白吉明，李建華，王新杰，劉 雷，錢 浩

(1.承德醫(yī)學院，河北承德 067000;2.承德市中心醫(yī)院腫瘤科)

原發(fā)性肝癌(primary hepatic cancer，PHC)是一種惡性程度高、預后差的惡性腫瘤[1]。由于缺乏理想的血清學檢測指標，大多數(shù)患者確診時已經(jīng)處于中晚期，缺乏有效的治療手段，預后較差。目前治療PHC最有效的手段是手術(shù)治療，對于晚期PHC患者，切除后復發(fā)率高、易轉(zhuǎn)移，故早期診斷PHC對提高患者生存率和生活質(zhì)量尤為重要，并且能減輕患者的經(jīng)濟負擔。血清腫瘤標志物是診斷PHC的重要指標，其中甲胎蛋白(AFP）是診斷PHC的重要指標之一，但30%-40%的PHC患者AFP為陰性。因此，尋找更特異、敏感的腫瘤標志物和診斷方法對于研究肝癌顯得尤為重要。

1 材料與方法

1.1 材料 承德市中心醫(yī)院2009年8月-2011年7月住院經(jīng)手術(shù)確診的PHC患者55例，年齡30-81歲。選取同期體檢、肝功能正常的健康者30例作為對照，年齡25-71歲。兩組患者年齡、性別等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義，具有可比性(P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 檢測指標:空腹采集外周血2ml，無溶血、脂血，2000r/min離心8min，分離血清，-20℃保存。采用電化學發(fā)光免疫分析儀(羅氏公司）及配套AFP化學發(fā)光免疫試劑檢測AFP;采用GGT速率法檢測試劑盒、8150全自動生化分析儀(日本日立公司）檢測谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT）;采用酶聯(lián)免疫法檢測血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3）(美國BioMosaics公司)。

1.2.2 Cut-off值確定:AFP≥25μg/L為陽性[2]。GGT≥50U/L為陽性。繪制受試者工作曲線(receiver operator characteristic curve,ROC)，以曲線下面積最大確定GPC3，GPC3≥2ng/ml為陽性。

1.3 統(tǒng)計處理 應用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以(±s）表示，組間比較采用t檢驗;計數(shù)資料及率的比較采用χ2檢驗。敏感度:[a/(a+c)]，特異度:[(d/(b+d)]，準確度[(a+d)/(a+b+c+d)](a為真陽性數(shù)，b為假陽性數(shù)，c為假陰性數(shù)，d為真陰性數(shù)）。聯(lián)合檢測判斷標準:組合中任何一項超過臨界值，即判斷為陽性;組合中所有值均低于臨界值，則判斷為陰性。

2 結(jié)果

2.1 各標志物檢測結(jié)果 PHC患者的AFP、GGT、GPC3明顯高于健康人群，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.01）。見表1。

表1 兩組患者血清AFP、GGT、GPC3水平檢測結(jié)果(±s）

表1 兩組患者血清AFP、GGT、GPC3水平檢測結(jié)果(±s）

組別 例數(shù) AFP(μg/L)GGT(U/L)GPC3(ng/L)對照組 30 28.2±5.3 25.7±12.7 107.6±11.3 PHC組 55 242.3±12.5 322.4±78.12 321.5±23.7 t 5.86 2.49 4.33 P ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01

2.2 PHC組患者各指標的陽性率 GPC3的ROC曲線:曲線下最大面積為0.755，95%可信區(qū)間為0.644-0.866，標準誤為0.057(見附圖）。PHC組患者各指標陽性率(敏感度）見表2;在AFP＜25μg/L的39例患者中，GPC3陽性率為82.0%(32/39）、GGT陽性率為89.7%(35/39）。

附圖 GPC3的ROC曲線圖

2.3 AFP、GPC3、GGT單獨檢測對PHC的診斷價值 三個指標診斷PHC的敏感度依次為GGT＞GPC3＞AFP，特異度:GPC3＞AFP＞GGT，準確度:GPC3＞AFP＞GGT。特異度及準確度GPC3最高，敏感度雖然GGT高于GPC3和AFP，但其特異度僅為66.7%，故單獨檢測診斷PHC GPC3檢出率最高(見表2）。

2.4 三項指標聯(lián)合檢測診斷PHC的價值 三個指標聯(lián)合檢測時，敏感度依次為AFP+GGT＞GPC3+GGT＞AFP+GPC3;特異度及準確度AFP+GPC3最高;AFP+GPC3優(yōu)于任一單獨指標。三項指標聯(lián)合檢測敏感性及準確度雖有所升高，但特異度明顯下降;三項指標聯(lián)合檢測與AFP+GPC3比較，敏感度及特異性無明顯差異(P＞0.05)(見表2）。

表2 AFP、GGT、GPC3單獨及聯(lián)合檢測診斷PHC的效果[%(例數(shù))]

3 討論

PHC是我國常見肝臟腫瘤,在高危人群中，早期檢測和診斷可明顯提高遠期生存率，目前臨床上尚無單一指標能夠明確診斷。

AFP是人胎兒血清中發(fā)現(xiàn)的一種專一性的甲種球蛋白，長期以來，AFP作為診斷肝癌的最佳標志物，對PHC的診斷和治療起著重要作用。目前國內(nèi)的研究顯示，AFP以25μg/L為陽性界值，診斷PHC的敏感度為75%-90%[3]。如此，仍有10%-20%的PHC患者血清AFP偏低或是陰性，發(fā)現(xiàn)時往往腫瘤體積較大，中位生存率低，預后差。另外一些良性肝病患者血清AFP也有升高現(xiàn)象，使單獨應用AFP診斷PHC有一定的局限性。GPC3是通過磷脂酰糖基錨定在細胞膜上的硫酸乙酰肝素聚糖蛋白，屬于分泌蛋白，在細胞增殖與分化中發(fā)揮重要作用，通過結(jié)合胞外基質(zhì)、生長因子和蛋白酶等對細胞生長分化以及腫瘤形成和轉(zhuǎn)移起重要作用。GPC3的血清濃度與AFP的濃度無相關(guān)性，在AFP陰性的PHC診斷中有重要作用。GGT廣泛存在于人肝、腎、胰腺、腸管等組織器官中，主要分布于這些組織中具有高度分泌功能的細胞膜上。GGT是人肝臟疾病中檢出陽性率最高的酶。研究發(fā)現(xiàn)，PHC患者血清GGT升高，提示GGT與PHC的相關(guān)性，但目前尚未得到廣泛關(guān)注。

本研究選擇AFP、GGT、GPC3三個指標聯(lián)合檢測，結(jié)果顯示GGT對診斷PHC的敏感度為90.9%，高于AFP和GPC3。因此，對于GGT升高的患者，應提高警惕，應給患者盡早行腫瘤標志物聯(lián)合檢測，消化系B超、CT檢測，以及密切觀察病情變化。需要指出的是，GGT雖然敏感度高，但特異度比較低，需要配合其它指標聯(lián)合檢測，以提高診斷的準確性。

為提高診斷率，許多醫(yī)學科研工作者嘗試應用AFP聯(lián)合其它腫瘤標志物對PHC進行診斷，均取得一定效果[4-6]。本研究顯示，應用單個指標診斷時，當AFP≥25μg/L時，診斷的特異度為83.3%，而敏感度只有74.5%，GPC3的特異度為86.7%，與AFP比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05）。當聯(lián)合檢測多項指標進行診斷時，AFP聯(lián)合GPC3診斷的敏感度為92.7%，準確度為85.9%。當三項指標聯(lián)合檢測時，敏感度雖達到98.2%，但特異度下降至46.6%。因此，AFP聯(lián)合GPC3的診斷率最高。在PHC的血清學診斷中，血清GPC3是AFP最重要的互補指標，AFP聯(lián)合GPC3能顯著提高PHC診斷的靈敏度和特異度。

[1]湯釗猷.現(xiàn)代腫瘤學[M].第2版.上海:上海醫(yī)科大學出版社，2001.553.

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