蔣澤文，劉春云

(1、信豐縣人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科，江西 信豐 341600；2、贛州市第五人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科，江西 贛州341000)

塵肺患者全肺灌洗液中骨橋蛋白水平測定的分析

蔣澤文1，劉春云2

(1、信豐縣人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科，江西 信豐 341600；2、贛州市第五人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科，江西 贛州341000)

目的探討各期塵肺患者全肺灌洗液中骨橋蛋白（OPN）水平及其在塵肺防治中的意義。方法選取塵肺全肺灌洗患者60例，采用ELISA法測定全肺灌洗液的OPN水平，另外20例具有相同接塵史但未確診塵肺患者列為對照。結(jié)果塵肺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期組的肺泡灌洗液OPN水平均顯著高于對照組(P均<0.01)；Ⅰ、Ⅱ期組OPN水平低于Ⅲ期組(P<0.01)；Ⅱ期組高于Ⅰ期組(P均<0.05)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論OPN參與塵肺的發(fā)生發(fā)展過程,并且其水平可能與塵肺嚴(yán)重程度有關(guān)聯(lián)。

塵肺；全肺灌洗；骨橋蛋白

塵肺病是由于在職業(yè)活動中，長期吸入生產(chǎn)性粉塵并在肺內(nèi)潴留而引起的以肺組織彌漫性纖維化為主的全身性疾病。粉塵長期滯留在細(xì)支氣管與肺泡內(nèi)，使病人即使脫離粉塵作業(yè)場所，病變也會繼續(xù)發(fā)展，其機(jī)制仍不清楚。國內(nèi)外學(xué)者在探索其機(jī)理方面做了大量的研究，最近有研究發(fā)現(xiàn)骨橋蛋白(osteopontin，OPN)作為細(xì)胞因子參與了塵肺的發(fā)生發(fā)展。本文我們收集了60例塵肺患者和20例接塵者全肺灌洗液標(biāo)本，并對他們OPN水平進(jìn)行了檢測和分析。

1 資料與方法

1.1 對象及分組 隨機(jī)選取贛州市第五人民醫(yī)院2011年3月至2012年3月住院治療的塵肺患者60例,所有塵肺患者均經(jīng)市級職業(yè)病防治研究所按照GBZ70)2009《塵肺病診斷標(biāo)準(zhǔn)》予以確診并分期，其中Ⅰ期18例 ,Ⅱ期22例，Ⅲ期20例。同時20例具有相同接塵史但未確診塵肺患者列為對照。所有研究對象均排除各種感染所致急、慢性炎癥,系統(tǒng)性疾病包括肝腎功能不全、腫瘤、糖尿病、結(jié)締組織病、炎性腸病、口服類固醇及激素替代治療者。所選病例中在接塵史、年齡、性別構(gòu)成上無顯著性差異。

1.2 手術(shù)方法 全部病人均按肺灌洗常規(guī)進(jìn)行，快速麻醉誘導(dǎo)，采用雙腔支氣管導(dǎo)管插管，靜脈復(fù)合麻醉。插管成功，雙肺分隔滿意后，分別測左右肺氣道壓＜30cmH2O及各項(xiàng)指標(biāo)正常時開始灌洗。一般一側(cè)肺灌洗9～12次，灌洗量1000～1500ml/次，直至灌洗回收液澄清為止。

1.3 標(biāo)本采集 收集全部灌洗回收液,混勻后取30 ml于塑料離心管中,1200r/min離心10 min,取上清液置于-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 測定方法 采用ELISA法,測定藥盒USCN LIFE SCIENCE＆TECHNOLOGY COMPANY提供;專人專機(jī)進(jìn)行測量,操作按說明書進(jìn)行。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 結(jié)果處理采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行處理,計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,計(jì)量資料組內(nèi)及組間比較采用t檢驗(yàn)及方差分析,計(jì)數(shù)資料比較用χ2檢驗(yàn)。以P﹤0.05為差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究對象的一般情況 對照組及各期塵肺組一般資料比較,對照組與各期塵肺組接塵史、平均年齡及性別比如表所示。對照組及塵肺各期間常規(guī)資料比較均無明顯差異,見表1。

2.2 塵肺組與對照組各指標(biāo)比較 OPN塵肺組與對照組比較P＜0.01,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表2。

2.3 各組灌洗液OPN水平的比較 塵肺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期組的肺泡灌洗液OPN水平均顯著高于對照組(P均<0.01)；Ⅰ、Ⅱ期組OPN水平低于Ⅲ期組 (P<0.01)；Ⅱ期組高于Ⅰ期組(P均<0.05)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見表 3。

3 討論

塵肺的基本病變是結(jié)節(jié)的形成和彌漫性間質(zhì)纖維增生。在這一過程中，單核巨噬細(xì)胞、肺泡上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、肌成纖維細(xì)胞等都可以分泌細(xì)胞因子、炎性介質(zhì)等生物活性物質(zhì)，從而促進(jìn)成纖維細(xì)胞的遷移和增生以及間質(zhì)膠原的增生[1]。在眾多的細(xì)胞因子，骨橋蛋白作為一種機(jī)體反應(yīng)性功能蛋白,參與纖維化的過程已經(jīng)得到許多實(shí)驗(yàn)證實(shí)。OPN是一種分泌型糖基化磷蛋白，廣泛存在于各種組織和體液中，具有多種生物學(xué)活性，整合素αvβ3是其主要受體。OPN主要參與細(xì)胞的增殖、分化、遷移及黏附。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,塵肺患者肺泡灌洗液OPN水平均明顯高于接塵人群,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。近年來研究發(fā)現(xiàn)，在呼吸系統(tǒng)，OPN在損傷上皮、肺泡與間質(zhì)巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞以及肺血管內(nèi)皮呈現(xiàn)高表達(dá)[2]。在肺纖維化的過程中，活化的成纖維細(xì)胞可能是OPN主要來源之一[3]，反過來OPN作為一種多功能細(xì)胞因子和細(xì)胞外基質(zhì)，能夠協(xié)同多種炎癥細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子激活成纖維細(xì)胞，使OPN呈現(xiàn)高表達(dá)。OPN可上調(diào)成纖維細(xì)胞中金屬蛋白酶1組織抑制劑(T1MP-1)和I型膠原蛋白表達(dá)，下調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶-1(MMP-1)的表達(dá)，從而導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)蓄積[4]，而細(xì)胞外基質(zhì)蓄積是所有纖維化疾病的最大特征。

表1 4組一般臨床資料比較(±s)

表1 4組一般臨床資料比較(±s)

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表2 塵肺組與對照組各指標(biāo)比較(±s)

表2 塵肺組與對照組各指標(biāo)比較(±s)

注：與正常組比較◇P＜0.01。

例數(shù) OPN水平(ng/ml)對照組塵肺組組別20 60 35.62±9.53 90.87±22.77◇

表3 各期塵肺組與對照組各指標(biāo)比較(±s)

表3 各期塵肺組與對照組各指標(biāo)比較(±s)

注：與對照組比較△P<0.01；與Ⅰ期塵肺比較＊P<0.01；與Ⅱ期塵肺比較 ＃P<0.05。

組別 例數(shù) OPN(ng/ml)對照組Ⅰ期塵肺組Ⅱ期塵肺組Ⅲ期塵肺組20 18 22 20 35.62±9.53 65.41±12.01△96.01±13.46△＊108.13±17.95△＊＃

在對塵肺灌洗液OPN的檢測中發(fā)現(xiàn)，塵肺Ⅱ期患者肺泡灌洗液中OPN水平高于Ⅰ期;差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示OPN水平隨肺纖維化的出現(xiàn)分泌增加,且隨疾病嚴(yán)重程度有升高趨勢。Ⅰ期、Ⅱ期組OPN水平高于Ⅲ期組(P<0.01)，推測可能是塵肺Ⅰ期、Ⅱ期主要病變是彌漫性間質(zhì)纖維增生，塵肺Ⅲ期主要病變是結(jié)節(jié)形成。

綜上所述,本研究結(jié)果表明,OPN介導(dǎo)并參與塵肺的纖維化過程，且與疾病的嚴(yán)重程度有關(guān)聯(lián)，可以作為一拮抗靶點(diǎn)，采取干預(yù)措施，可能改善塵肺患者的預(yù)后，延緩肺纖維化的發(fā)生。有關(guān)OPN在塵肺患者血清和灌洗液中水平有無相關(guān)有待進(jìn)一步研究。

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R135.2，R446.19

B

1674-1129(2012)04-0367-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2012.04.020