張令暉，張勝利，肖金華，胡菊萍，陶冬青，嚴(yán)兆丹，周紅燕，劉夢江

(湖北省中山醫(yī)院，湖北 武漢 430033)

高脂血癥是中老年常見病，是指由于脂質(zhì)代謝或運轉(zhuǎn)異常而導(dǎo)致血漿中甘油三脂(TG)，總膽固醇(TC)及低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)中一種或多種脂質(zhì)水平超過正常范圍的病癥。也是造成動脈硬化的首要危險因素［1-2］，而動脈粥樣硬化又是許多血管及臟器疾病的主要基礎(chǔ)病變之一，嚴(yán)重危害人類健康，因此高脂血癥已被列為心腦血管疾病重要的獨立危險因子 。鷹嘴豆芽素 A(biochanin A)屬于黃酮類化合物，主要存在于紅三葉等豆科多年生草本植物中，本實驗通過實驗性大鼠高脂血癥模型的建立［4］，觀察不同劑量鷹嘴豆芽素A對高脂血癥大鼠血清中TC，TG，LDL-C，HDL-C及其他相關(guān)指標(biāo)的影響，闡明其可能的作用機理。

1 材料

鷹嘴豆芽素A(含量:98%)，杭州東岸醫(yī)藥科技有限公司;血脂康，北京北大維信生物科技有限公司;膽固醇，北京夏斯生物技術(shù)有限公司;丙硫氧嘧啶，廣東華南藥業(yè)有限公司。

全自動生化儀，上?？迫A實驗系統(tǒng)有限公司;多功能高速冷凍離心機、血液流變測試儀:北京博萊特醫(yī)藥技術(shù)有限公司;血小板聚集凝血因子分析儀，北京中勤世帝科學(xué)儀器有限公司。

3月齡SD雄性大鼠，體重:180～220 g，武漢大學(xué)動物實驗中心提供，合格證號:SCXK(鄂)2010-0003。

2 方法

2.1 動物分組

大鼠60只，隨機分為正常組、模型組、血脂康組、鷹嘴豆芽素A低、中和高劑量組，每組10只。

2.2 給藥方法及檢測指標(biāo)

除正常組給予普通飼料外，其他5組灌胃給予10 mL/kg·d高脂乳劑(10%膽固醇、20%豬油、1%丙硫氧嘧啶、5%吐溫80、2%去氧膽酸鈉)，一周后，在每天灌胃脂肪乳劑的基礎(chǔ)上開始給藥。血脂康組灌胃0.1 g/(kg·d)的血脂康;鷹嘴豆芽素A低、中和高劑量組分別灌胃0.3，0.6和1.2 g/(kg·d)鷹嘴豆芽素A，血脂康和鷹嘴豆芽素A均以0.5%羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)溶液混懸，正常組和模型組均灌胃給予相同體積的0.5%CMC-Na溶液。各組大鼠自由飲水、攝食。總共30 d。實驗期末大鼠禁食12 h，末次給藥后1 h，眼眥取血，離心，制得血清，用全自動生化儀測定血脂 TC、TG、LDL-C和HDL-C水平。然后腹腔注射戊巴比妥鈉40 mg/kg，麻醉后腹主動脈取血，肝素抗凝，用血液流變測試儀測定全血黏度，再將全血離心取血漿，測定血漿黏度，用血小板聚集凝血因子分析儀測定凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶時間(TT)和纖維蛋白原(FIB)含量。

2.3 統(tǒng)計學(xué)分析

各組數(shù)據(jù)均采用SPSS10.0版軟件進行分析，檢測結(jié)果以(±s)表示，組間比較用單因素方差分析，P＜0.05表示有統(tǒng)計學(xué)差異。

3 結(jié)果

3.1 對血脂水平的影響

結(jié)果見表1。與正常組相比，模型組的血脂TC、TG和LDL-C值明顯升高(P＜0.05);但是血脂HDL-C值明顯降低(P＜0.05)，表明灌胃脂肪乳劑造大鼠高脂血癥模型成功。與模型組相比，血脂康組、鷹嘴豆芽素A低、中和高劑量組的血脂TC、TG和LDL-C值明顯降低(P＜0.05)，血脂HDL-C值明顯升高(P＜0.05)。

3.2 對全血黏度和血漿黏度的影響

結(jié)果見表2。與模型組相比，血脂康組、鷹嘴豆芽素A中、高劑量組均能顯著性降低全血黏度(P＜0.05)，鷹嘴豆芽素A低劑量組降低作用不明顯;血脂康組、鷹嘴豆芽素A低、中和高劑量組相較于模型組血漿黏度顯著性降低(P＜0.05)。

3.3 對血漿凝血因子的影響

結(jié)果見表3。與模型組相比，血脂康組、鷹嘴豆芽素A低、中和高劑量組均能顯著性延長PT和APTT)(P＜0.05)，同時能顯著性降低FIB含量(P＜0.05)，但是各給藥組對TT無明顯影響。

表1 鷹嘴豆芽素對高脂血癥大鼠血脂水平的影響(n=10，±s)Tab.1 The influence of biochanin A on Blood lipids of hyperlipidemia rats(n=10，±s)

表1 鷹嘴豆芽素對高脂血癥大鼠血脂水平的影響(n=10，±s)Tab.1 The influence of biochanin A on Blood lipids of hyperlipidemia rats(n=10，±s)

與正常組比較:1P＜0.05;與模型組比較:2P＜0.05，3P＜0.01Compared with the normal group:1P ＜0.05;Compared with the model group:2P＜0.05，3P ＜0.01

組 別 劑量/(g/kg)TC/(mmol/L)TG/(mmol/L)LDL-C/(mmol/L)HDL-C/(mmol/L)正常組- 4.13±0.44 1.35±0.07 1.81±0.08 1.28±0.17模型組 - 5.24±0.561 1.59±0.311 2.36±1.321 0.99±0.211血脂康組 0.1 3.94±0.432 1.31±0.062 1.45±0.363 1.41±0.243鷹嘴豆芽素A 0.3 4.34±0.662 1.42±0.162 1.55±0.612 1.28±0.132 0.6 4.15±0.412 1.34±0.112 1.49±0.522 1.38±0.082 1.2 4.01±0.523 1.27±0.083 1.42±0.403 1.42±0.083

表2 鷹嘴豆芽素對高血脂癥大鼠全血黏度和血漿黏度的影響(n=10，±s)Tab.2 The influence of biochanin A on whole blood viscosity and plasma viscosity of hyperlipidemia rats(n=10，±s)

表2 鷹嘴豆芽素對高血脂癥大鼠全血黏度和血漿黏度的影響(n=10，±s)Tab.2 The influence of biochanin A on whole blood viscosity and plasma viscosity of hyperlipidemia rats(n=10，±s)

與模型組比較:1P＜0.05Compared with the model group:1P＜0.05

組 別 劑量/(g/kg)全血黏度/(mPa·s)3s-1 12s-1 35s-1 120s-1 180s -1血漿黏度/(mPa·s)正常組 - 5.13±0.44 4.43±0.47 4.14±0.58 3.43±0.24 3.26±0.34 1.24±0.06模型組 - 6.82±0.56 5.87±0.16 4.76±0.43 3.95±0.31 3.74±0.23 1.43±0.07血脂康組 0.1 6.19±0.231 5.11±0.311 4.25±0.461 3.54±0.241 3.31±0.181 1.32±0.051鷹嘴豆芽A 0.3 6.34±0.26 5.12±0.26 4.65±1.08 3.81±0.33 5.01±0.38 1.35±0.061 0.6 6.25±0.171 5.19±0.321 4.31±0.521 3.61±0.471 3.44±0.351 1.33±0.051 1.2 6.15±0.521 5.23±0.081 4.22±0.481 3.51±0.401 3.32±0.321 1.31±0.051

表3 鷹嘴豆芽素對高脂血癥大鼠血漿凝血因子的影響(n=10，±s)Tab.3 The influence of biochanin A on clotting factor of hyperlipidemia rats(n=10，±s)

表3 鷹嘴豆芽素對高脂血癥大鼠血漿凝血因子的影響(n=10，±s)Tab.3 The influence of biochanin A on clotting factor of hyperlipidemia rats(n=10，±s)

與模型組比較:1P＜0.05Compared with the model group:1P＜0.05

組 別 劑量/(g/kg) PT(INR) APTT/s TT/s FIB/(g/L)正常組- 1.05±0.07 13.75±2.42 35.26±2.34 4.28±0.27模型組 - 1.17±0.16 11.59±3.31 33.79±4.80 4.99±0.35血脂康組 0.1 1.11±0.121 13.59±3.131 34.15±3.85 4.51±0.241鷹嘴豆芽素A 0.3 1.08±0.151 13.62±1.461 33.81±3.45 4.68±0.331 0.6 1.06±0.061 13.59±1.111 33.82±2.48 4.57±0.481 1.2 1.05±0.051 13.50±1.101 33.85±2.40 4.51±0.281

4 討論

血漿中TC、TG和LDL-C濃度升高時，動脈壁內(nèi)脂質(zhì)，特別是膽固醇酯沉積增多，可引起中膜平滑肌組織大量增殖，促進高脂血癥的發(fā)生、發(fā)展，而HDL-C與發(fā)病率成負(fù)相關(guān)，它可以抑制細(xì)胞對LDLC的攝取，阻礙TC在細(xì)胞內(nèi)的堆積，把過多的TC轉(zhuǎn)運出來，從而阻止高脂血癥的發(fā)生［5］。故本實驗采用高脂模型的實驗方法，用藥后發(fā)現(xiàn)鷹嘴豆芽素A能顯著降低TC、TG、LDL-C水平及升高HDL-C水平(P＜0.05)，從而降低血脂。另外，鷹嘴豆芽素A可能是通過降低紅細(xì)胞的壓積，聚集和升高紅細(xì)胞的變形性，使血液處于低黏、低凝狀態(tài)，從而顯著性降低血液黏度。凝血時間的縮短意味著高脂血癥大鼠內(nèi)源性凝血功能發(fā)生障礙而使血液呈高凝狀態(tài)，F(xiàn)IB含量的增高也會使血流速度降低，黏度增加，而鷹嘴豆芽素A能延長PT和APTT(P＜0.05)，同時降低FIB(P＜0.05)，而 TT，即在凝血酶作用下，纖維蛋白原變成纖維蛋白，于血漿中加入標(biāo)準(zhǔn)化的凝血酶懸液后，血液凝固所需的時間，結(jié)合表3數(shù)據(jù)，相對于模型組，雖然FIB的降低能稍微延長TT，但是影響不大，所以認(rèn)為鷹嘴豆芽素A對TT的影響不明顯。因此，調(diào)整脂質(zhì)代謝，降低過高的血脂，是防治動脈粥樣硬化的重要方面之一，對減少心腦血管的發(fā)病率具有重要意義［6］。

本實驗表明，鷹嘴豆芽素A低、中和高劑量組能顯著降低高脂血癥大鼠的血脂水平、血液黏度、FIB含量，改善血液循環(huán)，抑制因血脂升高和脂質(zhì)代謝紊亂引起的血液凝血系統(tǒng)指標(biāo)的改變?？傊?，鷹嘴豆芽素A不僅能顯著降低血脂水平還能顯著降低血液黏度，減少血栓形成，所以，鷹嘴豆芽素A值得引起更多關(guān)注及進一步研究。

［1］ Chenni A，Yahia D A，Boukortt F O，et al.Effect of aqueous extract of Ajugaiva supplementation on plasma lipid profile and tissue antioxidant status in rats fed a high-cholesterol diet［J］.J Ethnopharmacol，2007，109(2):207-213.

［2］ Andrea P，Manuela C，Elena T，et al.Reaching LDL-C targets in high-risk patients requires high-efficacy cholesterol-lowering drugs in more than 50%of cases［J］.Pharmacol Res，2011，64(4):393-396.

［3］ 李 杰，王福文，孫敏耀，等.栗酮對實驗性高血脂大鼠調(diào)降脂作用研究［J］.中醫(yī)藥學(xué)報，2011，39(5):19-20.

［4］ 陳 博，沈燕慧，盧 偉，等.油酰乙醇胺對高脂血癥大鼠降血脂及肝臟的保護作用［J］.中國生化藥物雜志，2011，32(5):374-377.

［5］ Lehto S M，Hintikka J，Niskanen L，et al.Low HDL cholesterol associates with major depression in a sample with a 7-year history of depressive symptoms［J］.Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry，2008，32(6):1557-1561.

［6］ 徐云鳳，趙 雨，幺寶金，等.人參蛋白對高脂血癥模型大鼠的降血脂作用［J］.中藥新藥與臨床藥理，2011，22(2):138-140.