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        藥用植物浸制標本液的配置方法改良初探

        2011-12-31 00:00:00趙穎劉中明
        職業(yè)·下旬 2011年8期

        《藥用植物學》課程是我校中藥、制藥、藥檢專業(yè)的必修課程,該課程分為植物器官形態(tài)、顯微構(gòu)造、植物分類學等三部分內(nèi)容。其中,植物器官形態(tài)部分的教學需要學生對花、果實等器官進行解剖或觀察等操作,而在實際教學中,因為受到季節(jié)、天氣等因素的影響,每次都使用新鮮材料的方法是不現(xiàn)實的,需要教師事先準備好部分植物浸制標本。但如果在浸制時所使用的固定液和保存液不合適的話,將會影響標本的色澤及觀察效果。為此,筆者對常用的幾種浸制液進行了實踐與改良,目前我校所使用的浸制液,對于保持植物標本的原色效果明顯。在此進行比較說明。

        一、簡易浸制液配比方法及優(yōu)缺點比較

        70%乙醇5ml,蒸餾水100ml,按此比例混合使用,能使標本保存時間較長而不腐爛發(fā)霉,但標本易脫色。

        5~10ml甲醛(福爾馬林),蒸餾水100ml,它的特點是價格較低,能使標本保存時間較長,但保存液本身易變成褐色,標本亦易褪色。

        95%乙醇100ml,甘油5~10ml,蒸餾水195ml,混合后使用,此保存液效果較好,但價格較貴,亦會使標本褪色。

        以上方法配置的浸制液,其配比方法簡單實用,原料來源方便,易操作,費用少,適合短期內(nèi)保存標本。但是,這些方法的共同缺點在于:浸制標本的原色容易喪失,影響標本在教學中的直觀性,不適用需要長期保存及保持原色的標本。

        二、常用浸制液簡介

        1.綠色標本的浸制液處理

        在50 ml 水里加入50 ml 冰醋酸,配成100 ml 體積分數(shù)為50%的乙酸溶液,再逐漸放進6g硫酸銅碎塊,不斷攪拌,制成飽和的乙酸銅原液。然后,將此飽和溶液按照1份溶液4份水的比例進行稀釋,隨后加熱。當加熱到80℃的時候,把修剪清潔過的綠色標本投入到溶液中,并輕輕翻動。在加熱過程中,綠色標本由綠轉(zhuǎn)黃,再次變成綠色時即可停止加熱。將標本在清水里洗滌干凈后,移入5%的甲醛中固定2~3天,最后在標本瓶中用配比為40%的甲醛40ml+95%的乙醇10ml+亞硫酸飽和水液50ml+蒸餾水1000ml所制的混合液浸泡保存,或者直接用5%~10%的甲醛或0.01~0.04g/ml的亞硫酸溶液浸泡,長期保存。

        禾本科植物或較易軟爛的植物,可以直接浸到飽和醋酸銅(制法如上所述)100ml和乙酸10~16ml的混合液中,或者浸到硫酸銅、甲醛混合液中,浸泡10~20天后再更換一次混合液并浸泡10天至恢復原色,取出洗凈,用5%的甲醛保存。

        2.多色標本的浸制液處理

        對于植株上有多種顏色的植物,先用質(zhì)量分數(shù)為20%的氯化鎂溶液浸泡1~4天,然后分別用質(zhì)量分數(shù)為30%、50%、75%的氯化鎂溶液依次浸泡,每次浸泡5~7天(pH為5.8),再分別用質(zhì)量分數(shù)為85%、95%、100%的氯化鎂溶液浸泡,每次浸泡7~10天。最后,在過飽和氯化鎂固定液中保持原色。

        優(yōu)缺點分析:以上浸制液處理后的標本,存放時間較長,標本的原色亦能保持。但是,這些浸制液的配制較為復雜,費用較高,處理程序繁瑣耗時,且所用的甲醛具揮發(fā)作用,對空氣造成污染,且對人體有一定的毒害作用,不利于保管人員及參觀人員的身體健康。

        三、改良浸制液簡介

        為解決以上問題,筆者與實驗老師經(jīng)過探索,自2004年以來,配比了幾種不同的浸制液,經(jīng)過比較,擇取了目前最為經(jīng)濟,操作簡易的浸制液,用該浸制液制取的浸泡植物標本,從2004年至今,色澤、外觀均與新鮮材料差異不大,現(xiàn)將本法簡介如下:

        1.實驗試劑

        冰醋酸、硫酸銅、水合氯醛、乙醇、純凈水等。

        2.實驗器材

        標本瓶16個,浸泡用大缸4個,采集、鑒定工具若干。

        3.植物材料

        益母草(帶紅花)、禺毛茛(帶黃花)、蓖麻(帶紫紅色果實)、老鼠拉冬瓜(帶綠色、黑色果實)。其中益母草、禺毛茛為全株帶白色根部,蓖麻折取帶果枝條,老鼠拉冬瓜剪取中間部分藤枝。

        4.實驗步驟說明

        先將以上植物材料進行清潔、剪枝處理,去除蟲卵、泥巴以及多余的枝條,保持植株美觀。然后分四組進行試驗,分別采用不同的試劑制取浸制液對標本進行處理,在多種環(huán)境中比較標本的變色及腐敗情況,最終完成實驗,得出結(jié)論。

        5.處理方法

        分對比組、實驗組1、實驗組2、實驗組3。每組均含以上四種植物標本,四種標本分別含有不同顏色的器官,可檢驗浸制液對多種色素的保色情況。

        6.過程

        (1)分別對四組植物材料進行保色處理。

        對比組:以常規(guī)方法,用冰醋酸、硫酸銅、純凈水制取乙酸銅溶液,將植物材料置于該溶液中浸泡,當看到植物體綠色部分轉(zhuǎn)黃褐色再轉(zhuǎn)回綠色時,及時取出清洗干凈后存于75%乙醇溶液中密封保存。

        實驗組1:將植物材料按常規(guī)方法進行保綠處理后,以0.2%水合氯醛溶液浸泡24h固定。然后清洗干凈存于75%乙醇溶液中密封保存。

        實驗組2:直接將清潔好的植物材料置于3.5%水合氯醛溶液中浸泡24h固定。取出后以純凈水不斷浸泡漂洗至水合氯醛全部被純凈水替換。然后以75%乙醇溶液密封保存。

        實驗組3:處理方法同實驗組2,只是把水合氯醛的濃度調(diào)低為0.2%。

        (2)實驗組處理原理分析。水合氯醛試液為常用優(yōu)良的化學透明劑之一,特點是能迅速透入組織,使干燥收縮的細胞逐漸膨脹復原,并能溶解大多數(shù)細胞內(nèi)含物,如淀粉粒、葉綠體、菊糖、樹脂、蛋白質(zhì)、揮發(fā)油等,使細胞組織清晰透明,易于觀察。筆者在用徒手切片法制做臨時裝片時發(fā)現(xiàn),用水合氯醛固定葉的橫切面裝片,當濃度配比合適時,葉片橫切面中的葉綠體不但沒有被溶解,反而整個裝片在一段時間內(nèi)能保持其色澤不變。據(jù)此,筆者大膽推測,是否可以用水合氯醛直接對植物材料進行固定處理,去除其體內(nèi)的淀粉粒、多糖、脂肪、蛋白質(zhì)、樹脂等易氧化、分解的物質(zhì),保留原有色素,達到保色的目的。本實驗方法基于此原理進行。

        (3)分階段檢查各組材料變色情況。本實驗時間自2004年6月始,其間經(jīng)一個月、三個月、一年、兩年、五年幾個階段對各組材料進行檢查,結(jié)果如表1所示。

        7.結(jié)果分析

        表1顯示,四組浸泡標本分別產(chǎn)生了不同變化。對比組為傳統(tǒng)浸制液處理,其綠色能長期保持,但是,該綠色與自然界植物比較,顏色有偏差,帶藍綠的色澤,其他顏色均在一段時期后褪色。實驗組1為傳統(tǒng)方法處理后,加0.2%水合氯醛固定。該法能使植物體的色澤長期保持,但同對比組一樣,顏色與原植物比較有偏差。實驗組2、3撇棄傳統(tǒng)方法,直接以不同濃度水合氯醛溶液對植物標本進行固定。實驗組2以3.5%水合氯醛溶液處理,本組標本褪色較嚴重,從水合氯醛能溶解脂肪等物質(zhì)的原理分析,用較高濃度的水合氯醛處理標本,不僅使淀粉粒、多糖等溶解,亦破壞了葉黃素、胡蘿卜素等脂溶性色素的結(jié)構(gòu),從而導致標本的褪色。實驗組3以0.2%水合氯醛溶液對植物材料進行處理,結(jié)果顯示,經(jīng)本法處理的標本,在較長一段時期內(nèi)能保持其原色鮮艷不變??紤]后期繼續(xù)以不同濃度的水合氯醛溶液進行實驗,以求找到最合適的配比方法。

        四、結(jié)論

        我校對藥用植物浸制標本液的改良方法探索結(jié)果顯示,本法所用的試劑水合氯醛對人體毒害性較小,臨床上亦用作催眠藥。水合氯醛須在加熱的情況下才會產(chǎn)生揮發(fā)性的有毒氣體,常溫下?lián)]發(fā)性非常小。當以合適濃度的水合氯醛對藥用植物標本進行固定時,能使植物標本長期保持原色。經(jīng)過固定的標本直接保存于75%濃度的乙醇溶液中。本法處理方式簡單,試液制取簡便易行,費用低廉。長期用于教學和參觀不會影響人員的身體健康。

        但是,由于本實驗所處理的植物標本數(shù)量、類型有限,未知本法對植物體內(nèi)含有乳汁、樹脂等植物的保色效果是否能達到預期目的,且目前所取水合氯醛濃度是否為最佳處理,這些都有待進一步實驗論證。

        (作者單位:廣西藥科學校,廣西衛(wèi)生職業(yè)技術學院)

        注:本文中所涉及到的圖表、注解、公式等內(nèi)容請以PDF格式閱讀原文

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