韓 剛，唐麗源，索 煒，劉 莉，康 欣，王彥雪，趙 媛

(河北聯(lián)合大學(xué) 藥學(xué)院，河北 唐山 063000)

近年來隨著人們生活方式的改變，高脂血癥在我國發(fā)病率呈逐年上升的趨勢。研究表明高脂血癥與冠心病密切相關(guān)［1］。而目前多數(shù)降血脂藥物均有不良反應(yīng)，因此在中藥中尋找具有降血脂和抗氧化的活性物質(zhì)備受關(guān)注［2］。

大黃酸(Rhein)為中藥大黃中的主要活性成分，屬蒽醌類化合物，具有保肝、降脂、抗纖維化、降血脂、抗氧化、抗腫瘤、抗炎等多種藥理作用［3］。而大黃酸難溶于水，體內(nèi)生物利用度低。固體分散體技術(shù)可用于增加難溶性藥物的溶解度和溶出速率，提高生物利用度［4］。本文以聚乙烯吡咯烷酮(PVP)為載體制備大黃酸固體分散體(RSD)，考察其對高脂血癥模型大鼠血脂的影響。

1 材料

大黃酸(純度＞98%)，南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司;PVP，上?；瘜W(xué)試劑公司;超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、甘油三脂(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDLC)等試劑盒，南京建成生物工程研究所。

FTIR-8400S紅外光譜儀(日本SHIMADZU公司);449C差示掃描量熱儀(德國NETZSCH STA公司);TU-1800紫外可見分光光度計(北京普析通用公司)。

SPF級SD大鼠，雌雄各半，體重180～220 g，北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供，許可證號:SCXK京2009-0004。SPF級環(huán)境下飼養(yǎng)，溫度20～25℃，相對濕度45% ～70%，自然光照。

2 方法

2.1 RSD的制備

將大黃酸與PVP按質(zhì)量比1∶4的比例放入燒杯中，加入適量無水乙醇，超聲5 min使溶解，轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，60℃除去乙醇即得RSD，粉碎，過篩備用［5］。

2.2 RSD的物相鑒定

2.2.1 RSD差熱分析 采用差示掃描量熱法(DSC)進行樣品分析，測試條件為鋁坩堝，氣氛氮氣，流速10 mL/min，升溫速率10℃/min。由圖1可見，大黃酸在305.2℃有一熔融吸熱峰，而其物理混合物在433.9℃有一吸熱峰。RSD在439.2℃有一吸熱峰，固體分散體中大黃酸305.2℃熔融吸熱峰消失。初步推測大黃酸在載體中形成了共沉淀物?？赡苁怯捎赑VP分子中的羰基與大黃酸分子中的羥基形成氫鍵，使大黃酸分子以無定形狀態(tài)進入完全水溶的PVP大分子，從而抑制難溶藥物分子的結(jié)晶的生成和成長，藥物形成過飽和狀態(tài)，這就大大提高難溶藥物的溶解度［6］。

圖1 樣品的DSC圖Fig.1 DSC curves of samples

2.2.2 RSD紅外光譜分析 采用溴化鉀壓片法進行紅外光譜分析。由圖2可見，大黃酸的羥基峰位在3 320 cm-1，羰基峰位在1 640 cm-1;RSD羥基峰位在3 360～3 320 cm-1為一鈍峰，羰基峰位在1 680 cm-1。物理混合物羰基峰位1 640 cm-1，兩者比較大黃酸在RSD中的羥基峰和羰基峰均向高波數(shù)端移動，由此推測，大黃酸兩羥基與載體PVP的C=O之間發(fā)生了氫鍵相互作用，使吸收峰向高波數(shù)位移。

圖2 大黃酸(A)、大黃酸與PVP(B)、RSD(C)的紅外光譜圖Fig.2 FTIR spectra of rhein(A)，physical mixture(B)and solid dispersion(C)

2.3 脂肪乳劑的制備

取豬油30 g，膽固醇10 g，加熱融化，加吐溫80 10 mL，攪拌均勻，得油相。另取膽酸鈉2 g和丙硫氧嘧啶0.1 g，加入 1，2-丙二醇10 mL，加熱融化，加入水38 mL，攪拌均勻，得水相。將水相倒入油相中，攪拌，即成脂肪乳劑［7］，用時加熱融化。

2.4 動物分組與給藥

大鼠40只，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周，隨機分為5組:正常對照(CON)組、高脂血癥模型(MOD)組、大黃酸(RH)組、RSD低劑量(RSDL)組、RSD高劑量(RSDH)組，每組8只。每天上午灌胃前后大鼠禁食禁水1 h，除CON組灌服水10 mL/kg外，其他各組均灌服脂肪乳劑10 mL/kg，連續(xù)8周。下午，RH組給予大黃酸25 mg/kg，RSDL組給予RSD 125 mg/kg(相當(dāng)于大黃酸25 mg/kg)、RSDH組給予RSD 250 mg/kg。

2.5 標(biāo)本采集

末次給藥后，禁食不禁水12 h，大鼠用12%水合氯醛溶液以3 mL/kg腹腔注射麻醉，心臟取血，凝固后，3 000 r/min離心15 min，分離血清;摘取大鼠肝臟左葉，在冷生理鹽水中漂洗后，剪取1 g置于勻漿器中，用生理鹽水制成10%的組織勻漿，3 000 r/min離心后得肝組織勻漿。測定大鼠血清TG、TC、HDL-C、LDL-C含量，同時測定血清和肝勻漿中MDA含量、SOD和GSH-Px活力。

2.6 統(tǒng)計學(xué)分析數(shù)據(jù)

3 結(jié)果

3.1 對大鼠血脂指標(biāo)的影響

與CON組相比，MOD組大鼠TC、TG、LDL-C值顯著升高(P＜0.05)，而HDL-C值則顯著降低(P＜0.05)，符合高脂血癥的特征。各給藥組與MOD組比較，TC、TG值均明顯下降(P＜0.05)，RSDL和RSDH組下降的更為明顯(P＜0.05);三個給藥組血清HDL-C含量與MOD相比均有上升。說明RSD對高脂血癥大鼠有降血脂作用。

3.2 對大鼠抗氧化能力指標(biāo)的影響

與CON組相比，MOD組大鼠血清及肝勻漿MDA含量顯著上升(P＜0.01)，GSH-Px、SOD活力顯著下降(P＜0.01)，表明在該高脂血癥模型狀態(tài)下，實驗大鼠肝臟出現(xiàn)氧化損傷。與MOD組相比，RH、RSDL和RSDH組血清及肝臟MDA含量均降低，GSH-Px和SOD活力升高(P＜0.05)，說明RSD具有顯著的抗氧化作用。

表1 大鼠TC、TG、HDL-C、LDL-C濃度(±s，n=8)Tab.1 The contents of TC、TG、HDL-C、LDL-C in rats(±s，n=8)

表1 大鼠TC、TG、HDL-C、LDL-C濃度(±s，n=8)Tab.1 The contents of TC、TG、HDL-C、LDL-C in rats(±s，n=8)

與CON組比較:1P＜0.01;與MOD組比較:2P＜0.05Compare with normal control groups:1P＜0.01;Compare with mode groups:2P＜0.05

組 別 TC/(mmol/L) TG/(mmol/L) HDL-C/(mmol/L) LDL-C/(mmol/L)CON組1.74±0.16 1.87±0.038 1.41±0.25 1.89±0.96 MOD組 2.98±0.151 3.26±0.0671 0.76±0.221 7.28±0.081 RH 組 2.53 ± 0.131，2 2.87 ± 0.0611，2 1.00 ± 0.34 5.89 ± 0.191，2 RSDL 組 2.28 ± 0.0871，2 2.53 ± 0.0571，2 1.18 ± 0.201，2 3.81 ± 1.171，2 RSDH 組 2.03 ± 0.0411，2 2.07 ± 0.0421，2 1.17 ± 0.131，2 2.44 ± 0.161，2

表2 大鼠血清和肝組織中SOD、GSH-Px和MDA水平(±s，n=8)Tab.2 The levels of SOD、GSH-Px and MDA in rats(±s，n=8)

表2 大鼠血清和肝組織中SOD、GSH-Px和MDA水平(±s，n=8)Tab.2 The levels of SOD、GSH-Px and MDA in rats(±s，n=8)

與CON組比較:1P＜0.01;與MOD組比較:2P＜0.05Compare with normal control groups:1P＜0.01;Compare with mode groups:2P＜0.05

組 別血清SOD/(u/mL)GSH-Px/(u/mL)MDA/(nmol/mL)肝組織SOD/(u/mg·pro)GSH-Px/(u/mg·pro)MDA/(nmol/mg·pro)CON組 358.8±3.53 2 553.7±40.33 8.55±0.51 84.11±2.73 1 898.0±51.61 1.96±0.20 MOD組 279.8±3.221 1 619.2±49.661 15.42±0.941 52.89±1.581 1 331.6±90.171 4.36±0.171 RH 組 292.8 ± 6.401 2 141.1 ± 39.951，2 13.48 ± 0.621，2 60.58 ± 1.201，2 1 492.3 ± 48.301，2 3.94 ± 0.131，2 RSDL 組 318.4 ± 5.891，2 2 344.1 ± 21.671，2 12.20 ± 0.241，2 68.32 ± 1.601，2 1 651.6 ± 24.251，2 3.57 ± 0.111，2 RSDH 組 335.6 ± 7.501，2 2 426.3 ± 13.811，2 10.37 ± 0.311，2 74.55 ± 1.741，2 1 777.7 ± 11.561，2 3.13 ± 0.261，2

4 討論

紅外光譜分析和DSC分析表明，大黃酸與PVP形成共沉淀物，大黃酸以無定形狀態(tài)分散于載體中，從而增加了大黃酸的溶解度和溶出度，提高了大黃酸的生物利用度，使得更多藥物進入血液循環(huán)［8］。實驗結(jié)果顯示RSD能明顯降低大鼠血清中TC、TG和LDL-C的含量，增加HDL-C含量，說明RSD能使大鼠血脂水平降低;RSDL和RSDH組可顯著提高大鼠血清中GSH-Px、SOD活力，降低MDA水平，說明RSD具有抗氧化的作用，降低自由基的毒副作用，進而降低脂質(zhì)過氧化作用對心血管的損傷。RSD對高脂血癥模型大鼠有明顯的降血脂及抗氧化作用。

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