季艷菊，張 偉，鄒曉紅，葉鏡岳，曾惠斯

（1.廣東省惠州農(nóng)業(yè)學校，廣東惠州 516023；2.江門市科澤家禽發(fā)展有限公司，廣東江門 529162）

2011年4月至5月，廣東江門地區(qū)天氣晝夜溫差大，某些飼養(yǎng)某一特定品種雞的散養(yǎng)戶（與養(yǎng)殖公司合作），均不同程度出現(xiàn)大量死亡，經(jīng)合作公司的技術人員臨床癥狀觀察、病理剖檢和實驗室診斷后最終確診為大腸桿菌病，并做了藥物敏感性試驗。通過淘汰病雞、嚴格消毒、緊急肌注敏感性藥物等措施最終控制了該病。

1 發(fā)病特點

該養(yǎng)殖公司的合作農(nóng)戶中，進某一快大品種的雞均不同程度出現(xiàn)死亡，多在5日齡后發(fā)病并出現(xiàn)死亡，這之前比較正常。個別養(yǎng)戶早的在2日齡，晚的有在12日齡。而且往往7日齡經(jīng)免疫新支二聯(lián)苗后會加重病情。有些養(yǎng)戶，在同一雞棚內(nèi)飼養(yǎng)另一品種，反而發(fā)病很輕。在4月份進的該品種雞苗中，羽毛越黑越深，往往發(fā)病后容易死亡。發(fā)病率幾乎在80%，死亡率10%~30%。而且，發(fā)病雞均來自于同一種雞欄，該欄正處于產(chǎn)蛋78%產(chǎn)蛋高峰，所以，發(fā)病的雞均為初生苗（出苗后皮注頭孢類抗生素），而且平時就反映該品種雞抵抗力弱。

2 臨床癥狀

病雞精神沉郁，食欲不振，有輕微的呼吸道癥狀消瘦，羽毛松亂，呆立，垂翅，拉稀，肛門周圍被糞便糊住。發(fā)病期間曾使用青霉素、鏈霉素、強力霉素、泰樂菌素等均未見效果。

3 剖檢變化

剖檢病死雞發(fā)現(xiàn)腹腔內(nèi)積有大量積液，肝臟腫大，有針尖狀的白色壞死點，心臟出現(xiàn)肉芽腫，胸腔膜有黃色干酪分泌物，個別腸道出現(xiàn)出血點，腸道黏膜脫落等。因為只在特定品種上廣泛發(fā)生該病，故初步診斷為種源性雞白痢沙門氏菌病。

4 實驗室診

4.1 細菌分離

分別無菌采集病肉死雞、種雞和出生苗三者的肝和脾，另不同天齡胚蛋，接種麥康凱瓊脂、SS瓊脂平板培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)24 h后，觀察結(jié)果：除胚蛋接種的平板均未有細菌生長外，其它三種來源組織的TSA平板均生長出光滑、灰白色菌落，麥康凱平板均生長出紅色、圓形、隆起、光滑濕潤、邊緣整齊的菌落，而且均呈現(xiàn)為單一的菌落。

4.2 染色鏡檢

用接種環(huán)分別無菌挑取三種來源組織分離菌于麥康凱、TSA平板上培養(yǎng)，后在載玻片上制成涂片，進行革蘭氏染色，鏡檢。觀察細菌形態(tài)：兩種來源組織的分離菌均為革蘭氏陰性兩端鈍圓無芽胞短桿菌（接近球型），長約2~3μm。單個排列或成對排列。

4.3 生化試驗

將三種來源組織分離菌的純培養(yǎng)物分別接種于生化培養(yǎng)管中，作生化試驗。均可以發(fā)酵葡萄糖、蔗糖、甘露糖、木糖、鼠李糖、山梨醇、阿拉伯糖；不發(fā)酵乳糖，不水解尿素、不液化明膠，甲基紅試驗陽性、V-P試驗陰性。

4.4 PCR鑒定

對肉死雞、種雞分離菌進行EC種特異性鑒定，E.coli檢測的引物如下[1]：

上游引物：5'-ACGTCATCCCACCTTCCTC-3′

下游引物：5'-TCATTGACGTTACCCGCA-3′

擴增目的片段為16 sRNA特異性的718 bp片段，結(jié)果與預期大小一致。如下電泳圖1。

4.5 血清型鑒定

利用中國獸藥監(jiān)察所提供的大腸桿菌標準抗O型血清，進行凝集試驗。結(jié)果：從種雞、雞苗和發(fā)病肉雞來源的E.coli均屬于O8型。

經(jīng)合作公司的技術人員臨床癥狀觀察、病理剖檢和實驗室診斷后最終確診此次肉雞發(fā)的病為種源性大腸桿菌病。

4.6 藥敏試驗

按紙片擴散法將被檢細菌菌涂布接種于接種于普通瓊脂平板上，間隔一定距離貼上各種藥敏試紙，于37℃培養(yǎng)16~18 h，結(jié)果判斷依據(jù)《紙片法抗菌藥物敏感試驗操作標準（第四版）》進行：頭孢唑啉、利特靈、頭孢拉定、阿莫西林、舒巴坦敏感；卡那霉素、壯觀霉素、氧氟沙星、慶大霉素、氟苯尼考中度敏感；青霉素、紅霉素、鏈霉素、阿奇霉素、利福平耐藥。

5 治療

5.1 對種雞孵化房環(huán)境進行徹底消毒，同時，對雞苗在出苗前皮注敏感性抗生素，另外，相應欄舍種雞加強飼養(yǎng)管理和防疫，也肌注敏感性抗生素。

5.2 徹底清除養(yǎng)戶雞棚內(nèi)糞便，更換墊料，對用具、欄舍、場地進行全面消毒，進苗后連飲三天敏感性抗生素。

經(jīng)以上防治措施后，疫情得到很好控制。

6 小結(jié)

雞大腸桿菌病是致病性大腸桿菌引起的一種雞急性或慢性細菌性傳染病[2]，是一種多發(fā)病、常見病。該菌普遍存在于患病禽類、隱性感染的禽類機體內(nèi)，它是條件性細菌，當飼養(yǎng)管理不當，環(huán)境條件比較差時，不同日齡、不同季節(jié)都可以發(fā)病，本病常與其他疾病并發(fā)或繼發(fā)[3-5]。本文中對感染種雞所產(chǎn)雞胚中均未分離到大腸桿菌，從而在一定程度上說明，該菌可能不能進行垂直傳播。由于受國內(nèi)大環(huán)境的影響，大腸桿菌耐藥性程度俞年性增加，耐藥菌株越來越多，從而給防治大腸桿菌這一常見病帶了很大難度。在平時的防治過程中，往往出現(xiàn)，無藥可救的局面。所以有時不得不借助于實驗室診斷及藥敏實驗的指導來加以控制。但養(yǎng)殖過程，對大腸桿菌最好的防控還是要加強日常的飼養(yǎng)管理和防疫。

[1]覃宗華，蔡建平，呂敏娜，等.鴨疫里默氏菌病和大腸桿菌病鑒別診斷雙重PCR方法的建立和應用 [J].畜牧獸醫(yī)學報，2008，39（4）：517-521.

[2]尹德勝，唐后天.一起肉雞大腸桿菌病的診治[J].畜牧與飼料科學，2010（5）：177-182.

[3]汪力一，賈海軍，韓旭東，等.影響雞大腸桿菌病的病原分析對策研究[J].畜牧與飼料科學，2009（11）：49-51.

[4]蘭玲，黃瑛，加伊那古力，等.麻花雞大腸桿菌并發(fā)禽敗血克原體病的診斷與治療[J].中國動物檢疫，2008，25（11）：42.

[5]劉珍麗，馬鵬燕，劉珍梅，等.雞大腸桿菌病的調(diào)查及診斷[J].中國動物檢疫，2007，24（3）：47-48.