 試劑

        兔抗人多克隆α-catenin及β-catenin抗體購于NEOMARKERS 公司,SP法試劑盒購于北京中杉公司。

        1.3 方法

        標本用10%甲醛固定,石蠟包埋,4 μm連續(xù)切片。采用免疫組織化學SP法,操作按說明書進行,切片常規(guī)脫蠟入水,3%過氧化氫阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,微波抗原修復,5%羊血清處理20 min,滴加NF-κB一抗4℃過夜,DAB顯色,蘇木精復染;PBS代替一抗作為陰性對照,以每張切片上相對正常的黏膜作為陽性對照。

        1.4 結果判定

        僅胞膜明顯染色的細胞被判定為正常染色;如染色不連續(xù),明顯減弱或者缺失,或出現(xiàn)胞質染色,則評定為異常染色。每張切片按照全部癌細胞中正常染色細胞的百分率分為三級:1級為0~50%;2級為51% ~ 80%;3級為81% ~100%[5]。對于原發(fā)灶,如評定為3級,則此病例被認為是α-及β-catenin正常表達;而1級和2級染色則被認為α-及β-catenin異常表達。對于轉移淋巴結,如染色為3級而原發(fā)灶為1級或2級染色,或轉移淋巴結染色為2級而其原發(fā)灶染色為1級,則此病例被評定為α-及β-catenin再表達陽性;否則為再表達陰性。

        1.5 統(tǒng)計學方法

        應用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包對所得數(shù)據(jù),采用χ2檢驗以及需要校正的χ2檢驗進行統(tǒng)計學分析,檢驗標準α= 0.05,P<0.05為差異有顯著性。

        2 結果

        2.1 α-及β-catenin表達情況

        86例進展期胃癌中,α-及β-catenin在原發(fā)灶中出現(xiàn)胞膜染色明顯減弱或者缺失,并出現(xiàn)胞質染色,其不正常表達率分別為97.67%(84/86)和96.51(83/86)(表1),只有1例癌原發(fā)灶中2種連接蛋白表達正常。

        2.2 α-及β-catenin在轉移淋巴結中再表達及其與臨床病理因素的關系

        α-及β-catenin在轉移淋巴結癌細胞中再表達率分別為31.40%和23.26%。86例中,37例出現(xiàn)1種或1種以上連接蛋白陽性表達,其中27例出現(xiàn)1種連接蛋白陽性表達,10例出現(xiàn)2種連接蛋白表達陽性。α-catenin在高、中分化癌轉移淋巴結癌細胞中再表達率為45.71%,高于低分化癌轉移淋巴結癌細胞(21.57%)(P<0.05);β-catenin在高、中分化癌轉移淋巴結癌細胞中再表達率為40.00%,高于低分化癌轉移淋巴結癌細胞(11.76%)(P<0.05)。α-catenin表達與腫瘤病理分型(印戒細胞癌、未分化癌、鱗癌及腺鱗癌因樣本含量過小,故未予統(tǒng)計)密切相關(P<0.05);β-catenin表達與腫瘤病理分型無關(P>0.05)。α-及β-catenin表達與腫瘤大小及腫瘤浸潤深度無關(P>0.05)(表2)。

        表1 α-及β-catenin在胃癌原發(fā)灶中的表達情況(例,%)

        表2 α-及β-catenin在進展期胃癌轉移淋巴結癌細胞中再表達及其與臨床病理因素的關系(例)

        3 討論

        上皮鈣黏蛋白(E-cadherin)位于上皮細胞膜內(nèi),呈跨膜形式存在,受到連接蛋白(catenin)等功能性蛋白的調(diào)節(jié),β-catenin結合E-cadherin的胞內(nèi)段,再通過α-catenin連接于肌動蛋白細胞骨架,從而完成生物信號的傳導。有很多報道指出,E-cadherin/ catenin附和體受損,在許多人類上皮源性惡性腫瘤的發(fā)生和轉移中起著重要作用[6]。

        近年來一些研究表明,α-及β-catenin在原發(fā)灶的不正常表達對于上皮源性惡性腫瘤,特別是在胃癌的發(fā)生發(fā)展中起著重要促進作用[7,8]。本研究主要目的是評估α-及β-catenin在胃癌轉移淋巴結內(nèi)癌細胞的再表達情況。α-及β-catenin對于維持正常上皮組織的結構有著至關重要的作用,對于上皮源性惡性腫瘤來說,在某些原因作用下發(fā)生的α-及β-catenin功能障礙會影響癌細胞間的黏著,進而導致癌細胞脫離原發(fā)灶,促進了癌細胞的浸潤性生長和癌轉移的發(fā)生。但癌細胞由原發(fā)灶脫落本身并不足以致命,癌細胞在其他部位的再聚集并出現(xiàn)多發(fā)性轉移灶才是主要的致死原因。Bukholm等已經(jīng)注意到乳腺癌患者轉移灶內(nèi)癌組織β-catenin再表達的情況[9],Jawhari 等曾提及無論原發(fā)灶癌細胞的α-catenin表達正常與否,轉移淋巴結內(nèi)經(jīng)??梢砸姷狡湓诎┘毎牟徽1磉_情況[7]。本研究結果支持了他們的發(fā)現(xiàn),α-及β-catenin在轉移淋巴結內(nèi)癌細胞的再表達陽性率為31.40%和23.26%,說明就象α-及β-catenin在原發(fā)灶的不正常表達與癌細胞自原發(fā)灶脫落有關一樣,其在轉移灶內(nèi)的再表達陽性與癌細胞在轉移部位的再聚集和生長有關。

        α-及β-catenin功能異常是腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中的重要環(huán)節(jié),與其它因素共同作用促進了腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。在進展期胃癌轉移淋巴結內(nèi)癌細胞中存在α-及β-catenin的再表達,其再表達情況對腫瘤的發(fā)展起重要作用,且與腫瘤分化程度密切相關,可能是判斷胃癌患者預后的一項重要指標。

        [1] 趙 濱,楊 靜,勇 偉,等.生長抑素對胃癌 VEGFs 和 VEGF 受體影響的實驗研究〔J〕.實用癌癥雜志,2011,26(5):462.

        [2] Adachi Y,Kamakura T,Mori M,et al.Prognostic significance of the number of positive lymth nodes in gastric carcinoma〔J〕.Br J Sung,1994,81(3) :414.

        [3] Ozawa M,Kemler R.Mleculor organization of the uvomorulin-catenin complex〔J〕.J Cell Biol,1992,116(4):989.

        [4] 付建華,趙 曼.EGFR和E-cadherin與腫瘤的發(fā)生發(fā)展及其調(diào)控機制的研究進展〔J〕.實用癌癥雜志,2008,23(1):107.

        [5] Andrews NA,Jones AS,Heliwell TR,et al.Exression of the E-cadherin-catenin cell adherin complex in primary squamous cell carcinoma of the head and neck and their nodal metastases〔J〕.Br J Cancer,1997,75:1474.

        [6] Kohya N,Kitajima Y,Jiao W,et al.Effects of E-cadherin tr-ansrection on gene expression of a gallbladder carcinoma cell line:repression of MTS1/S100A4 gene expression〔J〕.Int J Cancer,2003,104:15.

        [7] Jaw hari A,Jordan S,Poole S,et al.Abnormal immunoreacticity of the E-cadherin-catenin complex in gastric carcinoma relationship with patient survival 〔J〕.Gastroenterology,1997,112(1):46.

        [8] Jaw hari A,Noda M,Farthing M,et al.Abnormal expression and function of the E-cadherin-catenin complex in gastric carcinoma cell lines〔J〕,Br J Cancer,1999,90(3-4):322.

        [9] Bukholm IK,Nesland JM,Borresen Dale Al.Re-expression of E-cadherin,α- andβ-catenin,but not of γ-catenin,in metastatic tissue from breast cancer patients 〔J〕.J Pathol,2000,190(1) :15.

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