吳峰，曾瑩，梁華敏

(1.武漢醫(yī)藥衛(wèi)生學(xué)會(huì)聯(lián)合辦公室《中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志》編輯部，430014;2.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院藥劑科，武漢 430022;3.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院生理系，武漢 430030)

治痔膠囊是根據(jù)中藥長(zhǎng)期治療痔瘡的臨床實(shí)踐研制的中藥復(fù)方制劑，主要由槐角、槐花、地榆、荊芥、女貞子、黃連、黃芩、黃柏、熟大黃、當(dāng)歸、甘草等中藥組成。槐角丸用于治療痔瘡歷史悠久，因其確切的療效而在臨床上被廣泛使用［1］。筆者在本實(shí)驗(yàn)對(duì)兩種藥物體外抑菌作用進(jìn)行比較，為新藥治痔膠囊的繼續(xù)研究提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥品及主要試劑 治痔膠囊(自制，批號(hào):20090401)，槐角丸(武漢太福制藥有限公司提供，批號(hào):080701-1)，MH瓊脂(北京市海淀區(qū)微生物培養(yǎng)基制品廠提供)，菌種金黃色葡萄球菌25923、銅綠假單胞菌27853、大腸埃希菌25922標(biāo)準(zhǔn)菌株，均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，其他菌株為臨床標(biāo)本采集分離，并經(jīng)鑒定確證獲得。

1.1.2 儀器 SW-CJ-1FD型超凈工作臺(tái)(蘇凈集團(tuán)出品)，A400型多點(diǎn)接種儀(英國(guó))，梅里埃比濁儀(法國(guó))，萬(wàn)分之一天平(日本島津)，SKP-01電熱恒溫培養(yǎng)箱(湖北省黃石市醫(yī)療器械廠)。

1.2 方法

1.2.1 治痔膠囊藥液的制備 取治痔膠囊浸膏(濃度1.46 g·mL-1)60 g，加純化水稀釋至100 mL(相當(dāng)于100%，即含主藥1 g·mL-1藥液)，取該混懸液50 mL，加純化水至100 mL(50%，即0.5 g·mL-1)，以此類(lèi)推，將藥液稀釋至 0.5，0.25，0.125，0.062 5，0.031 3 g·mL-1，將稀釋后的藥物混懸液用流通蒸汽滅菌30 min后調(diào)節(jié)滲透壓為290～310 mOsm·L-1，pH為6.8～7.2，待用。

1.2.2 槐角丸藥液的制備 取槐角丸粉60 g(相當(dāng)于原藥材50 g)，加水至100 mL(相當(dāng)于50%藥液，即0.5 g·mL-1)，取該混懸液50 mL加水至100 mL(相當(dāng)于25%藥液，即0.25 g·mL-1)，以此類(lèi)推將槐角丸稀釋為 0.5，0.25，0.125，0.062 5，0.031 3 g·mL-1，將稀釋后的藥物混懸液用流通蒸汽滅菌30 min后，調(diào)節(jié)滲透壓為290～310 mOsm·L-1，pH為6.8～7.2，備用。1.2.3 培養(yǎng)基的制備 分別取上述已稀釋好的治痔膠囊和槐角丸藥液2 mL，加入到一系列已作好標(biāo)記內(nèi)徑為90 mm平板內(nèi)，再將已在50℃水浴中平衡＞30 min的MH瓊脂液18 mL也加入到平板內(nèi)(藥液∶瓊脂=1∶9)，邊加邊搖晃平板，使藥物和培養(yǎng)基充分混勻［2］。

1.2.4 菌株的準(zhǔn)備 細(xì)菌的鑒定按照全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［3］操作，挑取新鮮培養(yǎng)純菌落3或4個(gè)菌落，用0.9%氯化鈉溶液配成0.5麥?zhǔn)蠞岫染?，取該菌?.1 mL加入0.9%氯化鈉溶液0.9 mL中，置于菌液托盤(pán)，備用。

1.2.5 抑菌實(shí)驗(yàn) 采用多點(diǎn)接種儀在水平臺(tái)上，從低濃度含藥平板向高濃度含藥平板，逐個(gè)接種細(xì)菌，接種量為1μL。然后將已完成接種的平板置于35℃恒溫培養(yǎng)箱中孵育16～20 h。

1.3 結(jié)果判斷 將平板置于暗色、無(wú)反光物體表面上判斷試驗(yàn)終點(diǎn)，以菌落生長(zhǎng)被完全抑制的最低藥物濃度為該藥對(duì)檢測(cè)菌的最低抑菌濃度(minimal inhibitory concentration，MIC)。

2 結(jié)果

治痔膠囊對(duì)常見(jiàn)的6種細(xì)菌均有抑菌作用。其對(duì)金黃色葡萄球菌、變形桿菌、乙型鏈球菌的 MIC為0.062 5 g·mL-1;對(duì) 銅 綠 假 單 胞 菌 的 MIC 為0.125 g·mL-1;對(duì)大腸埃希菌的MIC為0.25 g·mL-1;對(duì)腸球菌的的MIC為0.5 g·mL-1。槐角丸對(duì)金黃色葡萄球菌、變形桿菌的生長(zhǎng)有抑制作用，其對(duì)兩者的MIC均為0.125 g·mL-1;槐角丸對(duì)另外4種細(xì)菌生長(zhǎng)均無(wú)抑制作用。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 治痔膠囊和槐角丸對(duì)6種常見(jiàn)細(xì)菌的抑制作用Tab．1 The bacteriostasis of zhizhi capsules and huaijiao pills on 6 kinds of common bacterium

3 討論

痔瘡是在成年人中多發(fā)的一種常見(jiàn)病，臨床主要表現(xiàn)為便血、脫出、腫痛。究其病因，祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為:“肛門(mén)不潔，外感邪毒，或濕熱內(nèi)蘊(yùn)，下注肛門(mén)，久則致氣滯而淤，筋脈橫解，腸澼為痔”［4］。臨床上采用中成藥治療痔瘡，往往可獲良效。本課題組研制的治痔膠囊，在其組方中的槐角、槐花、地榆、荊芥、女貞子可涼血止血;黃連、黃芩、黃柏可清熱化濕;熟大黃、當(dāng)歸可活血消腫;甘草可解毒，并調(diào)和諸藥。全方共奏清熱解毒，活血化瘀之功效。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，痔瘡及肛腸病術(shù)后腫脹疼痛常常與局部炎癥因素密切相關(guān)［4］，體外抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:治痔膠囊具有抑制金黃色葡萄球菌、變形桿菌、大腸埃希菌、乙型鏈球菌、銅綠假單胞菌、腸球菌的生長(zhǎng)的作用。與臨床廣泛使用的槐角丸比較，該藥具有更強(qiáng)的抑菌能力。本實(shí)驗(yàn)為治痔膠囊用于臨床治療痔瘡腫痛提供了科學(xué)依據(jù)。

［1］ 王麗華，段玉峰，丁紅軍，等.槐角丸的研究進(jìn)展［J］.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2007，7(5):793-795.

［2］ 徐淑云，卞如濂，陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］.3版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2003:911.

［3］ 葉應(yīng)嫵，王毓三，審子瑜，等.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［M］.3版.南京:東南大學(xué)出版社，2006:337-467.

［4］ 陳紅錦，錢(qián)海華，徐慧琴，等.龍腦消痔露的制備工藝及體外抑菌實(shí)驗(yàn)研究［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2005，16(12):1207-1208.