(1.山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院，山東 濟(jì)南 250012；2.菏澤市婦幼保健院，山東 菏澤 274000；3.菏澤學(xué)院，山東 菏澤 274015)

近年研究發(fā)現(xiàn)，急性冠狀動(dòng)脈綜合征(acute coronary syndrome, ACS)主要是由于動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)，易損斑塊(vulnerable plaque)破裂和血栓形成造成急性冠脈完全或部分或閉塞所造成的[1]。本試驗(yàn)觀察大黃素對(duì)小鼠動(dòng)脈粥樣硬化(AS)模型血脂、血清炎性因子等的影響，評(píng)價(jià)大黃素在降脂和抗動(dòng)脈粥樣硬化方面的作用。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物和試劑

8～10周齡雄性apoE-/-小鼠60 只，體重24.5～30.2 g。

1.2 方法

1.2.1動(dòng)物分組

將60只雄性apoE-/-小鼠均喂以普通顆粒飼料，經(jīng)適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為模型組(n=15)和大黃素組(n=45)，大黃素組又隨機(jī)分為高劑量組(1200 mg/kg·d)、中劑量組(900 mg/kg·d)和低劑量組(600 mg/kg·d)三個(gè)亞組，每組15只。

1.2.2動(dòng)物模型的建立和藥物干預(yù)

正常對(duì)照組給予普通顆粒飼料；模型組給予高膽固醇飼料(0.25%膽固醇+15%脂肪)，大黃素組給予高膽固醇飼料+大黃素，喂養(yǎng)12周。

1.2.3動(dòng)物的處理

實(shí)驗(yàn)開始時(shí)及12周末處死動(dòng)物前分別對(duì)所有小鼠稱量體重。

1.2.4血脂檢測(cè)

12周末處死動(dòng)物前采血作血液生化檢查。小鼠禁食12 h以上，過(guò)量戊巴比妥鈉麻醉，經(jīng)心臟采血，留自凝血，取上層血清，采用標(biāo)準(zhǔn)酶法檢測(cè)血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平。

1.2.5血清炎性因子檢測(cè)

血液標(biāo)本自凝后留取血清分裝于Eppendorf管中，于-80 ℃冰箱中凍存，隨后檢測(cè)血清高敏C反應(yīng)蛋白(hsCRP)和纖維蛋白原(Fib)水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重的變化

實(shí)驗(yàn)開始時(shí)各組間體重的比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均>0.05)。12周末各組動(dòng)物體重均增加，模型組體重最高，顯著高于大黃素高劑量組(32.96±1.28 vs 29.02±1.17,P<0.05)，其余各組間體重的比較無(wú)顯著性差異(P均>0.05)，見(jiàn)表1。

表1 各組小鼠體重比較(g，各組n=15)

注：同一時(shí)間點(diǎn)各組間比較，與模型組比較，*P<0.05。

2.2 血脂水平

結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 各組小鼠血脂水平的比較(g，各組n=15)

注：與模型組比較，*P<0.05；§P<0.01；與大黃素高劑量組比較，P<0.05。

與模型組比較，三個(gè)大黃素治療組TC水平均顯著降低(P<0.05～0.01)，且大黃素高劑量組顯著低于大黃素低劑量組(P<0.05)，藥物的作用呈現(xiàn)明顯的劑量依賴性。

與模型組比較，三個(gè)大黃素治療組LDL-C濃度均有所降低，且大黃素高劑量組和中劑量組均顯著低于模型組(P均<0.05)。大黃素低劑量組與模型組間及三個(gè)大黃素治療組間均無(wú)顯著性差異(P均>0.05)。

各組間TG及HDL-C水平無(wú)顯著性差異(P均>0.05)。

2.3 血清炎癥因子水平

各組小鼠血液炎癥因子水平的比較見(jiàn)表3。

與模型組比較，三個(gè)大黃素治療組hsCRP 水平均顯著降低(P<0.05～0.01)，且大黃素中劑量組和低劑量組均顯著高于高劑量組(P均< 0.01)。

與模型組比較，三個(gè)大黃素治療組Fib濃度均顯著降低(P<0.05～0.01)，且大黃素中劑量組和低劑量組均顯著高于高劑量組(P分別<0.05和0.01)。

表3 各組小鼠血液炎癥因子水平的比較(g，各組n=15)

注：與模型組比較，*P<0.05；§P<0.01；與大黃素高劑量組比較，P<0.05；P<0.01。

3 討 論

動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)是臨床最常見(jiàn)的心血管病變,也是危害人體生命健康最嚴(yán)重的疾病之一。目前關(guān)于AS的發(fā)病機(jī)制還不是很清楚。"損傷反應(yīng)學(xué)說(shuō)"認(rèn)為慢性炎癥過(guò)程和血脂代謝紊亂是AS的兩個(gè)主要特點(diǎn)。從中醫(yī)角度講，AS的病理性質(zhì)多為疲毒阻于脈絡(luò)致氣血運(yùn)行失暢，血液瘓滯疲毒互阻致脈絡(luò)不暢。由外侵入的細(xì)菌、病毒、內(nèi)毒素等外來(lái)致病因素可視為外毒，由外毒刺激機(jī)體產(chǎn)生過(guò)量的細(xì)胞因子等病理介質(zhì)則可視為損害機(jī)體的內(nèi)毒成分，外毒的化熱、致癖、生變等致病作用主要是通過(guò)內(nèi)毒介導(dǎo)而產(chǎn)生的[2-3]。

近年來(lái)中醫(yī)藥因具有多途徑、多環(huán)節(jié)、多靶點(diǎn)治療疾病且不良反應(yīng)輕等特點(diǎn)而受到重視與研究。大黃來(lái)源于蓼科植物掌葉大黃、唐古特大黃或藥用大黃的干燥根及根莖，具有瀉下攻積、清熱瀉火、涼血解毒、逐瘀通經(jīng)、利濕退黃之功效[4]。大黃具多類藥效活性成分，其藥理作用主要有調(diào)節(jié)胃腸功能、抗病原微生物、抗腫瘤、保護(hù)心腦血管、抗炎、保肝及抗衰老等[5-7]。研究表明在治療心血管疾病時(shí)，大黃具有調(diào)脂、抗氧化、保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞等作用，此外，能降低全身炎癥反應(yīng)綜合征患者血清TNF-α、IL-1、IL-6和C反應(yīng)蛋白(CRP)水平, 有效抑制炎癥介質(zhì)的釋放及阻止炎癥介質(zhì)介導(dǎo)的嚴(yán)重并發(fā)癥的發(fā)生，提示具有良好的抗炎作用[8-9]。

通過(guò)本試驗(yàn)可看到大黃素組小鼠的體重、血脂及血清炎性因子水平低于模型組(P<0.05)，并呈一定的劑量依賴性。可見(jiàn)大黃素對(duì)小鼠AS斑塊的發(fā)生具有全面的干預(yù)作用，這為后期大黃素成為治療AS的藥物提供了一定的科學(xué)依據(jù)。

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