杜明艷，丁文軍，封 靖，杜會山

(1.北京通州區(qū)潞河醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，北京101149;2.中國科學(xué)院研究生院生命科學(xué)研究院，北京100049)

血管緊張素轉(zhuǎn)化酶基因I/D多態(tài)性與腦梗死后抑郁相關(guān)

杜明艷1*，丁文軍2，封 靖1，杜會山1

(1.北京通州區(qū)潞河醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，北京101149;2.中國科學(xué)院研究生院生命科學(xué)研究院，北京100049)

目的 探討北京地區(qū)漢族人群血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)基因插入/缺失(I/D)多態(tài)性與腦梗死后抑郁(PCID)發(fā)病的關(guān)系。方法 用漢密爾頓抑郁量表評定664例腦梗死患者抑郁狀態(tài)，用PCR方法檢測患者ACE基因I/D多態(tài)性，分析基因多態(tài)性分布與腦梗死后抑郁發(fā)病的相關(guān)性。結(jié)果 腦梗死后抑郁患者組ACE基因I/I基因型頻率和I等位基因頻率(分別為0.388和0.549)顯著高于腦梗死后非抑郁患者對照組(C)(分別為0.286和0.481，P＜0.05)。結(jié)論ACE基因I/D多態(tài)性與腦梗死后抑郁發(fā)病相關(guān)，ACEI/I基因型可能是腦梗死后抑郁發(fā)病的危險因素。

血管緊張素轉(zhuǎn)化酶;基因多態(tài)性;腦梗死后抑郁

腦梗死后抑郁(post-cerebral infarction depression，PCID)是常見的腦血管病并發(fā)癥之一，腦梗死后抑郁的發(fā)生嚴重危害患者的身心健康，直接影響患者的神經(jīng)功能恢復(fù)和生活質(zhì)量，甚至增加腦血管病的死亡率。國內(nèi)外文獻報道腦梗死后抑郁的總發(fā)生率為20% ～79%，但多在40% ～50%。腦梗死后抑郁的發(fā)病與社會心理因素、遺傳因素等有關(guān)，但其病因和發(fā)病機制至今尚未明確。血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(angiotensin-converting enzyme，ACE)是腎素 －血管緊張素系統(tǒng)(renin-angiotensinsystem，RAS)的關(guān)鍵酶，在小血管病變、炎性反應(yīng)過程以及情緒相關(guān)的細胞內(nèi)信息傳導(dǎo)通路中發(fā)揮重要作用。關(guān)于ACE基因I/D多態(tài)性與腦梗死發(fā)?。?－2］、情感障礙發(fā)生的相關(guān)性研究較多［3－6］，但對于ACE基因I/D多態(tài)性與腦梗死后抑郁相關(guān)性研究目前沒有報道。為此，我們對664例腦梗死患者進行了抑郁評定，檢測其ACE基因I/D多態(tài)性，探討ACE基因I/D多態(tài)性分布與腦梗死后抑郁發(fā)病的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 臨床資料

選取2008年1月以來住院診治的664例腦梗死患者為研究對象，所有病例均符合第四屆全國腦血管病會議修訂的腦梗死診斷標(biāo)準(zhǔn)，具有典型的臨床表現(xiàn)，且經(jīng)頭顱CT和(或)MRI檢查證實存在腦實質(zhì)內(nèi)梗死灶。排除智能障礙、意識障礙、嚴重失語、耳聾不能配合的檢查者，排除陽性精神疾病史及家族史者。所有研究對象均知情同意。

1.2 漢密爾頓抑郁量表(HAMD-24)評定

漢密爾頓抑郁量表是國際公認的抑郁評定量表，本研究對所有入選664例腦梗死患者進行24項HAMD評定，分別在患者發(fā)病后2周、1、3、6、9和12個月左右進行評定，測評由專職人員嚴格按規(guī)定完成，依據(jù)HAMD評分將664例患者分為兩組，20分以上的為抑郁組(PCID)，同時符合中國精神障礙分類與診斷標(biāo)準(zhǔn)第3版(CCMD-3)修訂的腦血管病所致精神障礙診斷標(biāo)準(zhǔn)，其精神癥狀群符合抑郁癥癥狀、嚴重程度及病程標(biāo)準(zhǔn)，其他歸為非抑郁對照組(control)。

1.3 ACE基因I/D多態(tài)性檢查

取5mL靜脈血，用2%EDTA抗凝，低滲法分離外周血白細胞，提取基因組DNA。用PCR方法擴增ACE基因的第16內(nèi)含子。引物分別為:P1(5'-CTG GAGACCACTCCCATCCTTTCT-3')和P2(5'-GATGTG GCCATCACATTCGTCAGAT-3')。反應(yīng)體系25 μL，PCR 反應(yīng)條件:94℃ 預(yù)變性5 min后，按94℃變性1 min，58℃退火1 min，72℃延伸2 min的程序完成30個循環(huán)，最后在72℃再延伸5 min。取擴增產(chǎn)物10 μL在 2%瓊脂糖凝膠(含 EB 0.5 mg/L)中進行電泳分析。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

按Hardy-Weinberg平衡法檢驗樣本的群體代表性。計算各組等位基因頻率，組間頻數(shù)比較采用χ2檢驗、單因素方差分析(One way ANOVA)、Pearson檢驗相關(guān)性。用Logistic回歸分析調(diào)整混雜因素。

2 結(jié)果

2.1 一般資料與群體代表性檢驗

HAMD評分結(jié)果:664例腦梗死患者中，HAMD評分大于或等于21分者為腦梗死后抑郁組，有286例，占43%，年齡(64.4±10.1)歲，其中男性164例，女性122例。HAMD評分小于21分者為非抑郁對照組，有378例，占57%，年齡(65.8±9.7)歲，其中男性227例，女性151例。

一般資料統(tǒng)計結(jié)果顯示，664例腦梗死患者抑郁組和非抑郁組之間的性別、年齡及糖尿病、冠心病、高血壓等其他軀體疾病無顯著性差異。x2檢驗顯示，所調(diào)查人群基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡，實際檢出的基因型頻率與預(yù)期頻率基本一致，具有群體代表性。

2.2 ACE基因I/D多態(tài)類型檢查

插入純合型(I/I)只出現(xiàn)490 bp的擴增片段，缺失純合型(D/D)只出現(xiàn)196 bp的擴增片段，插入/缺失雜合型(I/D)同時出現(xiàn)490 bp和196 bp兩條擴增片段(圖1)。

圖1 ACE基因I/D 3種多態(tài)性Fig 1 Three patterns of ACE I/D polymorphism

2.3 ACE基因型、等位基因頻率分布

腦梗死后抑郁組的I/I基因型頻率及I等位基因頻率(0.388和0.549)均顯著高于對照組(0.286和0.481)，ACE基因型頻率分布具有顯著性差異(x2=7.933，P＜0.05和x2=5.932，P＜0.05)(表1)。

表1 腦梗死后抑郁組和非抑郁對照組之間的ACE基因型及等位基因頻率分布Table 1 The genotype frequency and allele frequency of ACE gene in PCID group and control group

3 討論

情感障礙的病因和發(fā)病機制仍不十分清楚，目前普遍認為中樞肽類物質(zhì)血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)和P物質(zhì)(substance P，SP)具有廣泛的生物活性，參與情感障礙的病理生理過程，與抑郁、焦慮和認知功能有著密切的關(guān)系。其中AngⅡ主要調(diào)節(jié)單胺類纖維的神經(jīng)遞質(zhì)釋放，SP則通過激動速激肽受體NK1、NK2和 NK3，激活與疼痛、炎性反應(yīng)及情緒相關(guān)的細胞內(nèi)信息傳導(dǎo)通路［7］，臨床實驗已經(jīng)證實SP拮抗劑具有抗抑郁的作用［8］。ACE是腎素－血管緊張素系統(tǒng)(RAS)的關(guān)鍵酶，將AngⅠ轉(zhuǎn)化成有活性的AngⅡ，ACE血漿濃度變化可能通過影響有活性的AngⅡ生成，參與情感障礙的病理生理過程。同時，ACE是中樞系統(tǒng)SP的主要降解酶之一，ACE水平和活性是影響P物質(zhì)水平的重要因素［9］，已有研究表明，服用ACE抑制劑的高血壓患者容易出現(xiàn)幻聽和抑郁癥狀［10］。因此，ACE血漿水平變化可能通過影響有活性的AngⅡ生成和SP的降解，成為腦梗死后抑郁發(fā)病的危險因素。

ACE基因位于17號染色體長臂2區(qū)3帶(17q23)上，含有26個外顯子和25個內(nèi)含子，為單拷貝基因。ACE基因第16內(nèi)含子有一個287 bp的Alu片段插入或缺失(I/D)，表現(xiàn)出I/D多態(tài)性。ACE血漿水平和活性受ACE基因表達的調(diào)控，已有研究表明，ACE基因的多態(tài)性導(dǎo)致血漿ACE水平的差異，287 bp DNA缺失與高ACE水平相關(guān)，D等位基因可通過增加mRNA的表達調(diào)節(jié)血漿ACE的水平［11］，ACE水平由高向低依次為 D/D、I/D和I/I，ACEI/I基因型的血漿ACE水平是D/D型的1/2［12］。因此，對于 ACEI/I基因型患者，相對較低水平的血漿ACE可減少血漿AngⅡ生成和SP的降解，增加腦梗死后抑郁發(fā)病的風(fēng)險。

近年來，ACE基因多態(tài)性與情感障礙的遺傳易感性相關(guān)的研究結(jié)果存在某些差異，一方面可能是由于研究對象、對照設(shè)置、樣本大小、地域分布、種族性別差異等不同而造成結(jié)果各異，尤其需要大樣本量的分析比較研究。另一方面，情感障礙的發(fā)生機制和發(fā)病背景復(fù)雜，其病因和發(fā)病機制仍不十分清楚，參與疾病發(fā)生發(fā)展的多個相關(guān)基因均有可能發(fā)揮作用，產(chǎn)生協(xié)同或拮抗效應(yīng)［13］。本研究選擇我國北方漢族腦梗死后抑郁人群作為研究對象，首次分析了ACE基因I/D多態(tài)性與腦梗死后抑郁發(fā)病相關(guān)性，研究結(jié)果表明，ACEI/I基因型可能是腦梗死后抑郁發(fā)病的危險因素。

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Association between the angiotensin-converting enzyme gene I/D polymorphism and post-cerebral infarction depression

DU Ming-yan1*，DING Wen-jun2，F(xiàn)ENG Jing1，DU Hui-shan1

(1.Dept．of Neurology，Luhe Hospital，Beijing 101149;2.College of Life Sciences，Graduates University of Chinese Academy of Sciences，Beijing 100049，China)

ObjectiveTo explore the association between the angiotensin-converting enzyme(ACE)geneI/Dpolymorphism and post-cerebral infarction depression(PCID)．MethodsThe ACE geneI/Dpolymorphism was detected in a study of 664 cerebral infraction cases，286 post-cerebral infarction depression cases and 378 control cases without depression after cerebral infarction were classified.The association of gene polymorphism and post-cerebral infarction depression was evaluated．ResultsThe genotype frequencies ofACEgeneI/Iand I allete in the PCID group(0.388 and 0.549)were significantly higher than those in the control group(0.286 and 0.481)．ConclusionsACEgeneI/Ivariant is significantly associated with post-cerebral infarction depression．

angiotensin-converting enzyme;gene polymorphism;post-cerebral infarction depression

R 743.3

A

1001-6325(2012)09-1040-04

2012－05－21

2012－07－02

“十一五”國家科技支撐計劃(2007BAC27B02)

*通信作者(corresponding author):my_du@sina．com