（1.武漢工程大學(xué)化工與制藥學(xué)院，綠色化工過(guò)程省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北省新型反應(yīng)器與綠色化學(xué)工藝重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢 430074；

2.湖北省襄樊市中心醫(yī)院，湖北 襄樊 441021）

頭孢克肟固體分散體的制備及溶出度測(cè)定

（1.武漢工程大學(xué)化工與制藥學(xué)院，綠色化工過(guò)程省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北省新型反應(yīng)器與綠色化學(xué)工藝重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢 430074；

2.湖北省襄樊市中心醫(yī)院，湖北 襄樊 441021）

采用固體分散體技術(shù)提高頭孢克肟在水中的溶解度，以提高生物利用度.以A為載體，采用溶劑-熔融法制備頭孢克肟固體分散體.用正交設(shè)計(jì)方法優(yōu)選制劑工藝，確定出最優(yōu)處方為：頭孢克肟∶載體A∶乙醇＝l∶4∶8（g／g／g）.選用紅外光譜法對(duì)頭孢克肟固體分散體進(jìn)行物相鑒定，并測(cè)定其溶出度.結(jié)果表明：頭孢克肟－載體A（1∶4）固體分散體在水中（20℃）的溶出度為95.2%，明顯高于原料藥（24.8%）及物理混合物（28.6%）；紅外光譜法檢測(cè)出頭孢克肟固體分散體在1 780 cm－1附近處的羰基吸收峰的強(qiáng)度大幅度降低.說(shuō)明采用溶劑－熔融法形成了頭孢克肟固體分散體.頭孢克肟形成穩(wěn)定的固體分散體后，溶出度顯著提高.

頭孢克肟；固體分散體；制備；溶出度；紅外光譜

0 引 言

頭孢克肟（Cefixime、Cefspan，Cef）是第三代口服頭孢菌素［1］，由日本藤澤（Fujisawa）公司開發(fā)，具有抗菌譜廣，口服后吸收良好，組織分布廣泛等特點(diǎn)，因此將其拓展制成獸藥，可用于治療一些人畜共患細(xì)菌感染疾?。?－3］.然而，考慮到動(dòng)物給藥的局限性及頭孢克肟難溶于水［4］的特性，故考慮將其制成易溶于水的固體粉劑［5－6］，大大提高其水溶性，同時(shí)克服溶液劑運(yùn)輸、攜帶、貯存不便的缺點(diǎn)，待使用時(shí)將固體分散體投入水中，形成均相溶液，方便動(dòng)物給藥，提高生物利用度.

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器

電子天平（AB204-N 型，上海 Mettler-toledo公司）；集熱式恒溫加熱磁力攪拌器（DF-101S型，上海東璽制冷儀器設(shè)備有限公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（RE-52型，上海玻璃儀器廠）；循環(huán)水式真空泵（SHZ-D（Ⅲ）型，鞏義市英峪予華儀器廠）；高效液相色譜儀（戴安P680 HPLC PUMP）；數(shù)控超聲波清洗器（KQ5200DB型，昆山市超聲儀器有限公司）；紅外光譜儀（FTIR-650，天津天光光學(xué)儀器有限公司）；溶出度測(cè)定儀（RC-8D，天津天光光學(xué)儀器有限公司）；自動(dòng)雙重純水蒸餾器（SZ-93型，上海亞榮生化儀器廠）；電熱鼓風(fēng)干燥箱（CS101-1 AB型，重慶銀河試驗(yàn)儀器有限公司）；真空干燥箱（WG2003型，重慶四達(dá)實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）.

1.2 材料與試劑

Cef對(duì)照品［湖北賽博藥業(yè)有限公司實(shí)驗(yàn)室精制質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.97%（HPLC）］；Cef原料藥（湖北賽博藥業(yè)有限公司，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.50%）；乙醇（天津市博迪化工有限公司，質(zhì)量分?jǐn)?shù)95%）；載體A（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，化學(xué)純）；磷酸二氫鉀（北京亞太龍興化工有限公司，化學(xué)純）；氫氧化鈉（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，化學(xué)純）；溴化鉀（北京康普匯維科技有限公司，分析純）；Cef固體分 散 體 （自 制，批 號(hào)：20100511、20100512、20100513）；復(fù)合膜軟包裝（上海宏利藥用包裝材料有限公司，藥用級(jí)）；微孔濾膜（0.45μm，上海興亞凈化材料廠）；蒸餾水（自制）；娃哈哈純凈水（市售）.

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 Cef固體分散體的制備

本試驗(yàn)采用溶劑－熔融法法制備Cef固體分散物［7］.按處方量稱Cef原料藥，載體A，溶劑乙醇.先將Cef置于乙醇中，震蕩使其溶解，備用，再將載體A在水浴（70℃）水浴上加熱熔融，在劇烈攪拌下分批加入Cef溶液，保持一定的攪拌速度攪拌10 min，待溶劑蒸發(fā)完全得到淺黃色粘稠液體，驟降溫度，使之固化，真空干燥，粉碎過(guò)篩即得.

2.2 Cef固體分散體的溶出度測(cè)定

色譜條件：色譜柱為 Dionex C18（5μm，250 mm×4.6 mm）；流動(dòng)相為四丁基氫氧化銨溶液（取質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%四丁基氫氧化銨溶液25 m L，加水1 000 m L，搖勻，用1.5 mol·L－1磷酸溶液調(diào)節(jié)p H 值至7.0）；乙腈（775：225）；流速：1.5 m L／min；檢測(cè)波長(zhǎng)：239 nm；進(jìn)樣量20μL；柱溫：30℃.

2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備［8］精密稱取適量的Cef標(biāo)準(zhǔn)品，以p H7.0的磷酸鹽緩沖液為溶劑，配成系列質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液（20、40、60、100、160、200、300、400μg／m L），分別進(jìn)樣20μL，每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定5次，以質(zhì)量濃度（C）為橫坐標(biāo)，峰面積（A）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：A＝0.576 4C＋0.294 4（R2＝0.999 9）.結(jié)果表明，標(biāo)準(zhǔn)曲線在20～400μg／m L的范圍，線性關(guān)系良好.

2.2.2 溶出度的測(cè)定［9］取經(jīng)過(guò)脫氣處理的蒸餾水注入溶出杯中，體積為V（1 000 m L），取含Cef標(biāo)示量為a（%）的樣品，放入溶出杯中，投入的質(zhì)量為m（mg），將攪拌槳降至容器中，溫度為37℃，保持轉(zhuǎn)速為100 r／min，以藥物接觸溶出介質(zhì)開始計(jì)時(shí)，至5、10、15、20、30、40、50 min時(shí)取樣10 m L，同時(shí)立即補(bǔ)充蒸餾水10 m L，取出的液體經(jīng)0.45μm的微孔濾膜過(guò)濾后，棄去初濾液，精密移取續(xù)濾液2 m L置10 m L容量瓶中，加溶劑定容，取20μL注入液相色譜儀，測(cè)出峰面積（A），由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣品溶液中頭孢克肟的質(zhì)量濃度C（μg／m L），按照下式計(jì)算 Cef的累積溶出度Y（%）：

2.3 正交實(shí)驗(yàn)

選擇影響藥物溶出度的4個(gè)因素：A為Cef與載體 A 的比例（g／g），B為溶劑乙醇的用量（g），C為溫度（℃），D 為時(shí)間（min）.在Cef的用量為1 g的情況下，采用正交設(shè)計(jì)的方法進(jìn)行制備工藝條件的優(yōu)化，選取L9（34）正交表（見表1），以制備的固體分散體在水中的溶出度為考察指標(biāo)，以極差法對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，選出最優(yōu)條件.

表1 因素水平表Table 1 Factors level table

2.4 固體分散物的驗(yàn)證

2.4.1 紅外光譜測(cè)定 用溴化鉀將Cef固體分散體（1∶4，批號(hào)20100511）、Cef原料藥、載體A、物理混合物（1∶4，物混物）分別壓片，在500～4 000 cm－1范圍內(nèi)分別測(cè)定紅外吸收光譜.

2.4.2 溶出度的測(cè)定 取適量的Cef原料藥、Cef固體分散體（1∶4，批號(hào)20100511）、物理混合物（1∶4，物混物）分別按2.2.2項(xiàng)下操作，并計(jì)算其累計(jì)溶出度.

2.5 固體分散物的質(zhì)量考察

2.5.1 固體分散物在水溶液中穩(wěn)定性考察 取Cef固體分散物（1∶4，批號(hào)20100511）適量撒于水中，分別在5 min、30 min時(shí)，1 h、2 h、4 h、6 h、8 h取樣，樣品溶液經(jīng)0.45μm的微孔濾膜過(guò)濾后，棄去初濾液，精密移取續(xù)濾液2 m L置10 m L容量瓶中，加溶劑定容，取20μL注入液相色譜儀，測(cè)出峰面積（A），由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣品溶液中Cef的質(zhì)量濃度C（μg／m L），計(jì)算Cef的標(biāo)示百分含量（%），同時(shí)觀察HPLC圖譜中是否有新的吸收峰產(chǎn)生.

2.5.2 加速實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性 在超長(zhǎng)的條件下進(jìn)行的.其目的是通過(guò)加速藥物的化學(xué)或物理變化，探討藥物的穩(wěn)定性，為處方設(shè)計(jì)、工藝改進(jìn)、質(zhì)量研究、包裝改進(jìn)、運(yùn)輸、貯存提供必要的資料.將按正交設(shè)計(jì)最優(yōu)處方制備的3批樣品（批號(hào)20100511、20100512、20100513），按照按市售包裝，在溫度（40±2）℃，相對(duì)濕度（75±5）%的條件下放置6個(gè)月.所用設(shè)備應(yīng)能控制溫度±2℃，相對(duì)濕度±5%，并能對(duì)真實(shí)溫度與濕度進(jìn)行監(jiān)測(cè).在試驗(yàn)期間第1個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月末分別取樣一次，按穩(wěn)定性重點(diǎn)考察項(xiàng)目檢測(cè).以確定其穩(wěn)定性.

3 結(jié)果與分析

3.1 正交優(yōu)化結(jié)果

正交試驗(yàn)極差分析結(jié)果見表2.

分析可知，試驗(yàn)號(hào)為2，3，8的工藝制備的Cef固體分散體水溶性較好，其溶出百分率分別為96.16%，95.13%，96.11%，綜合考慮載藥量、制備成本及操作可行性，2號(hào)試驗(yàn)溶劑用量小，攪拌時(shí)間較短，制備溫度要求低，且溶解性最好.故初步選定2號(hào)為最佳制備工藝.

表2 正交優(yōu)化實(shí)驗(yàn)表Table 2 The date of orthogonal experiment

極差分析結(jié)果表明，影響Cef固體分散體的溶出度的因素分別為：溶劑用量﹥攪拌時(shí)間﹥藥物與載體的比例﹥溫度.溶劑用量對(duì)Cef固體分散體的溶解度的影響最大，故在制備時(shí)要嚴(yán)格控制溶劑用量.其次為攪拌時(shí)間，而藥物與載體的比例和制備溫度對(duì)Cef的溶解度影響不是非常顯著.確定最佳處方比例為Cef：載體 A∶乙醇＝1∶4∶8（g／g／g）；最佳制備工藝為溫度75℃，攪拌時(shí)間15 min.

采用最優(yōu)方案（2號(hào)）進(jìn)行3批的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，結(jié)果 3 批 樣 品 （批 號(hào)：20100511、20100512、20100513）的溶出度分別達(dá)到96.11%、96.25%和96.17%，表明該處方和制備工藝具有較強(qiáng)的可重復(fù)性和可信性.

3.2 固體分散物的驗(yàn)證

3.2.1 紅外光譜圖 紅外光譜測(cè)定結(jié)果表明，Cef原料藥及物理混合物均于1 780 cm－1附近有強(qiáng)吸收峰（羰基吸收峰），而Cef固體分散體在1 780 cm－1附近處的羰基吸收峰的強(qiáng)度大幅度降低，說(shuō)明原料藥已經(jīng)形成固體分散體.固體分散體中Cef的羰基吸收峰強(qiáng)度降低，可認(rèn)為是Cef與載體在固體分散體中以氫鍵締合所致.

3.2.2 溶出度 測(cè)定結(jié)果如圖1所示.

圖1 溶出度曲線Fig.1 The dissolved curve

由圖1可見，Cef制備成固體分散體后，常溫（20℃）條件下的溶出速率大大增加，其5 min內(nèi)的溶出度即可高達(dá)88%.比較Cef原料、Cef物混物和Cef固體分散物的溶出率曲線，三者在50 min時(shí)溶出度接近最大值，分別為24.8%、28.6%和95.2%.因此，將頭孢克肟制備成固體分散體，其溶出度有很大的提高，約為原料藥、物理混合物溶出度的4倍.

3.3 固體分散體的質(zhì)量考察

3.3.1 固體分散體在水溶液中穩(wěn)定性考察

固體分散體在水溶液中穩(wěn)定性考察固體分散體在水溶液中穩(wěn)定性考察結(jié)果見圖2.

圖2 Cef固體分散體在水溶液中隨時(shí)間變化而引起的含量變化Fig.2 The concentration change of solid dispersion in water as time changed

由圖2可見，固體分散物在水溶液中的溶解速率極快，30 min時(shí)溶出度達(dá)到93.2%，之后Cef在水中的濃度保持恒定.結(jié)果表明：頭孢克肟固體分散體在水溶液中穩(wěn)定性好.觀察測(cè)定Cef含量時(shí)的HPLC圖譜可知，樣品溶液隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，圖譜中無(wú)新的吸收峰產(chǎn)生，表明未產(chǎn)生其他雜質(zhì).3.3.2 初步穩(wěn)定性考察 加速實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：市售包裝的頭孢克肟固體分散體在溫度（40±2）℃，相對(duì)濕度（75±5）%的實(shí)驗(yàn)條件下放置6個(gè)月，樣品的各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)均無(wú)明顯變化，該結(jié)果表明本品質(zhì)量穩(wěn)定.

4 結(jié) 語(yǔ)

a.以A為載體，采用溶劑一熔融法制備的固體分散體能顯著提高Cef的溶解度和溶出度，Cef固體分散物的溶解度是原料藥的4倍，較好的促進(jìn)其溶解.

b.通過(guò)單因素考察以及正交設(shè)計(jì)的方法，對(duì)影響Cef固體分散體溶出度的因素進(jìn)行篩選，得到最優(yōu)工藝為Cef∶載體A∶溶劑＝1∶4∶8（g／g／g）.

c.對(duì)固體分散體進(jìn)行驗(yàn)證，紅外光譜和溶出度測(cè)定結(jié)果證明頭孢克肟固體分散體形成.

d.通過(guò)對(duì)其在水溶液中的穩(wěn)定性和初步穩(wěn)定性的考察，表明制備的Cef固體分散物穩(wěn)定性良好.

［1］崔福德.藥劑學(xué)［M］.5版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2005.

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Preparation and dissolution of cefixime solid dispersion

YAN Shao-kang1，LIU Yong-hong2，LI Lu-ping1，XIAO Fang1，LIU Yong－qiong1
（1.Key laboratory for Green Chemical Process of Ministry of Education，Hubei key Laboratory of Novel Chemical reacfor＆Green Chemical Technotogy，School of Chemical Engineering＆Pharmacy，Whan Institute of Technotogy，Wuhan 430074，China；
2.Xiangfan Central Hospital，Xiangfan 441021，China）

The technology of solid dispersion to improve the dissolution of cefixime and its bioavailability was used.Taking A as the carrier，using solvent-melting method to prepare the cefixime solid diapersion and using orthogonal design to perfect preparation technology，the best prescription was cefixime∶carrier A∶alcohol＝1∶4∶8（g／g／g）.Choosing the technology of infrared spectrum to identify the phase of cefixime solid diapersion and determine its dissolution，the result shows that the dissolution of cefiximecarrier A（1∶4）solid dispersion 95.2%is obviousiy exceeding the active pharmaceutical ingredient 24.8%and physics mixture 28.6%.Using solvent-melting method can shape solid diapersion better which was explained by the detection of infrared spectrum.The strength of Cefixime and carrier＇s crystalloid absorption peak dropped drastically at 1 780 cm－1.The conclusion is that the dissolution can be improved when cefixime formed solid diapersion.

cefixime；solid diapersion；preparation；dissolution；infrared spectrum

張 瑞

TQ460.4

A

10.3969／j.issn.1674-2869.2011.11.007

1674－2869（2011）11－0027－04

2011－09－22

嚴(yán)少康（1987－），男，湖北荊門人，碩士研究生.研究方向：藥物合成與制劑.

指導(dǎo)老師：劉永瓊，女，教授，碩士研究生導(dǎo)師.研究方向：藥物合成、藥物制劑與天然藥物.＊通信聯(lián)系人