王國濱，關(guān)亞軍

（哈爾濱工業(yè)大學(xué)體育部，黑龍江 哈爾濱 150001）

對(duì)哈爾濱工業(yè)大學(xué)體育場(chǎng)館細(xì)菌量安全的研究

王國濱，關(guān)亞軍

（哈爾濱工業(yè)大學(xué)體育部，黑龍江 哈爾濱 150001）

基于保障學(xué)校運(yùn)動(dòng)場(chǎng)館的微生物環(huán)境安全，對(duì)學(xué)校運(yùn)動(dòng)館空氣、器械表面的細(xì)菌量進(jìn)行了測(cè)試實(shí)驗(yàn)，選取學(xué)校各場(chǎng)館不同時(shí)間段和不同人數(shù)時(shí)進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)和鑒定。此研究目的旨在明確各場(chǎng)館中細(xì)菌總數(shù)和類別是否對(duì)運(yùn)動(dòng)人員健康造成影響，為場(chǎng)館日常清潔做參考，為運(yùn)動(dòng)人員提供更加良好的鍛煉環(huán)境，推動(dòng)制定適用于體育運(yùn)動(dòng)場(chǎng)館設(shè)施的空氣質(zhì)量、微生物安全標(biāo)準(zhǔn)。

運(yùn)動(dòng)館； 細(xì)菌量； 安全

我國學(xué)校體育教學(xué)場(chǎng)館是學(xué)生群體進(jìn)行體育運(yùn)動(dòng)教學(xué)、訓(xùn)練比賽、健身的公共場(chǎng)所，運(yùn)動(dòng)過程中對(duì)環(huán)境安全，如對(duì)空氣、微生物環(huán)境（即對(duì)飄塵、SO2 、CO、NO2及有毒金屬如鉛、汞） 、運(yùn)動(dòng)設(shè)施、器械共用表面（運(yùn)動(dòng)者接觸部分）、隱蔽部位有害微生物菌團(tuán)（大腸桿菌、溶血性鏈球菌、綠膿桿菌）等有特殊的要求。同時(shí)這些場(chǎng)所也是使用人群集中、易成為公共群體交叉感染、傳播疾病的源頭。目前，國內(nèi)相當(dāng)多的運(yùn)動(dòng)場(chǎng)館沒有相關(guān)配套檢測(cè)、防控設(shè)備，而且我國體育場(chǎng)館微生物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)至今還沒有出臺(tái)。但近年來由于（大環(huán)境）空氣污染帶來的衍生體育場(chǎng)館（局部）環(huán)境安全條件（有害空氣、微生物致病種類與含量）因素增量變化趨勢(shì)，其中各種空氣污染以及其衍生環(huán)境對(duì)人們運(yùn)動(dòng)健康已然造成了負(fù)效影響。相比較社會(huì)商業(yè)性質(zhì)的體育場(chǎng)館，高校的體育場(chǎng)館存在著體育場(chǎng)地質(zhì)量一般，相關(guān)配套設(shè)施專業(yè)程度無法達(dá)到項(xiàng)目要求標(biāo)準(zhǔn)等問題[1]。本研究旨在明確場(chǎng)館中細(xì)菌總數(shù)和類別是否對(duì)運(yùn)動(dòng)人員健康造成影響，從而推動(dòng)體育運(yùn)動(dòng)場(chǎng)館設(shè)施的空氣質(zhì)量、微生物安全標(biāo)準(zhǔn)的制定，促進(jìn)國家體育場(chǎng)館防控體系的建立，豐富運(yùn)動(dòng)場(chǎng)館安全質(zhì)量管理理論體系，并以此為理論基礎(chǔ)保障學(xué)校運(yùn)動(dòng)場(chǎng)館空氣質(zhì)量的安全。

1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象與實(shí)驗(yàn)方法

1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象

實(shí)驗(yàn)中選取籃球館、體操館、羽毛球館、體育舞蹈館、健身館各場(chǎng)館不同時(shí)間段和不同人數(shù)空氣中的微生物、物體表面細(xì)菌量，進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)和鑒定，旨在明確各場(chǎng)館中細(xì)菌總數(shù)和類別是否對(duì)運(yùn)動(dòng)人員健康造成影響。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備（1）材料準(zhǔn)備：50ml一次性無菌注射器10只，培養(yǎng)皿90個(gè)，濾膜10個(gè)，50ml離心管（內(nèi)裝無菌水）10個(gè)，20ml試管30個(gè)，供微生物計(jì)數(shù)使用。

（2）培養(yǎng)基的制備：經(jīng)過滅菌的LB固體普通培養(yǎng)基500ml，我們選用的是牛肉膏蛋白陳普通固體培養(yǎng)基,比例為1000ml蒸餾水中，加牛肉膏10g蛋白陳3g，氯化鈉5g，瓊脂18g，.加熱溶解后調(diào)至中性或微堿性，滅菌條件為120℃，30min。未完全凝固時(shí)在無菌狀態(tài)下倒入平皿。

（3）培養(yǎng)皿和離心管等的準(zhǔn)備：將培養(yǎng)皿和裝有無菌水的離心管用牛皮紙包好，和干凈的試管以及封裝好的無菌水一起放入滅菌鍋中，滅菌條件為120℃，30min，滅菌后放入無菌室等待采樣。

1.2.2 采樣方法（1）注射器采樣法：在場(chǎng)館內(nèi)拆開無菌注射器包裝，抽取50ml空氣，之后在注射器前端裝濾膜，排出注射器內(nèi)空氣，空氣中微生物被留在濾膜中，采樣完畢后雙手用75℃消毒擦拭消毒，取下濾膜放入離心管內(nèi)，帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行計(jì)數(shù)。

（2）器械表面采樣法：器械表面材質(zhì)為布質(zhì)或皮革制品，選取相同材質(zhì)的物品，制成 1cm2*1cm2的方塊，用75%酒精消毒后粘附與器械表面，所粘附器械仍正常使用。3天后取下方塊，放入裝有無菌水的50mL離心管，當(dāng)天取離心管內(nèi)水樣接種培養(yǎng)，進(jìn)行平板計(jì)數(shù)。

（3）平板計(jì)數(shù)法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)：將離心管放入離心機(jī)中以8000r/min轉(zhuǎn)速離心，分離出濾膜中細(xì)菌，用磁力振蕩器振蕩5min，吸取1ml離心管中水樣，加入試管中，另加9ml無菌水，混勻后再吸取1ml試管中水樣加入另一試管中，再吸取9ml無菌水，重復(fù)一次，做3個(gè)梯度，每個(gè)梯度都進(jìn)行3次平板涂布，選取細(xì)菌數(shù)量在30～300間的梯度進(jìn)行計(jì)數(shù)，取平均值記為空氣中細(xì)菌數(shù)量。

1.2.3 生理生化指標(biāo)和脂肪酸鑒定對(duì)場(chǎng)館空氣中的微生物、物體表面細(xì)菌量進(jìn)行生理生化指標(biāo)和脂肪酸鑒定（見圖1）。

圖1 梯度稀釋示意圖

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 檢測(cè)結(jié)果

對(duì)學(xué)?；@球館、羽毛球館、體育舞蹈館、健身館進(jìn)行了空氣微生物、物體表面細(xì)菌量檢測(cè)。在上述的檢測(cè)中檢測(cè)出的細(xì)菌有: 煙曲霉、交鏈孢霉、微球菌屬等細(xì)菌并分析計(jì)算出單位平方厘米所含有的數(shù)量。對(duì)培養(yǎng)皿中細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)后得到微生物計(jì)數(shù)結(jié)果見表1～3。

表1 空氣中微生物細(xì)菌數(shù)量計(jì)數(shù)結(jié)果

每個(gè)場(chǎng)館的細(xì)菌種類和各種類含量相差不多,主要是青霉菌為多數(shù),細(xì)菌數(shù)量并沒有太顯著的差別。因?yàn)槠桨逵?jì)數(shù)采樣中的細(xì)菌有很大隨機(jī)性,所以可以認(rèn)為這些細(xì)菌數(shù)量相當(dāng)細(xì)菌污染程度與環(huán)境質(zhì)量成正比。細(xì)菌數(shù)目的多少, 與人口密集程度, 人員流動(dòng)有關(guān)。學(xué)校運(yùn)動(dòng)場(chǎng)館人群密度大, 流動(dòng)性大, 揚(yáng)起的灰塵多,人的呼吸道、皮膚及毛發(fā)上細(xì)菌的擴(kuò)散, 都是細(xì)菌增多的因素。每天的清掃消毒, 細(xì)菌數(shù)就少。環(huán)境中細(xì)菌數(shù)與人數(shù)相關(guān)。人數(shù)越多,細(xì)菌污染越嚴(yán)重。

表2 物體表面細(xì)菌量計(jì)數(shù)結(jié)果

表3 各場(chǎng)館有害菌分類所占比例統(tǒng)計(jì)

每個(gè)場(chǎng)館的細(xì)菌種類和各種類含量相差不多,主要是青霉菌為多數(shù),細(xì)菌數(shù)量并沒有太顯著的差別。因?yàn)槠桨逵?jì)數(shù)采樣中的細(xì)菌有很大隨機(jī)性,所以可以認(rèn)為這些細(xì)菌數(shù)量相當(dāng)細(xì)菌污染程度與環(huán)境質(zhì)量成正比。細(xì)菌數(shù)目的多少, 與人口密集程度, 人員流動(dòng)有關(guān)。學(xué)校運(yùn)動(dòng)場(chǎng)館人群密度大, 流動(dòng)性大, 揚(yáng)起的灰塵多,人的呼吸道、皮膚及毛發(fā)上細(xì)菌的擴(kuò)散, 都是細(xì)菌增多的因素。每天的清掃消毒, 細(xì)菌數(shù)就少。環(huán)境中細(xì)菌數(shù)與人數(shù)相關(guān)。人數(shù)越多,細(xì)菌污染越嚴(yán)重。

2.2 淺析細(xì)菌量、特征與危害

2.2.1 細(xì)菌量由表1可知，籃球館和乒乓球館中原有細(xì)菌數(shù)量并不多于羽毛球館，但活動(dòng)人數(shù)較多時(shí)細(xì)菌數(shù)量激增。同樣數(shù)量人員在不同館內(nèi)運(yùn)動(dòng)時(shí)，乒乓球館內(nèi)細(xì)菌數(shù)量最多，健身館、籃球館次之，然后是羽毛球館內(nèi)細(xì)菌數(shù)量最少?？諝庵形⑸飻?shù)量與人員數(shù)量、活動(dòng)方式有關(guān)。原因?yàn)榛@球館和乒乓球館中有人活動(dòng)時(shí)人員密度大，活動(dòng)量大，呼吸道和皮膚及毛發(fā)中的攜帶細(xì)菌擴(kuò)散積累很快，遠(yuǎn)高于羽毛球館和健身館；空氣中微生物數(shù)量與環(huán)境有關(guān)?；@球場(chǎng)和乒乓球館中無人時(shí)細(xì)菌數(shù)量很少，空氣清潔度高，表明日常清潔程度要高于另外兩個(gè)場(chǎng)館。室內(nèi)空氣中細(xì)菌總數(shù)規(guī)定4000cfu/m3。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果看出各場(chǎng)館中細(xì)菌數(shù)最高時(shí)為970個(gè)/L，換算結(jié)果遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于國家標(biāo)準(zhǔn)值，此外空氣中基本不含有致病菌，故空氣質(zhì)量良好。 此外由生理生化指標(biāo)測(cè)定和脂肪酸鑒定結(jié)果得知各場(chǎng)館內(nèi)微生物種類主要有細(xì)菌和真菌。微生物中細(xì)菌占絕大數(shù)量,其中球形菌比例居首，未檢測(cè)出溶血性菌和綠色鏈球菌，表明場(chǎng)館的日常維護(hù)良好，無滋生細(xì)菌的衛(wèi)生死角。

2.2.2 細(xì)菌特征與危害

（1）煙曲霉：（Aspergillus fumigatus）是一種重要的致病菌，煙曲霉進(jìn)入人體后，能引起多重變應(yīng)性和侵入性疾病，支氣管肺病屬于侵入性曲霉病最普通的臨床表現(xiàn)。屬于子囊菌類，它能夠產(chǎn)生菌絲體。通過從菌絲體釋放出來的無性孢子進(jìn)行傳播，這種孢子是一種極為堅(jiān)固、生命力持久的芽胞。 菌落形態(tài)為初期氣生菌絲為白色，基內(nèi)菌絲土黃色，菌落表面呈干粉狀，邊緣整齊，后轉(zhuǎn)為黃綠色霉層，基質(zhì)顏色不變；無滲出液。 反面呈微黃褐色；缺乏可溶性色素。菌絲、分生孢子梗發(fā)生于基質(zhì)和表面菌絲，菌絲有隔，孢子為分生孢子，孢子絲末端有分生孢子梗，帚狀枝大而規(guī)則；分生孢子串生，單孢，孢子呈圓球形。分生孢子穗圓筒形，呈深淺不同的綠色，分生孢子梗光滑，帶綠色；頂囊燒瓶狀，僅上半部產(chǎn)生孢子；分生孢子球形，有刺，綠色。感染所致侵襲性肺曲霉?。↖PA）是引起高?；颊撸ㄈ缰行粤＜?xì)胞減少癥、造血干細(xì)胞移植、長期高劑量使用激素和血液惡性腫瘤等免疫力低下患者）致死性感染的主要原因。由于IPA的發(fā)病率高、病情進(jìn)展迅速、死亡率高（60%～90%）及缺乏有效的治療藥物，其相關(guān)研究受到了極大關(guān)注。

（2）交鏈孢霉：（Alternaria）是土壤、空氣、工業(yè)材料上常見的腐生菌，植物的葉子、種子和枯草上也常見到，有的是栽培植物的寄生菌。菌絲暗至黑色，有隔膜，以分生孢子進(jìn)行無性繁殖。分生孢子梗較短，單生或叢生，大多數(shù)不分枝，與營養(yǎng)菌絲幾乎無區(qū)別。分生孢子呈紡錘狀或倒棒狀，頂端延長成喙?fàn)睿嗉?xì)胞，有壁磚狀分隔，分生孢子常數(shù)個(gè)成鏈，一般為褐色。尚未發(fā)現(xiàn)有性世代。有些菌種可用于生產(chǎn)蛋白酶，某些種可用于甾族化合物轉(zhuǎn)化。

（3）微球菌屬：(Micrococcus Cohn) 細(xì)胞球形，直徑0.5～2.0μm，成對(duì)、四聯(lián)或成簇出現(xiàn)，但不成鏈。革蘭氏陽性。罕見運(yùn)動(dòng)，不生芽孢。嚴(yán)格好氧。菌落常有黃或紅的色調(diào)。具呼吸的化能異養(yǎng)菌，從糖常產(chǎn)少量酸或不產(chǎn)酸。通常生長在簡單的培養(yǎng)基上。接觸菌落呈絨毛狀，多為灰黑色至黑色。 交鏈孢霉產(chǎn)生的交鏈孢霉毒素，有交鏈孢霉酚，酶陽性，氧化酶常常是陽性的，但往往是很弱的。通常耐鹽，可在5%NaCl中生長。含細(xì)胞色素，抗溶菌酶(Schleifer&Kloos，J Clin Microbiol 337～338，1975)。最適溫度25～37℃。最初出現(xiàn)在脊椎動(dòng)物皮膚和土壤，但從食品和空氣中也常常能分離到。 DNA的G+C mol%為64～75(Tm，Bd)。模式種：藤黃微球菌(Micrococcus luteus)，細(xì)菌——腸桿菌。

以上細(xì)菌在空氣中主要以兩種形式存在: 一是附著于空氣顆粒物上, 直徑大于10 μm 顆粒物可同細(xì)菌一起降落地面, 直徑小于10μm的細(xì)菌在空氣中主要以兩種形式存在: 一是附著于空氣顆粒物上, 直徑小于10μm 顆粒物則攜菌長時(shí)間漂浮在空氣中; 二是含于飛沫中, 當(dāng)人們噴嚏、咳嗽、唱歌、談話時(shí), 由口、鼻噴出飛沫, 附于飛沫中的細(xì)菌或附于飛沫蒸發(fā)而形成的“飛沫核”上的細(xì)菌，迅速分散于室內(nèi)各處, 長時(shí)間漂浮空氣中。在通風(fēng)不良, 空氣污濁,細(xì)菌數(shù)量多的室內(nèi), 極容易傳播呼吸道傳染病。

3 結(jié)論與建議

3.1 結(jié)論

（1）空氣中微生物數(shù)量與人員數(shù)量、活動(dòng)方式有關(guān)。籃球館和乒乓球館中原有細(xì)菌數(shù)量并不多于羽毛球館，但活動(dòng)人數(shù)較多時(shí)細(xì)菌數(shù)量激增。原因?yàn)榛@球館和乒乓球館中有人活動(dòng)時(shí)人員密度大，活動(dòng)量大，呼吸道和皮膚及毛發(fā)中的攜帶細(xì)菌擴(kuò)散積累很快，所以要遠(yuǎn)高于羽毛球館和健身館。

（2）各運(yùn)動(dòng)場(chǎng)館的空氣微生物菌團(tuán)數(shù)量低于現(xiàn)有國內(nèi)有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，說明各場(chǎng)館的空氣微生物量對(duì)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練是安全的。

3.2 建議

（1）加強(qiáng)體育館日常衛(wèi)生管理。由于到館人員大多要進(jìn)行劇烈的體育活動(dòng),而這種活動(dòng)會(huì)使沉積的灰塵、隱匿的細(xì)菌、人體呼吸道中的細(xì)菌彌散到空氣中,從而導(dǎo)致空氣中可吸入塵濃度升高,含菌量增加,小氣候惡化,空氣質(zhì)量下降，所以體育館工作人員要嚴(yán)格把握館內(nèi)的清掃次數(shù)以及認(rèn)真徹底清掃窗臺(tái)、更衣柜、暖氣等一些死角，尤其是健身館的地毯,健身器械表面要經(jīng)常吸塵。

（2）嚴(yán)格執(zhí)行換鞋制度是決定各功能場(chǎng)館衛(wèi)生狀況的主要因素。

（3）保證館內(nèi)通風(fēng)設(shè)備的正常運(yùn)行，從而保證空氣環(huán)境質(zhì)量。

［1］殷亮，溫超.黑龍江省高校體育場(chǎng)館經(jīng)營管理SWOT分析［J］.哈爾濱體育學(xué)院學(xué)報(bào)，2012,（2）:58-61.

［2］姚小林，韓冰，等.我國高校體育場(chǎng)館考核評(píng)估問題調(diào)查［J］.哈爾濱體育學(xué)院學(xué)報(bào), 2010,（3）:48-50.

［3］張金萍,張寅平,高鵬,等.奧運(yùn)場(chǎng)館室內(nèi)空氣品質(zhì)測(cè)評(píng)［J］. 建筑科學(xué)，2009,（ 6）：34-38.

［4］臧廣悅，沈陽體院室內(nèi)體育場(chǎng)館空氣衛(wèi)生學(xué)狀況研究［J］.遼寧師專學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2006,（3）：24-28.

The Study of Gym Microorganism Environment Safety at Harbin Institute of Technology

WANG Guo-bin, GUAN Ya-jun
(Department of Physical Education, Harbin Institute of Technology，Harbin 150001, Heilongjiang China )

In order to ensure the safety of the microorganism environment in our Gym, we underwent an experiment about the microorganism in the atmosphere and the equipments in our Gym in various time period and different density of people. The purpose of this experiment is to clarify the harm to those exercisers who work out in our Gym in terms of the kinds and amount of the microorganism, to set up guidance of daily housekeeping job, to provide better exercising environment. Meanwhile, it is also used to help set up the criteria of air quality and microorganism, set up the harm preventing system in all Gyms throughout the nation.

Gym; Microorganism; Safety

G818

A

1008-2808(2012)03-0107-04

G818

A

1008-2808(2012)03-0107-04

2012-05-13；

2012-05-29

2009年黑龍江省自然科學(xué)基金項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)：G200901G0312）。

王國濱（1957－），男，教授，雙學(xué)士學(xué)位，研究方向?yàn)轶w育教育。